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《水通道蛋白在膀胱尿路上皮癌中的表達(dá)及意義》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、新疆醫(yī)科大學(xué)醫(yī)學(xué)碩士學(xué)位論文進(jìn)行電泳約90min，轉(zhuǎn)印到PVDF膜上（300mA，90min），5%脫脂奶粉BSA-TBST4度封閉過夜，加入鼠抗人多克隆anti-AQP1抗體（1∶500稀釋），室溫孵育120min，然后加入HRP標(biāo)記的山羊抗鼠IgG（1∶1000稀釋），室溫孵育120min，TBST洗滌3次，每次10min，3，3′-二氨基聯(lián)苯胺（DAB）顯色。染色條帶被掃描后應(yīng)用圖像分析系統(tǒng)測定灰度值，計(jì)算每組患者的灰度值，比較兩組的差別。3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理將所有資料采用excel軟件建立數(shù)據(jù)庫。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)輸入SPSS17.0軟件數(shù)據(jù)庫中，由于本實(shí)驗(yàn)結(jié)果服從正態(tài)分布，因此我們首先經(jīng)方
2、差齊性檢驗(yàn)，如方差齊則采用兩獨(dú)立樣本均數(shù)比較的t檢驗(yàn)，如方差不齊可選用秩和檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)a=0.05，P＜0.05代表有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。6新疆醫(yī)科大學(xué)醫(yī)學(xué)碩士學(xué)位論文結(jié)果1免疫組織化學(xué)法所有切片染色背景清晰，陰性對照不著色。AQP1陽性反應(yīng)呈棕黃色，主要表達(dá)于膀胱黏膜微血管和小動脈的內(nèi)皮細(xì)胞及腫瘤細(xì)胞。對照組：AQP1主要表達(dá)在正常膀胱黏膜微血管和小動脈的內(nèi)皮細(xì)胞的胞漿和胞膜（圖1）。膀胱尿路上皮癌組：AQP1主要表達(dá)于腫瘤微血管內(nèi)皮細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞胞漿內(nèi)和胞膜上（圖2）。圖1AQP1在正常膀胱組織中的表達(dá)圖2AQP1在膀胱尿路上皮癌組織中的表達(dá)（400×）（400×）AQP2陽性反應(yīng)呈
3、棕黃色，主要存在正常膀胱組織（圖3）及膀胱尿路上皮癌組織（圖4）的細(xì)胞間質(zhì)中。圖3AQP2在正常膀胱組織中的表達(dá)圖4AQP2在膀胱尿路上皮癌組織中的表達(dá)（400×）（400×）7新疆醫(yī)科大學(xué)醫(yī)學(xué)碩士學(xué)位論文AQP3陽性反應(yīng)呈棕黃色，均表達(dá)于膀胱尿路上皮癌及正常膀胱組織粘膜上皮細(xì)胞的胞質(zhì)及胞膜。兩者表達(dá)位置未見明顯差別。對照組：AQP3主要表達(dá)在正常組織粘膜上皮細(xì)胞的胞質(zhì)及胞膜，陰性對照未見著色（圖5）。膀胱尿路上皮癌組：AQP3主要定位于膀胱尿路上皮癌組織粘膜上皮細(xì)胞的胞質(zhì)及胞膜（圖6）。對原始數(shù)據(jù)輸入SPSS17.0軟件數(shù)據(jù)庫中行方差齊性檢查，確定方差齊后用兩獨(dú)立樣本均數(shù)比較t檢
4、驗(yàn)分析：AQP1在膀胱尿路上皮癌組織中表達(dá)量較正常膀胱組織明顯增多，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。AQP2膀胱尿路上皮癌組織及正常膀胱組織中表達(dá)強(qiáng)度基本相同，二者之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。AQP3在膀胱尿路上皮癌組織中表達(dá)量較正常膀胱組織明顯增多，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）（表2）。圖5AQP3在正常膀胱組織中的表達(dá)圖6AQP3在膀胱尿路上皮癌組織中的表達(dá)（400×）（400×）表2免疫組織化學(xué)法兩組患者AQP1-3表達(dá)量的差別（n=25,x±s）分組AQP1AQP2AQP3膀胱尿路上皮癌組3.9167±1.74252.7917±1.10253.2400±1.
5、2342對照組2.5833±1.38052.5000±1.35132.3200±1.4922P＜0.01＞0.05＜0.052免疫印跡法膀胱尿路上皮癌組織中及正常膀胱組織中均有?-actin蛋白表達(dá)，蛋白條帶位置為42kD，表達(dá)量基本相同。AQP1、AQP2和AQP3在膀胱尿路上皮癌組織中及正常膀胱組織中均有表達(dá)。經(jīng)免疫印記發(fā)發(fā)現(xiàn)：AQP1蛋白條帶位置為28kD，AQP2蛋白條帶位置為30kD，AQP3蛋白條帶位置為29kD（圖7）。蛋白條帶灰度值分析后，對原始數(shù)據(jù)行方差齊性檢查，確定方差齊后采用兩獨(dú)立樣本均數(shù)比較t檢驗(yàn)分析表明：AQP1在膀胱尿路上皮癌中的表達(dá)量較正常膀胱組織中增
6、多，二者之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。AQP2表達(dá)量在膀胱尿路上皮癌8新疆醫(yī)科大學(xué)醫(yī)學(xué)碩士學(xué)位論文組織中及正常膀胱組織中并無明顯差別，二者之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。AQP3在膀胱尿路上皮癌中的表達(dá)量較正常膀胱組織中增多，二者之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。（表3）NCNCNCAQP1（28KD）AQP2（30KD）AQP3（29KD）?-actin（43KD）圖7N為正常膀胱組織C為膀胱尿路上皮癌組織表3免疫印跡法學(xué)法兩組患者AQP1-3表達(dá)量的差別（n=25,?x±s）分組AQP1AQP2AQP3膀胱尿路上皮癌組2.3826±0.85072.5305±1
7、.04372.2763±0.3668對照組1.6233±0.42932.2405±1.29061.3444±0.8460P＜0.05＞0.05＜0.059新疆醫(yī)科大學(xué)醫(yī)學(xué)碩士學(xué)位論文討論膀胱癌是泌尿外科臨床上最為常見的腫瘤之一，膀胱癌的發(fā)生和發(fā)展都是復(fù)雜的、多因素的病變變化過程，既有內(nèi)在的遺傳因素，又有外在的環(huán)境等危險(xiǎn)因素。主要危險(xiǎn)因素包括：性別、年齡（年齡越大，危險(xiǎn)系數(shù)越高）、種族、在尿液中發(fā)現(xiàn)致癌物質(zhì)、膀胱粘膜的慢性炎癥、吸煙、職業(yè)暴露和藥物（非那西丁和環(huán)磷酰胺）
