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1、高碘對橋本甲狀腺炎大鼠TRAIL表達(dá)的影響作者:張雅萍,帖麗麗,張南雁,姬秋和【關(guān)鍵詞】碘;TRAIL;甲狀腺炎,自身免疫性 EffectofiodineexcessonTRAILexpressioninratsotosthyroiditis 【Abstract】AIM:ToexplorethesignificanceoftheexpressionofTRAILinthepathogenesisandpathologicalchangesinthesituationofiodineexcessinratsentalautoimmu
2、nethyroiditis(EAT).METHODS:FemaleSDratsalmodelsandfedonhighiodinedietsinthisstudy.Immunohistochemicalmethodsalcontrolgroup,EATmodelgroupandEATiodineexcessgroup(P<0.05).StronglypositiveimmunostainedthyroidfollicularcellsofEATratsforTRAILmainlydistributedadjacentlytoin
3、filtratinglymphocytes.StainingofinfiltratinglymphocytesforTRAILightinducethyrocyteapoptosisbyincreasingtheexpressionofTRAIL,thusresultinginthyroidfollicledestruction. 【Keymune 【摘要】目的:觀察高碘環(huán)境下橋本甲狀腺炎大鼠(EAT)TRAIL的表達(dá)在發(fā)病機(jī)制及病理變化中的作用及意義.方法:采用雌性SD大鼠制作EAT模型,給予高碘飲食,采用免疫組織化學(xué)方法和圖像
4、分析,檢測高碘環(huán)境下EAT大鼠甲狀腺TRAIL的表達(dá)及分布.結(jié)果:大鼠甲狀腺濾泡細(xì)胞中TRAIL的免疫染色陽性率在正常對照組,EAT對照組和EAT高碘組依次增高(P<0.05).橋本甲狀腺炎大鼠中TRAIL免疫染色強(qiáng)陽性甲狀腺濾泡細(xì)胞多分布于浸潤淋巴濾泡附近,浸潤淋巴細(xì)胞中TRAIL免疫染色較弱.結(jié)論:EAT大鼠TRAIL在甲狀腺濾泡細(xì)胞中呈有特征性分布的高表達(dá),在高碘環(huán)境下,更加顯著,提示高碘可能通過引起TRAIL表達(dá)的增強(qiáng)誘導(dǎo)甲狀腺細(xì)胞過度凋亡,致甲狀腺濾泡破壞. 【關(guān)鍵詞】碘;TRAIL;甲狀腺炎,自身免疫性 0引言
5、 隨著全民碘化食鹽的逐步強(qiáng)化和普及,我國自身免疫性甲狀腺疾病的發(fā)病率出現(xiàn)了普遍增加的趨勢[1].分析國外的流行病學(xué)資料和有關(guān)的基礎(chǔ)研究以及我國現(xiàn)有的能利用的資料可以看出,增加碘攝入量誘發(fā)具有遺傳傾向人群的自身免疫性甲狀腺疾病由隱性轉(zhuǎn)為顯性[1],但其機(jī)制尚不明了.有報道,bcl2家族,F(xiàn)as與FasL和TRAIL參與了橋本甲狀腺炎(hashimotosthyroiditis,HT)中甲狀腺細(xì)胞凋亡的調(diào)控.目前高碘對Fas,FasL和bcl2表達(dá)的影響均有報道[2],但高碘對橋本甲狀腺炎中TRAIL表達(dá)途徑的影響少見報道.我們采用免疫組
6、織化學(xué)方法和圖像分析,檢測高碘環(huán)境下橋本甲狀腺炎大鼠(experimentalautoimmunethyroiditis,EAT)甲狀腺細(xì)胞TRAIL的表達(dá)及分布,觀察高碘對EAT的甲狀腺結(jié)構(gòu)和病理改變的影響,旨在了解TRAIL在HT發(fā)病機(jī)制中的作用. 1材料和方法 1.1材料甲狀腺球蛋白(pTG)購自Sigma公司;完全弗氏佐劑與不完全弗氏佐劑購自北京鼎國生物技術(shù)有限責(zé)任公司;兔抗鼠TRAIL多克隆抗體購自SantaCruz公司;免疫組化ABC試劑盒購自福州邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司;DAB購自武漢博士德公司;APES(3氨丙基三
7、乙氧硅烷)處理的切片購自西安寶信生物工程有限公司;雌性SD大鼠由第四軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供. 1.2方法雌性SD大鼠18只,5~6g/L的溶液)[3]喂養(yǎng),并甲狀腺球蛋白(pTG)生理鹽水溶至1g/L與完全弗氏佐劑按V/V=1∶1混合,于實(shí)驗(yàn)第15日以每只鼠100μg乳化的pTG皮內(nèi)多點(diǎn)注射行初次免疫,pTG與不完全弗氏佐劑按V/V=1∶1混合后于實(shí)驗(yàn)第29日加強(qiáng)免疫,以后每周加強(qiáng)免疫1次,共4次,至第4次加強(qiáng)免疫后1o. 將大鼠用乙醚麻醉,取血后,取新鮮甲狀腺組織,行冰凍切片,厚約5~6μm,貼于事先用APES(3氨丙基三乙氧
8、硅烷)處理的切片上,其中正常對照組切片19張,EAT對照組切片25張,EAT高碘組切片30張,37℃烤箱24h. ABC技術(shù)進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色.按免疫組化ABC試劑盒說明書所示步驟染色.兔抗鼠TRAIL多克隆抗體工作