活血健腦膠囊對(duì)大鼠局灶性腦缺血再灌注后神經(jīng)細(xì)胞的保護(hù)作用

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1、活血健腦膠囊對(duì)大鼠局灶性腦缺血再灌注后神經(jīng)細(xì)胞的保護(hù)作用【摘要】【目的】研究活血健腦膠囊對(duì)大鼠局灶性腦缺血再灌注后神經(jīng)細(xì)胞的保護(hù)作用?!痉椒ā窟x用SD大鼠,隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組、尼莫地平組(劑量為10.8mg·kg-1·d-1)、活血健腦膠囊組(劑量為1.8g·kg-1·d-1),后3組再分為缺血2h及再灌注6、12、24h組;采用線栓法復(fù)制大鼠局灶性腦缺血再灌注模型,免疫組織化學(xué)法檢測(cè)神經(jīng)細(xì)胞細(xì)胞色素C(CytC),原位雜交法檢測(cè)Caspase3mRNA、Caspase9mRNA的表達(dá)?!窘Y(jié)果】活血健腦膠囊組腦缺血/再灌注6h細(xì)胞色素C陽性弱表達(dá),與模型組比較有顯著性差異(

2、P<0.01),腦缺血/再灌注12h、24h細(xì)胞色素C的陽性表達(dá)與模型組及假手術(shù)組比較無顯著性差異(P>0.05)。模型組腦缺血再灌注24h海馬Caspase3mRNA、Caspase9mRNA的表達(dá)達(dá)高峰(P<0.01);活血健腦膠囊組腦缺血/再灌注24hCaspase3mRNA、Caspase9mRNA表達(dá)均減弱,與模型組比較有顯著性差異(P<0.01)?!窘Y(jié)論】活血健腦膠囊對(duì)局灶性腦缺血再灌注后神經(jīng)細(xì)胞的保護(hù)作用可能與其能影響神經(jīng)細(xì)胞CytC的釋放,降低腦缺血/再灌注后腦組織Caspase3、Caspase9的活性,從而阻斷細(xì)胞凋亡的發(fā)生有關(guān)。【關(guān)鍵詞】活血健腦膠囊

3、/藥理學(xué);腦缺血/中藥療法;腦組織/病理學(xué);細(xì)胞凋亡;疾病模型,動(dòng)物;大鼠1材料與方法1.1動(dòng)物與藥物SD大鼠78只,體質(zhì)量300~350g,鼠齡5~6月齡,雌雄各半,由河南省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供(合格證號(hào):0001475)?;钛∧X膠囊由上海復(fù)星臨西制藥有限公司提供(批號(hào):200400306);尼達(dá)爾片(尼莫地平),20mg/片,由天津市中央藥業(yè)有限公司生產(chǎn)(批號(hào):020602);9g/L的氯化鈉注射液由北京雙鶴藥業(yè)有限公司提供(批號(hào):030312312)。1.2試劑與儀器PM10AD光學(xué)顯微鏡(OlympusopticalCo.Ltd,JAPAN);HITACHI7500型透射電子

4、顯微鏡(JAPAN);LEiCARM2145型自動(dòng)切片機(jī)(德國(guó));phorbolestersil(atfinalconcentrationof0.20μmol/L)+ionomycin(atfinalconcentrationof1mg/L)foranother48hours.AftermarkedbymonoclonalantibodyofCD3andCD71,theexpressionofCD3+CD71+lymphocytesetry.ResultsSINOinhibitedthelymphocytesproliferationinaconcentrationdependan

5、tmanner,andparticularlyhadaninhibitiononJurkatscellsatG0/G1phase;MTXhadaninhibitiononSphase.ThestimulationofConAandphorbolestersil+ionomycinobviouslyincreasedtheexpressionofCD3+CD71+lymphocytes(P<0.01);SINOattheconcentrationsof1and0.5mmol/LinhibitedtheexpressionofCD3+CD71+lymphocytesafterConAst

6、imulation,andSINOattheconcentrationof1mmol/LinhibitedtheexpressionofCD3+CD71+lymphocytesafterstimulationofphorbolestersil+ionomycin(P<0.05).ConclusionSINOcaninhibittheactivationandproliferationofTlymphocytes,andblockthecellsatG0/G1phase.Itsmechanismmayberelatedphocytesandacology;ARTHRITIS,RHEUM

7、ATOID/TCDtherapy;TLYMPHOCYTES;CELLCULTUREHPIAS1000高清晰度彩色病理圖文分析系統(tǒng)(同濟(jì)醫(yī)科大學(xué)千屏影像工程公司);CytC、Caspase3mRNA、Caspase9mRNA原位雜交試劑盒,由武漢博士德生物工程有限公司提供。1.3分組與給藥將78只大鼠按隨機(jī)法分為假手術(shù)組6只,模型組、尼莫地平組、活血健腦膠囊組各24只,后3組再分為缺血2h及再灌注后6、12、24h組,每組6只。于造模前3d,尼莫地平組

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