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1、高碘對橋本甲狀腺炎大鼠TRAIL表達的影響論文張雅萍，帖麗麗，張南雁，姬秋和【關(guān)鍵詞】碘；TRAIL；甲狀腺炎,自身免疫性EffectofiodineexcessonTRAILexpressioninratsotosthyroiditis【Abstract】AIM:ToexplorethesignificanceoftheexpressionofTRAILinthepathogenesisandpathologicalchangesinthesituationofiodineexcessinratsentalautoimmunet
2、hyroiditis(EAT).METHODS:FemaleSDratsalmodelsandfedonhighiodinedietsinthisstudy.Immunohistochemicalmethodsalcontrolgroup,EATmodelgroupandEATiodineexcessgroup(P0.05).StronglypositiveimmunostainedthyroidfollicularcellsofEATratsforTRAILmainlydistributedadjacentlytoinfiltr
3、atinglymphocytes.StainingofinfiltratinglymphocytesforTRAILightinducethyrocyteapoptosisbyincreasingtheexpressionofTRAIL,thusresultinginthyroidfollicledestruction.【Keymune【摘要】目的：觀察高碘環(huán)境下橋本甲狀腺炎大鼠（EAT）TRAIL的表達在發(fā)病機制及病理變化中的作用及意義.方法：采用雌性SD大鼠制作EAT模型，給予高碘飲食，采用免疫組織化學方法和圖像分析，檢測高碘
4、環(huán)境下EAT大鼠甲狀腺TRAIL的表達及分布.結(jié)果：大鼠甲狀腺濾泡細胞中TRAIL的免疫染色陽性率在正常對照組，EAT對照組和EAT高碘組依次增高(P0.05).橋本甲狀腺炎大鼠中TRAIL免疫染色強陽性甲狀腺濾泡細胞多分布于浸潤淋巴濾泡附近,浸潤淋巴細胞中TRAIL免疫染色較弱.結(jié)論：EAT大鼠TRAIL在甲狀腺濾泡細胞中呈有特征性分布的高表達.freelotosthyroiditis,HT）中甲狀腺細胞凋亡的調(diào)控.目前高碘對Fas,FasL和bcl2表達的影響均有報道［2］，但高碘對橋本甲狀腺炎中TRAIL表達途徑的影響少見報
5、道.我們采用免疫組織化學方法和圖像分析,檢測高碘環(huán)境下橋本甲狀腺炎大鼠（experimentalautoimmunethyroiditis,.freela公司；完全弗氏佐劑與不完全弗氏佐劑購自北京鼎國生物技術(shù)有限責任公司；兔抗鼠TRAIL多克隆抗體購自SantaCruz公司；免疫組化ABC試劑盒購自福州邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司；DAB購自武漢博士德公司；APES（3氨丙基三乙氧硅烷）處理的切片購自西安寶信生物工程有限公司；雌性SD大鼠由第四軍醫(yī)大學實驗動物中心提供.1.2方法雌性SD大鼠18只，5～6g/L的溶液)［3］喂養(yǎng)，并甲
6、狀腺球蛋白（pTG）生理鹽水溶至1g/L與完全弗氏佐劑按V/V=1∶1混合，于實驗第15日以每只鼠100μg乳化的pTG皮內(nèi)多點注射行初次免疫，pTG與不完全弗氏佐劑按V/V=1∶1混合后于實驗第29日加強免疫，以后每周加強免疫1次，共4次，至第4次加強免疫后1o.將大鼠用乙醚麻醉，取血后，取新鮮甲狀腺組織，行冰凍切片，厚約5～6μm，貼于事先用APES（3氨丙基三乙氧硅烷）處理的切片上，其中正常對照組切片19張，EAT對照組切片25張，EAT高碘組切片30張，37℃烤箱24h.ABC技術(shù)進行免疫組織化學染色.按免疫組化ABC試劑
7、盒說明書所示步驟染色.兔抗鼠TRAIL多克隆抗體工作濃度為1∶400，免疫陽性產(chǎn)物為棕黃色，以正常兔血清及PBS替代一抗染色，作為陰性對照.密封片號情況下(單盲)，在光學顯微鏡下對切片染色陽性情況進行半定量評估.觀察全片，如無陽性細胞表達，用“”表示，如陽性細胞表達率＜10%，用“＋”表示，陽性細胞表達率在11%~50%之間，用“”表示，如陽性細胞表達率＞51%用“”表示［5］.求出每組中“＋”~“”標本所占總例數(shù)的百分比為該組標本陽性率，測定各組之間陽性率的差異.統(tǒng)計學處理：采用SPSS11.0統(tǒng)計軟件，對各組陽性率進行多個樣本
8、率比較的χ2分割法檢驗，P0.0125表示有統(tǒng)計學意義.2結(jié)果2.1甲狀腺組織形態(tài)的觀察顯微鏡下觀察,正常對照組甲狀腺組織的甲狀腺濾泡呈小葉狀排列,濾泡發(fā)育成熟,濾泡腔充滿膠質(zhì),分布均勻,未見炎細胞浸潤（圖1）.EAT組中大鼠甲狀腺與正常對照組比較
