從茶葉或茶葉下腳料中提取茶多酚

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1、實驗4從茶葉或茶葉下腳料中提取茶多酚一、實驗?zāi)康模?）掌握從茶葉或茶葉下腳料中提取茶多酚的方法。（2）掌握用分光光度法測定茶多酚總量的方法。二、實驗原理目前，茶葉消費(fèi)日趨高檔化，而中、低檔茶受國際市場影響常滯銷、積壓嚴(yán)重，這種現(xiàn)象制約的茶葉產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。與此同時，在茶葉生產(chǎn)及加工過程中還有大量修剪枝葉及加工副產(chǎn)品，這些產(chǎn)品多作為廢物而為加以充分利用。因此，尋求經(jīng)濟(jì)新增長點及開辟茶葉新用途成了各國各地區(qū)茶學(xué)界的重要議題。茶葉綜合利用已成為茶葉發(fā)展中的新亮點。茶的綜合利用是以茶（含茶樹的根、莖、花、果、種子

2、等）為原料，對茶的內(nèi)含物進(jìn)行綜合開發(fā)，達(dá)到物盡其用，以增加收益。眾所周知，茶葉有諸多保健作用，這與茶葉中富含茶多酚、咖啡因、茶多糖和茶氨酸等有效成分有密切關(guān)系。茶多酚不僅是一種天然的食品抗氧化劑，而且還是多種保健品及藥品的生產(chǎn)原料；咖啡因是多種飲料的添加劑，在醫(yī)藥上也有廣泛的應(yīng)用；茶多糖有降血糖、血脂和增強(qiáng)機(jī)體免疫力等功效；美國科學(xué)家發(fā)現(xiàn)茶氨酸能使人體抵御SARS病毒感染的能力增強(qiáng)5倍，是極有潛力的新型抗病毒、細(xì)菌和真菌的新型藥品和保健品的成分。由此可見，對這些有效成分進(jìn)行制備并加以利用，不僅是解決中

3、、低檔茶及茶副產(chǎn)品出路的有效途徑之一，而且可產(chǎn)生重大的經(jīng)濟(jì)效益和社會效益。從清潔生產(chǎn)的思想出發(fā)，對有效成分進(jìn)行有效提取，提出清潔生產(chǎn)工藝，考慮到實驗整體安排這里主要以提取茶多酚為主開展討論。乙酸乙酯HCl氯化鋅熱水茶葉→粉碎→浸提→過濾→濾液→沉淀→離心→沉淀→轉(zhuǎn)溶→萃取→減蒸濃縮→干燥→茶多酚茶渣上清液濃縮→萃?。确拢唷廖觯ㄒ掖迹瓒嗵菫V液有機(jī)相沉淀劑濃縮脫鹽結(jié)晶升華咖啡因茶氨酸茶葉中富含多烴基的酚性物質(zhì)——茶多酚。茶多酚的主要組分是兒茶素，占茶多酚含量的80%左右。茶多酚中幾種主要兒茶

4、素所占的比例分別為：L-表沒食子兒茶素沒食子酸酯（L-EGCG）50%~60%，L-表兒茶素沒食子酸酯（L-ECG）15%~20%，L-表沒食子兒茶素（L-EGC）10%~15%,L-表兒茶素（L-EC）4%~6%。它們的結(jié)構(gòu)式如下：L-EC:R1=R2=HL-ECG:R1=H,R2=RL-EGC:R1=OH,R2=HL-EGCG:R1=OH,R2=R茶多酚不僅是構(gòu)成茶葉色、香、味的主體化學(xué)物質(zhì)，而且是一種理想的天然食品抗氧化劑，已被列為食品添加劑。此外，它還具有清除自由基、抗衰老、抗輻射、減肥、降血

5、脂、防癌等多方面的功能。茶多酚在食品加工、醫(yī)藥保健、日用化工等領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。近十年來，國內(nèi)外特別是我國和日本對探索新的茶多酚提取分離工藝日益關(guān)注。本實驗是研究從茶葉中提取天然抗氧化劑——茶多酚的制備方法，工藝包括沸水提取、沉淀、酸化轉(zhuǎn)溶、萃取及真空干燥，其特征在于提取液中加入能使茶多酚沉淀的可溶性無機(jī)鹽，分離沉淀后，在沉淀中加入強(qiáng)酸或中強(qiáng)酸劑至沉淀完全溶解，制得酸化液，再用乙酸乙酯萃取，濃縮干燥制得茶多酚，并對茶多酚進(jìn)行定量分析。過量酒石酸鐵在茶多酚溶液中與茶多酚反應(yīng)生成穩(wěn)定的紫褐色配合物，

6、溶液顏色的深淺與溶液中茶多酚的含量成正比。因此，可通過比色法定量測定茶多酚的含量。一、實驗試劑與儀器（1）試劑：氯化鋅、碳酸鈉、鹽酸、乙酸乙酯、硫酸亞鐵（FeSO4·7H2O）、酒石酸鉀鈉（C4H4O6NaK·4H2O）、十二水磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀、蒸餾水。（2）儀器：粉碎機(jī)、離心機(jī)、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器、干燥箱、分光光度計、真空泵、pH計、布氏漏斗。二、實驗步驟（一）試劑的制備(1)酒石酸鐵溶液：稱取1g硫酸亞鐵（FeSO4·7H2O）和5g酒石酸鉀鈉（C4H4O6NaK·4H2O），混合后加蒸餾水溶解，定

7、容到1000ml。此溶液可穩(wěn)定使用10d。(1)pH值為7.5的磷酸鹽緩沖溶液：①配制1/15mol/l十二水磷酸氫二鈉溶液，即稱取23.9g十二水磷酸氫二鈉（Na2HPO4·12H2O），加水溶解后定容至1L；②配制1/15mol/l磷酸二氫鉀溶液，即稱取經(jīng)110℃烘干2h的9.08g磷酸二氫鉀（KH2PO4），加水溶解后定容至1L；③取上述磷酸氫二鈉溶液85ml和磷酸二氫鉀溶液15ml混合均勻備用。（一）茶葉準(zhǔn)備用粉碎機(jī)粉碎茶葉若干。（二）沸水浸提稱取5g粉碎后的茶葉若干克，加入100ml沸水（9

8、0℃）提取30min，用濾布過濾，再用100ml沸水浸提一次，合并兩次的上層清夜。（四）離子沉淀向合并后的提取液中加入1～2g的氯化鋅，用0.1mol/LNa2CO3溶液把提取液的pH值調(diào)至7.0，使茶多酚沉淀完全，離心分離。（五）酸化轉(zhuǎn)溶在沉淀中加入40ml2mol/LHCl溶液，離心分離少量未溶解的沉淀。（六）萃取轉(zhuǎn)溶后的茶多酚溶液用同體積的乙酸乙酯萃?。?0℃，15min）兩次，合并萃取液。（七）減壓濃縮干燥合并萃取液，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器減壓濃縮，將濃縮