鮑曼不動(dòng)桿菌耐藥性及耐藥基因的研究

鮑曼不動(dòng)桿菌耐藥性及耐藥基因的研究

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1、鮑曼不動(dòng)桿菌耐藥性及耐藥基因的研究【摘要】目的研究鮑曼不動(dòng)桿菌耐藥性與耐藥基因之間的關(guān)系。方法用VITEK-2型全自動(dòng)微生物分析儀,檢測(cè)331株鮑曼不動(dòng)桿菌和42株多重耐藥菌的藥敏情況,用PCR方法檢測(cè)多重耐藥菌的耐藥基因。結(jié)果鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)21種抗生素的平均耐藥率分別為%和%;對(duì)頭孢曲松、頭孢唑啉和頭孢替坦的耐藥率均為100%;2株多重耐藥菌株對(duì)頭孢曲松、頭孢呋辛鈉、頭孢呋辛酯、頭孢唑啉、頭孢替坦和氨芐西林完全耐藥,且均檢測(cè)有TEM-1和ampC基因;38株多重耐藥菌均檢測(cè)到TEM-1、ampC、aac和gyrA型基因。結(jié)論鮑曼不動(dòng)桿菌

2、已成為醫(yī)院重要致病菌,且多重耐藥率很高,與攜帶的TEM-1、ampC、aac和gyrA型基因有關(guān)?!娟P(guān)鍵詞】鮑曼不動(dòng)桿菌;多重耐藥基因;耐藥基因檢測(cè)StudyonantibioticsresistanceandresistantgenesofAcinetobacterbaumanniiXUJing-feng,XU-Lin,FANHospitalofBEIjingMilitaryCommand,Beijing100700,China【Abstract】ObjectiveObjectiveTostudytherelationshipbetwe

3、enantibioticresistanceandresistantgeneofAcinetobacterTheantibioticresistanceandresistantgenewasdeterminedbypolymerasechainreactionandwithin31strainsandstrainsmultiresistanceofAcinetobacterTheresistanceratesofAcinetobacterbaumanniitoceftriaxone、cefotetan、cefazolinwere100%a

4、ndtoImipenem、meropenem%,%respectively.4strainswereidentifiedasmultiresistantisolateswithpresenceofTEM-1andampCgene;3strainswereidentifiedasmultiresistantisolatesofTEM-1、ampC、aacandgyrAThemultiresistanceofAcinetobacterbaumanniihascloserelationtoconcomitantpresenceofTEM-1、a

5、mpC、aacandgyrAgene.【Keywords】Acinetobacterbaumannii;drugmultiresistant;drugresistantgenedetection鮑曼不動(dòng)桿菌已成為醫(yī)院獲得性肺炎的重要致病菌,且很容易在監(jiān)護(hù)病房流行。由于鮑曼不動(dòng)桿菌在自然界的廣泛存在及其復(fù)雜的耐藥機(jī)制,對(duì)β內(nèi)酰胺類(lèi)、氨基糖苷類(lèi)以及喹諾酮類(lèi)抗生素已呈現(xiàn)多重耐藥,給臨床治療其所致感染帶來(lái)很大困難。為能更好地指導(dǎo)臨床選擇合適的抗生素,本文對(duì)本院XX~XX年住院患者標(biāo)本分離的331株鮑曼不動(dòng)桿菌進(jìn)行藥敏分析,并對(duì)XX年分離的42株多

6、重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌的基因進(jìn)行測(cè)序和研究,現(xiàn)報(bào)告如下。1材料與方法菌株來(lái)源31株鮑曼不動(dòng)桿菌均為我院臨床標(biāo)本中分離并按全國(guó)統(tǒng)一操作規(guī)程[1]。標(biāo)本主要包括血液、尿液、痰和其他分泌物。儀器試劑VITEK-2型全自動(dòng)微生物分析儀、ID-GN鑒定卡、AST-GN09藥敏卡由法國(guó)Bio-Merieux公司生產(chǎn);VITEK比濁計(jì)由日本生產(chǎn);PCR擴(kuò)增儀為美國(guó)PERKINELMER公司9600型基因擴(kuò)增儀;日本三洋MDF型超低溫冰箱;德國(guó)Hettich公司22R型低溫超速離心機(jī);美國(guó)水套式恒溫培養(yǎng)箱。菌種鑒定、藥敏所有實(shí)驗(yàn)菌株分離純化后按VITEK-2

7、的使用要求配制成菌懸液和稀釋液,分別填充到ID-GN和AST-GN09卡中,用VITEK-2儀器自動(dòng)完成細(xì)菌的鑒定和藥敏實(shí)驗(yàn)。質(zhì)控菌株由衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心提供的標(biāo)準(zhǔn)菌株大腸埃希菌、銅綠假單胞菌,藥敏質(zhì)控結(jié)果符合NCCLS藥敏質(zhì)控要求。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理[2]細(xì)菌耐藥性分析用WHONET5軟件進(jìn)行分析,耐藥率顯著性差異用統(tǒng)計(jì)軟件分析,兩組耐藥率比較應(yīng)用χ2檢驗(yàn)。耐藥基因的檢測(cè)采用堿裂解法和蛋白酶K法提取被測(cè)細(xì)菌的質(zhì)粒和染色體基因,提取方法根據(jù)不同引物設(shè)立不同PCR條件;以ATCC700603肺炎克雷伯菌和TEM-26型大腸埃希菌分別作SHV型和TE

8、M型陽(yáng)性對(duì)照;其余ampC、PER-1、OXA-23基因陽(yáng)性對(duì)照均為北京華明公司基因檢測(cè)室經(jīng)基因測(cè)序后比對(duì)的陽(yáng)性菌株。PCR耐藥菌基因[3]根據(jù)GenBank提供的耐藥基因,采用Primer軟

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