鮑曼不動桿菌耐藥性及耐藥基因的研究

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1、鮑曼不動桿菌耐藥性及耐藥基因的研究【摘要】目的研究鮑曼不動桿菌耐藥性與耐藥基因之間的關(guān)系。方法用VITEK-2型全自動微生物分析儀,檢測331株鮑曼不動桿菌和42株多重耐藥菌的藥敏情況,用PCR方法檢測多重耐藥菌的耐藥基因。結(jié)果鮑曼不動桿菌對21種抗生素的平均耐藥率分別為%和%；對頭孢曲松、頭孢唑啉和頭孢替坦的耐藥率均為100%；2株多重耐藥菌株對頭孢曲松、頭孢呋辛鈉、頭孢呋辛酯、頭孢唑啉、頭孢替坦和氨芐西林完全耐藥,且均檢測有TEM-1和ampC基因;38株多重耐藥菌均檢測到TEM-1、ampC、aac和gyrA型基因。結(jié)論鮑曼不動桿菌

2、已成為醫(yī)院重要致病菌,且多重耐藥率很高，與攜帶的TEM-1、ampC、aac和gyrA型基因有關(guān)?！娟P(guān)鍵詞】鮑曼不動桿菌;多重耐藥基因;耐藥基因檢測StudyonantibioticsresistanceandresistantgenesofAcinetobacterbaumanniiXUJing-feng，XU-Lin,FANHospitalofBEIjingMilitaryCommand,Beijing100700，China【Abstract】ObjectiveObjectiveTostudytherelationshipbetwe

3、enantibioticresistanceandresistantgeneofAcinetobacterTheantibioticresistanceandresistantgenewasdeterminedbypolymerasechainreactionandwithin31strainsandstrainsmultiresistanceofAcinetobacterTheresistanceratesofAcinetobacterbaumanniitoceftriaxone、cefotetan、cefazolinwere100%a

4、ndtoImipenem、meropenem%,%respectively.4strainswereidentifiedasmultiresistantisolateswithpresenceofTEM-1andampCgene;3strainswereidentifiedasmultiresistantisolatesofTEM-1、ampC、aacandgyrAThemultiresistanceofAcinetobacterbaumanniihascloserelationtoconcomitantpresenceofTEM-1、a

5、mpC、aacandgyrAgene.【Keywords】Acinetobacterbaumannii;drugmultiresistant;drugresistantgenedetection鮑曼不動桿菌已成為醫(yī)院獲得性肺炎的重要致病菌,且很容易在監(jiān)護病房流行。由于鮑曼不動桿菌在自然界的廣泛存在及其復(fù)雜的耐藥機制,對β內(nèi)酰胺類、氨基糖苷類以及喹諾酮類抗生素已呈現(xiàn)多重耐藥，給臨床治療其所致感染帶來很大困難。為能更好地指導(dǎo)臨床選擇合適的抗生素，本文對本院XX～XX年住院患者標本分離的331株鮑曼不動桿菌進行藥敏分析,并對XX年分離的42株多

6、重耐藥鮑曼不動桿菌的基因進行測序和研究,現(xiàn)報告如下。1材料與方法菌株來源31株鮑曼不動桿菌均為我院臨床標本中分離并按全國統(tǒng)一操作規(guī)程［1］。標本主要包括血液、尿液、痰和其他分泌物。儀器試劑VITEK-2型全自動微生物分析儀、ID-GN鑒定卡、AST-GN09藥敏卡由法國Bio-Merieux公司生產(chǎn);VITEK比濁計由日本生產(chǎn)；PCR擴增儀為美國PERKINELMER公司9600型基因擴增儀；日本三洋MDF型超低溫冰箱;德國Hettich公司22R型低溫超速離心機;美國水套式恒溫培養(yǎng)箱。菌種鑒定、藥敏所有實驗菌株分離純化后按VITEK-2

7、的使用要求配制成菌懸液和稀釋液,分別填充到ID-GN和AST-GN09卡中,用VITEK-2儀器自動完成細菌的鑒定和藥敏實驗。質(zhì)控菌株由衛(wèi)生部臨床檢驗中心提供的標準菌株大腸埃希菌、銅綠假單胞菌,藥敏質(zhì)控結(jié)果符合NCCLS藥敏質(zhì)控要求。統(tǒng)計學(xué)處理［2］細菌耐藥性分析用WHONET5軟件進行分析，耐藥率顯著性差異用統(tǒng)計軟件分析,兩組耐藥率比較應(yīng)用χ2檢驗。耐藥基因的檢測采用堿裂解法和蛋白酶K法提取被測細菌的質(zhì)粒和染色體基因,提取方法根據(jù)不同引物設(shè)立不同PCR條件；以ATCC700603肺炎克雷伯菌和TEM-26型大腸埃希菌分別作SHV型和TE

8、M型陽性對照；其余ampC、PER-1、OXA-23基因陽性對照均為北京華明公司基因檢測室經(jīng)基因測序后比對的陽性菌株。PCR耐藥菌基因［3］根據(jù)GenBank提供的耐藥基因，采用Primer軟