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1、實(shí)驗(yàn)性牙齒移動中TG內(nèi)P2X3受體的表達(dá)變化論文曹陽,賴文莉,陳揚(yáng)熙【關(guān)鍵詞】正畸牙移動;三叉神經(jīng)節(jié);,ATP;,,P2X3受體ChangeofP2X3receptorexpressioninrattrigeminalganglionduringexperimentaltoothmovement【Abstract】AIM:ToinvestigatethechangeofP2X3receptorexpressioninthetrigeminalganglionsensoryneuronsafterthenociceptivestimulationbyort
2、hodontictoothmovementforce.METHODS:MaleSpragueDaimicorthodontictoothmovement.Immunohistochemistryandimmunofluorescenceentaltoothmovement.RESULTS:TheproportionofP2X3receptorpositivesensoryneuronsincreasedaftergivingforcetotheteethofrats,tothepeak3dlaterandreturnedtocontrolvaluesat
3、14d.CONCLUSION:TheP2X3receptorexpressionistransientlyupregulatedandanterogradelytransportedintrigeminalprimarysensoryneuronsintheprocessoforthodontictoothmovement.P2X3receptormayplayaroleinthepathomechanismofnociceptiveresponsesinprimarysensoryneuronsduringorthodonticclinictreatm
4、ent.【Keyovement;trigeminalganglion;ATP;P2X3receptor【摘要】目的:研究正畸牙移動中加力后P2X3受體在三叉神經(jīng)節(jié)的表達(dá)變化規(guī)律，以探討P2X3受體在正畸牙移動疼痛機(jī)制中的作用.方法:以雄性SD大鼠為實(shí)驗(yàn)對象，模擬臨床矯治的牙移動過程，應(yīng)用免疫組織化學(xué)手段進(jìn)行研究.結(jié)果:大鼠牙齒加力后,觀察到三叉神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元P2X3受體免疫反應(yīng)陽性率增高，并呈現(xiàn)一定的時間規(guī)律：實(shí)驗(yàn)后1d開始出現(xiàn)變化，實(shí)驗(yàn)后3d達(dá)高峰，14d后下降至與對照組基本一致.結(jié)論:大鼠牙移動過程中，三叉神經(jīng)節(jié)內(nèi)（TG）的P2X3受體表達(dá)變化是一過性
5、變化,呈現(xiàn)短時上調(diào)的規(guī)律.freelinalganglion,TG)及節(jié)狀神經(jīng)節(jié)［3,5-6］,.freelg/100g）肌注麻醉.將大鼠一側(cè)上頜第一磨牙和前牙間用結(jié)扎絲拴正畸用NiTi螺旋彈簧（0.008＂×0.032＂)為防止彈簧脫落，在前牙唇面及軸角處磨出深約0.5~1.0mm槽溝，便于結(jié)扎絲結(jié)扎.測力計(jì)測力，建立輕力（50g）及重力（100g）正畸力作用下的牙移動模型.分別于加力后4h,1,2,3,5,7和14d定期處死.處死后迅速取實(shí)驗(yàn)組和對照組同側(cè)三叉神經(jīng)節(jié)、液氮速凍保存，冰凍連續(xù)切片,片厚10μm.吹干后零下20℃冰箱保存.1.2方法1.2
6、.1免疫組織化學(xué)染色大鼠的三叉神經(jīng)節(jié)冰凍切片，常規(guī)LsAB法.第一抗體（SantaCruz生物技術(shù)公司，美國）為親和純化的P2X3羊多克隆抗體(1∶100)；免疫熒光第二抗體(vector公司)為FITC標(biāo)記兔抗山羊IgG(1∶100)，加二抗前程序同常規(guī)LsAB法.陰性對照試驗(yàn)：①空白對照用0.01mol/LPBS(pH7.4)取代一抗;②血清對照用正常羊血清取代一抗.1.2.2圖像分析各時間點(diǎn)的每只大鼠三叉神經(jīng)節(jié)隨機(jī)選取不相鄰切片各三張,在明視野下計(jì)數(shù)免疫反應(yīng)陽性神經(jīng)元的總數(shù)量,計(jì)算其占節(jié)內(nèi)神經(jīng)元細(xì)胞總數(shù)的比例，得到每只大鼠的陽性神經(jīng)元百分率，按每組
7、4只大鼠，計(jì)算出平均百分率，并求得標(biāo)準(zhǔn)差.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：資料用SPSS10.0軟件進(jìn)行實(shí)驗(yàn)組與對照組之間單因素方差統(tǒng)計(jì)分析.2結(jié)果2.1免疫組化染色鏡下觀察表明P2X3受體抗體標(biāo)記的棕黃色陽性胞體均勻分布于下頜支,上頜支及眼支,的感覺神經(jīng)元上,主要為中小型神經(jīng)元,直徑從10～45μm，部分大型神經(jīng)元也有部分著色.DAB染色標(biāo)記在細(xì)胞膜及細(xì)胞漿里的．陽性胞體染色深淺不一，部分細(xì)胞核部位著色淺或不著色，周圍胞漿點(diǎn)狀著色，似菊花樣.部分細(xì)胞胞漿內(nèi)染色致密均勻，只在中心部位略淡．胞體染色深淺與胞體大小無關(guān)(圖1A，B).2.2P2X3受體變化情況大鼠牙移動后,實(shí)驗(yàn)
8、組P2X3免疫反應(yīng)陽性在TG神經(jīng)元中的表達(dá)明顯上調(diào)并呈現(xiàn)出時程變化.與對照組相比
