丁酸梭菌抑菌實驗

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1、丁酸梭菌抑菌實驗丁酸梭菌，又名酪酸梭菌，丁酸梭狀芽孢桿菌，是一種專性厭氧的革蘭氏陽性芽孢桿菌。丁酸梭菌代謝產(chǎn)物的突出特點就是丁酸、B族維生素以及葉酸含量高。大量研究表明，丁酸梭菌具有極強的整腸作用，它能夠通過抑制致病菌的生長繁殖從而調(diào)節(jié)腸道的微生態(tài)平衡，預(yù)防和治療腹瀉、腸炎等疾病?！　?實驗材料　　共培養(yǎng)用液體培養(yǎng)基;LB培養(yǎng)基　　2實驗方法　　2.1丁酸梭菌對霍亂沙門氏菌的抑制作用　?、倩魜y沙門氏菌種子培養(yǎng)：取平板活化好的菌種轉(zhuǎn)接到LB液體三角瓶中，裝液量25mL/100mL，37℃，150r/min培養(yǎng)12

2、-24h，取培養(yǎng)菌液測活菌數(shù)和pH值。　?、诙∷崴缶鷨为毰囵B(yǎng)：取丁酸梭菌菌粉0.1g接種到裝量為25mL/30mL的細菌培養(yǎng)瓶中，置于37℃靜止恒溫培養(yǎng)24h左右。(可按此比例擴大培養(yǎng)體積，最低比例為0.1g：25mL)theprovisionsofelectricpowerconstructionengineeringqualitysupervisionandquality...2.4.1.1theunitworksacceptancerateof100%,thequalityevaluationofatot

3、alscoreof95orabove;2.4.1.2regulatedWeldingNDTinspection100%,regulatedweldingapassingrateof>99%,andweldbeadappearance;2.4.1.3boilerhydraulic　?、鄱∷崴缶突魜y沙門氏菌混合培養(yǎng)：活化好的丁酸梭菌培養(yǎng)液5mL接種到裝液量為20mL/30mL的細菌培養(yǎng)瓶中，再把培養(yǎng)好的霍亂沙門氏菌菌液1mL同時接入該共培養(yǎng)液中，37℃恒溫靜止培養(yǎng)。對照組為向同樣的共培養(yǎng)液體培養(yǎng)基中(裝液量為20

4、mL/30mL)接種霍亂沙門氏菌菌液1mL，37℃恒溫靜止培養(yǎng)。分別在16和24h測pH值及沙門氏菌活菌數(shù)?！　、苡嫈?shù)采用平板涂布法。選擇2～3個適宜梯度稀釋液，吸取100μL涂布平板，倒置于嚴格厭氧培養(yǎng)箱或嚴格厭氧培養(yǎng)袋中，37℃培養(yǎng)18～36h后計數(shù)。每個梯度做兩個平行，每個平板的菌落數(shù)在30～300范圍內(nèi)有效?！　?.2丁酸梭菌對腸出血性大腸桿菌、魏氏梭菌的抑制作用實驗方法同上，魏氏梭菌種子液為嚴格厭氧，應(yīng)采用共培養(yǎng)液體培養(yǎng)基?！　?實驗結(jié)果　　3.1對霍亂沙門氏菌的抑制結(jié)果　　丁酸梭菌對霍亂沙門氏菌表現(xiàn)

5、出非常強的抑制作用，24h活菌數(shù)從單獨培養(yǎng)時2.0×108CFU·mL-1減少到1.2×103CFU·mL-1?！　?.2對腸出血性大腸桿菌的抑制結(jié)果theprovisionsofelectricpowerconstructionengineeringqualitysupervisionandquality...2.4.1.1theunitworksacceptancerateof100%,thequalityevaluationofatotalscoreof95orabove;2.4.1.2regulated

6、WeldingNDTinspection100%,regulatedweldingapassingrateof>99%,andweldbeadappearance;2.4.1.3boilerhydraulic　　混合培養(yǎng)16h，腸出血性大腸桿菌活菌數(shù)從單獨培養(yǎng)時3.5×108CFU·mL-1減少到7×106CFU·mL-1，24h活菌數(shù)減少到0.4×106CFU·mL-1，pH從6.8下降至4.6，呈現(xiàn)良好抑制作用?！　?.3對魏氏梭菌的抑制作用　　混合培養(yǎng)后，魏氏梭菌活菌數(shù)從單獨培養(yǎng)時的1×108CFU·mL

7、-1減少到1×105CFU·mL-1，pH值從6.8下降到4.5，表現(xiàn)出良好的抑制作用。　　4小結(jié)　　(1)丁酸梭菌為嚴格厭氧菌，產(chǎn)氫氣。液體培養(yǎng)基中加入?yún)捬踔甘緞奂t色表明培養(yǎng)基上層有氧;　　培養(yǎng)一段時候后液體表面有氣泡，為正?，F(xiàn)象?！　?2)丁酸梭菌平板形態(tài)如下?！　?3)丁酸梭菌對霍亂沙門氏菌、腸出血性大腸桿菌和魏氏梭菌均有顯著的抑制作用，可將腸出血性大腸桿菌和魏氏梭菌細菌含量控制在發(fā)病濃度之下，防止發(fā)病。尤其是對霍亂沙門氏菌抑制作用更強，可以達到凈化霍亂沙門氏菌的作用?！　《∷崴缶隗w內(nèi)的定植產(chǎn)生大量

8、的丁酸、乙酸、乳酸等短鏈脂肪酸，以及B族維生素、葉酸和一些消化酶類，促進腸道內(nèi)有益菌群如雙歧桿菌等乳酸菌的增殖，抑制魏氏梭菌、腸出血性大腸桿菌、沙門氏菌等致病菌的繁殖，減少氨、胺、吲哚等腸道毒素的產(chǎn)生及對腸粘膜的毒害，使腸道內(nèi)水分潴留明顯減少，進而避免了其所導致各種腸道疾病的發(fā)生(壞死性腸炎、結(jié)腸炎、回腸炎等)，恢復(fù)腸免疫功能和正常的生理功能，達到無病防病、有病治病的作用。thepro