金針菇多糖對小鼠急性肝損傷的保護(hù)作用論文

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1、金針菇多糖對小鼠急性肝損傷的保護(hù)作用論文李怡芳，曾懷葦，王敏，何蓉蓉，栗原博【摘要】目的探討金針菇多糖(polysaccharidesofFlammulinavelutipes,FVP)對CCl4誘導(dǎo)的急性肝損傷的保護(hù)作用。方法小鼠腹腔注射CCl4橄欖油溶液(0.5%,5mL·kg-1)12、24、48、72h后測定血清ALT，確定CCl4急性肝損傷造模最佳時間為24h。FVP(75,150,300mg·kg-1)連續(xù)口服給藥8d，第7天采用CCl4制備小鼠急性化學(xué)性肝損傷模型，24h后測定FVP對血清ALT、AST活性.freelmulinavelutipes(FVP)ag

2、ainstliverinjuryinducedbyCCl4.MethodsDAandtheactivitiesofSOD.ResultsOraladministrationicemulinavelutipeshadtheprotectiveeffectagainstCCl4inducedacuteliverinjuryinmice.Keymulinavelutipes(FVP),liverinjury,CCl4,ALT,AST,MDA,SOD金針菇(Flammulinavelutipes)屬擔(dān)子菌亞門、金錢菌屬，是一種食藥兼用菌，含有多糖、糖蛋白、蛋白聚糖、樸菇素等多種生物

3、活性物質(zhì)1，具有較高的藥用價值2,3。金針菇功能蛋白性蛋白諸如核糖體失活蛋白(robosomeinactitatingproteins,RIP)具有抗腫瘤、抗病毒、抗蟲、抗真菌以及抗人免疫缺陷病毒(HIV)等活性;真菌免疫調(diào)節(jié)蛋白(fungalimmunomodulatoryproteins,FIP)具有抗癌、抗過敏、抗增殖、刺激免疫細(xì)胞產(chǎn)生多種細(xì)胞因子和免疫調(diào)節(jié)功能;金針菇毒素(flammutoxin,FTX)具有引起哺乳動物紅細(xì)胞裂解，使腫瘤細(xì)胞溶脹破裂，改變腸上皮細(xì)胞的滲透性，促進(jìn)藥物吸收等作用4-8。近年來，金針菇中另一種重要的生物活性物質(zhì)即金針菇多糖(polysac

4、charidesofFlammulinavelutipes,FVP)也引起人們的關(guān)注。研究發(fā)現(xiàn)，金針菇多糖有抗腫瘤9-11、免疫調(diào)節(jié)12,13和一定的保肝作用14，15。CCl4是一種常見的環(huán)境污染源和肝臟毒性物質(zhì)，CCl4肝損傷是經(jīng)典的急性化學(xué)性肝損傷動物模型，也是目前肝病研究的重要模型之一。本實(shí)驗(yàn)通過建立CCl4小鼠急性肝損傷模型，進(jìn)一步探討金針菇多糖對肝損傷的保護(hù)作用。1材料與方法1.1藥物與試劑金針菇多糖(FVP)提取物由廣州農(nóng)業(yè)科學(xué)院提供;聯(lián)苯雙酯滴丸(BDP)，廣州星群藥業(yè)股份有限公司，生產(chǎn)批號：EF40131;谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、超氧化物

5、歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、考馬斯亮藍(lán)蛋白測定試劑盒均購自南京建成生物工程研究所，批號分別為：20070713，20070713，20080513，20080513。1.2動物昆明種小鼠,雄性,體質(zhì)量(20±2)g,由南方醫(yī)科大學(xué)動物中心提供，合格證號：SCXK(粵)20032002，飼養(yǎng)溫度(23±2)℃，飼養(yǎng)1周后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。1.3儀器318K型臺式高速離心機(jī)(Sartorius,Germany);MK3型酶標(biāo)儀(Labsystem,Helsinki,Finland);BS210S電子分析天平(Sartorius,Gttingen,Germany);DA含量的

6、測定小鼠肝組織的5%生理鹽水勻漿液在4℃條件下以10000r/min離心10min,取上清液稀釋成體積分?jǐn)?shù)為2%后以考馬斯亮藍(lán)蛋白試劑盒測定蛋白含量。采用TBARS比色法18,按照MDA試劑盒說明書中的步驟進(jìn)行操作以測定小鼠肝組織勻漿中MDA的含量。1.5統(tǒng)計學(xué)處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以(±s)表示，采用SPSS軟件，利用ANOVA檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理，P0.05有統(tǒng)計學(xué)意義。2結(jié)果2.1CCl4急性肝損傷的造模時間如表1所示，與正常對照組ALT(29.67±1.25)U·L-1相比，小鼠腹腔注射CCl4橄欖油溶液后，血漿ALT值隨造模時間的變化而變化(12h、24h、48h、72h)，其

7、中造模24h后ALT達(dá)最高值(117.87±11.86)U·L-1，而12h和48h(78.21±9.78,94.55±4.57)U·L-1相對正常組有升高,但比24h低，72h后ALT(40.01±9.12)U·L-1趨近正常小鼠血清ALT。2.2金針菇多糖對急性肝損傷小鼠血漿ALT和AST的影響如表2所示，與正常對照組相比，模型組小鼠血漿ALT和AST水平顯著升高(P0.01)，表明CCl4成功誘導(dǎo)了小鼠急性肝損傷。陽性藥組和FVP各劑量組較模型組相比均有顯著降低(P0.01)，且呈劑量依賴性關(guān)系。