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1、茶葉中茶多酚的提取和測定一,主要儀器、藥品及材料儀器:722-E可見分光光度計(jì),干燥箱,電子天平,pH計(jì),容量瓶,真空泵,布氏漏斗?;瘜W(xué)試劑:無水硫酸鈉,硫酸亞鐵(FeSO4·7H2O),酒石酸鉀(KNaC4H4O6·4H2O),磷酸氫二鈉(Na2HPO4·12H2O),磷酸二氫鉀(KH2PO4),乙酸乙酯。材料:茶葉二,茶多酚的提取工藝。采集茶葉→去灰塵,洗干凈→晾干→干茶葉→粉碎→90℃接近沸水中攪拌浸提→過濾→乙酸乙酯萃取→得有機(jī)相→無水硫酸鈉干燥→減壓蒸餾→得黃色粉末狀茶多酚→稱量。1預(yù)處理。粉碎干茶葉:將采集來的茶葉洗凈、晾干,烘干,最后粉碎。粉碎的目的是與液體的接
2、觸面增大,使提取率增高。由于試驗(yàn)條件的限制,用剪刀代替粉碎機(jī),將干茶葉剪碎,并且用研缽研細(xì)。干茶葉量為50.00g。2提取。在眾多的提取方法中,選用了溶劑提取法,具體過程是稱取經(jīng)過預(yù)處理的干茶葉末30.00g,加250mL90℃接近沸水中攪拌浸提,過濾,先后用250mL的乙酸乙酯萃取兩次。合并兩次有機(jī)相,再用無水硫酸鈉干燥,減壓蒸餾除去乙酸乙酯溶劑得黃色粉末狀茶多酚。稱量為0.2945g,提取率為0.98%。三,測定1定性測定。從外觀上看,為黃色粉末狀。物理性能為,易溶于水及乙醇,味苦澀。2定量測定方法。光度法———酒石酸亞鐵比色法。其測定原理是茶多酚類物質(zhì)能與亞鐵離子形成紫
3、藍(lán)色絡(luò)合物。用分光光度法測定其含量。3茶多酚標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制。稱取純品0.2500g,加水溶解定容至250mL,混勻,即為每毫升含1mg純品的標(biāo)準(zhǔn)溶液(mg/mL)。4茶多酚的含量。茶多酚標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制。分別吸取茶多酚標(biāo)準(zhǔn)溶1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL于4個50mL容量瓶中,各加水至10mL,再加酒石酸亞鐵10mL,加入pH為7.5的磷酸緩沖液至刻度,混勻后用1㎝比色皿,以空白試劑作參比,于540nm處測定吸光度(A),繪制出標(biāo)準(zhǔn)曲線表1 茶多酚標(biāo)準(zhǔn)曲線茶多酚標(biāo)準(zhǔn)溶液體積(mL)1.02.03.04.0A0.1150.2230.3620.475茶葉中茶多酚含量
4、(mg/g)37.5172.74118.07154.93y=321.16x+0.003 R2=1