正交實(shí)驗(yàn)法優(yōu)選清熱利咽膠囊提取工藝

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1、正交實(shí)驗(yàn)法優(yōu)選清熱利咽膠囊提取工藝作者：余凌英,張丹,胡慧玲,連曉曉【摘要】目的考察清熱利咽膠囊水煎煮工藝條件。方法以加水量、煎煮時(shí)間和煎煮次數(shù)3個(gè)因素進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn),以沒食子酸含量和浸膏收率為評(píng)價(jià)指標(biāo)綜合評(píng)分,確定清熱利咽膠囊的最佳提取工藝條件。結(jié)果清熱利咽膠囊的最佳提取工藝為：加10倍量水，煎煮3次，每次1.0小時(shí)。結(jié)論清熱利咽膠囊提取工藝合理、可行?！娟P(guān)鍵詞】清熱利咽膠囊；正交實(shí)驗(yàn)；提??；沒食子酸；HPLC【Abstract】ObjectiveToinvestigatethepreparationconditions

2、forQingreLiyancapsule.MethodsTheorthogonalexperimenteandthedecoctionfrequeney,andpositegradingeasuredbythegallicacidcontentandextractionratetodeterminebestpreparationconditionsforQingreLiyancapsule.ResultThebestpreparationconditionsofQingreLiyancapsuleis:10timeso

3、fesfordecoction,1hoursforeachtime.ConclusionThepreparationconditionsofQingreLiyancapsuleisreasonableandfeasible.【Keyent；preparation；gallicacid；HPLC　清熱利咽膠囊為臨床經(jīng)驗(yàn)方，由余甘子、桔梗、麥冬等藥物組成，具有清熱瀉火、生津利咽作用，主要用于口干咽燥，咽喉干癢疼痛等癥狀。根據(jù)處方中藥物性質(zhì)，結(jié)合生產(chǎn)實(shí)際，采用水煎煮法進(jìn)行提取。擬采用正交實(shí)驗(yàn)方法，以沒食子酸含量和浸膏收率為評(píng)價(jià)

4、指標(biāo)進(jìn)行綜合評(píng)分，優(yōu)選清熱利咽膠囊提取工藝?，F(xiàn)將研究結(jié)果報(bào)告如下。1實(shí)驗(yàn)材料、試劑和儀器材料與試劑藥材購于成都市荷花池中藥材市場(chǎng)，經(jīng)檢測(cè)符合《中國藥典》2005年版一部有關(guān)的規(guī)定。沒食子酸(批號(hào)110831200302，供含量測(cè)定)，中國藥品生物制品檢定所提供。乙腈為色譜純，水為重蒸餾水，其余試劑均為分析純。儀器島津LC10A高效液相色譜儀；賽多利斯BP211D電子天平。2實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果2.1實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)根據(jù)處方中藥物主要有效成分的性質(zhì)，選擇采用水煎煮提取，并對(duì)提取有較大影響的加水量、煎煮時(shí)間、煎煮次數(shù)三個(gè)因素進(jìn)行考察，

5、每個(gè)因素選擇3個(gè)水平，用(L9（34）)正交表安排實(shí)驗(yàn)。因素水平見表1.由于余甘子是君藥，沒食子酸是其中的主要有效成分之一，因此選擇沒食子酸為主要評(píng)價(jià)指標(biāo)，浸膏收率作為輔助評(píng)價(jià)指標(biāo)，采用綜合評(píng)分方法對(duì)提取條件進(jìn)行評(píng)價(jià)。2.2實(shí)驗(yàn)方法稱取飲片9份，按正交設(shè)計(jì)方案，進(jìn)行煎煮提取，濃縮定容至500ml，備用。表1實(shí)驗(yàn)因素水平表2.2.1浸膏收率的測(cè)定［1］分別精密量取水煎液50ml于已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，水浴濃縮至干，置烘箱中105℃干燥3h，取出，置干燥器中冷卻30min，精密稱重，計(jì)算浸膏收率。2.2.2沒食子酸含量測(cè)定

6、［2］①色譜條件：用18烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈0.1%磷酸（7∶93）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為273nm；柱溫40℃；流速1ml/min；理論塔板數(shù)按沒食子酸峰計(jì)算不低于2500.②對(duì)照品溶液的制備：取沒食子酸對(duì)照品，精密稱定，加甲醇制成0.04mg/ml的溶液作為對(duì)照品溶液。③供試溶液的制備：分別取正交實(shí)驗(yàn)的藥液5ml于25ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，振搖均勻，再精密吸取1ml于10ml量瓶中，甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。④缺余甘子陰性樣品的制備：稱取缺余甘子的處方量藥材，同上述方法制成

7、余甘子陰性供試溶液。⑤標(biāo)準(zhǔn)曲線制備：取對(duì)照品溶液，分別精密吸取1、2、4、6、8、10ml至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，分別進(jìn)樣10μl，按上述色譜條件測(cè)定峰面積。以進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，進(jìn)行回歸，得線性方程Y=2011966.99X+9713.16，r=0.9999，結(jié)果表明，進(jìn)樣量在0.040～0.400μg之間呈良好的線性關(guān)系。⑥測(cè)定：分別精密吸取正交實(shí)驗(yàn)樣品溶液及對(duì)照品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測(cè)定沒食子酸峰面積，計(jì)算含量。2.3實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析以食子酸的含量與浸膏收率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，沒食子酸的

8、含量代表提取物中有效成分的含量，應(yīng)作為工藝評(píng)價(jià)的主要指標(biāo)，權(quán)重系數(shù)為0.8；浸膏收率高低也在一定程度反映提取的效果，特別是大生產(chǎn)中具有意義，故權(quán)重系數(shù)為0.2.實(shí)驗(yàn)結(jié)果與數(shù)據(jù)分析（見表2、3）。方差分析結(jié)果表明，各因素對(duì)提取的影響順序?yàn)椋篊＞A＞B，表明因素C和A影響較大，即加水量和煎煮次數(shù)對(duì)提取效果有顯著影響，最佳