金針菇多糖對小鼠急性肝損傷的保護作用論文

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1、金針菇多糖對小鼠急性肝損傷的保護作用論文李怡芳,曾懷葦,王敏,何蓉蓉,栗原博【摘要】目的探討金針菇多糖(polysaccharidesofFlammulinavelutipes,FVP)對CCl4誘導的急性肝損傷的保護作用。方法小鼠腹腔注射CCl4橄欖油溶液(0.5%,5mL·kg-1)12、24、48、72h后測定血清ALT,確定CCl4急性肝損傷造模最佳時間為24h。FVP(75,150,300mg·kg-1)連續(xù)口服給藥8d,第7天采用CCl4制備小鼠急性化學性肝損傷模型,24h后測定FVP對血清ALT、AST活性.freelmulinavelutipes(FVP)ag

2、ainstliverinjuryinducedbyCCl4.MethodsDAandtheactivitiesofSOD.ResultsOraladministrationicemulinavelutipeshadtheprotectiveeffectagainstCCl4inducedacuteliverinjuryinmice.Keymulinavelutipes(FVP),liverinjury,CCl4,ALT,AST,MDA,SOD金針菇(Flammulinavelutipes)屬擔子菌亞門、金錢菌屬,是一種食藥兼用菌,含有多糖、糖蛋白、蛋白聚糖、樸菇素等多種生物

3、活性物質1,具有較高的藥用價值2,3。金針菇功能蛋白性蛋白諸如核糖體失活蛋白(robosomeinactitatingproteins,RIP)具有抗腫瘤、抗病毒、抗蟲、抗真菌以及抗人免疫缺陷病毒(HIV)等活性;真菌免疫調節(jié)蛋白(fungalimmunomodulatoryproteins,FIP)具有抗癌、抗過敏、抗增殖、刺激免疫細胞產生多種細胞因子和免疫調節(jié)功能;金針菇毒素(flammutoxin,FTX)具有引起哺乳動物紅細胞裂解,使腫瘤細胞溶脹破裂,改變腸上皮細胞的滲透性,促進藥物吸收等作用4-8。近年來,金針菇中另一種重要的生物活性物質即金針菇多糖(polysac

4、charidesofFlammulinavelutipes,FVP)也引起人們的關注。研究發(fā)現(xiàn),金針菇多糖有抗腫瘤9-11、免疫調節(jié)12,13和一定的保肝作用14,15。CCl4是一種常見的環(huán)境污染源和肝臟毒性物質,CCl4肝損傷是經典的急性化學性肝損傷動物模型,也是目前肝病研究的重要模型之一。本實驗通過建立CCl4小鼠急性肝損傷模型,進一步探討金針菇多糖對肝損傷的保護作用。1材料與方法1.1藥物與試劑金針菇多糖(FVP)提取物由廣州農業(yè)科學院提供;聯(lián)苯雙酯滴丸(BDP),廣州星群藥業(yè)股份有限公司,生產批號:EF40131;谷丙轉氨酶(ALT)、谷草轉氨酶(AST)、超氧化物

5、歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、考馬斯亮藍蛋白測定試劑盒均購自南京建成生物工程研究所,批號分別為:20070713,20070713,20080513,20080513。1.2動物昆明種小鼠,雄性,體質量(20±2)g,由南方醫(yī)科大學動物中心提供,合格證號:SCXK(粵)20032002,飼養(yǎng)溫度(23±2)℃,飼養(yǎng)1周后進行實驗。1.3儀器318K型臺式高速離心機(Sartorius,Germany);MK3型酶標儀(Labsystem,Helsinki,Finland);BS210S電子分析天平(Sartorius,Gttingen,Germany);DA含量的

6、測定小鼠肝組織的5%生理鹽水勻漿液在4℃條件下以10000r/min離心10min,取上清液稀釋成體積分數為2%后以考馬斯亮藍蛋白試劑盒測定蛋白含量。采用TBARS比色法18,按照MDA試劑盒說明書中的步驟進行操作以測定小鼠肝組織勻漿中MDA的含量。1.5統(tǒng)計學處理實驗數據以(±s)表示,采用SPSS軟件,利用ANOVA檢驗進行統(tǒng)計學處理,P0.05有統(tǒng)計學意義。2結果2.1CCl4急性肝損傷的造模時間如表1所示,與正常對照組ALT(29.67±1.25)U·L-1相比,小鼠腹腔注射CCl4橄欖油溶液后,血漿ALT值隨造模時間的變化而變化(12h、24h、48h、72h),其

7、中造模24h后ALT達最高值(117.87±11.86)U·L-1,而12h和48h(78.21±9.78,94.55±4.57)U·L-1相對正常組有升高,但比24h低,72h后ALT(40.01±9.12)U·L-1趨近正常小鼠血清ALT。2.2金針菇多糖對急性肝損傷小鼠血漿ALT和AST的影響如表2所示,與正常對照組相比,模型組小鼠血漿ALT和AST水平顯著升高(P0.01),表明CCl4成功誘導了小鼠急性肝損傷。陽性藥組和FVP各劑量組較模型組相比均有顯著降低(P0.01),且呈劑量依賴性關系。

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