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1、黃精提取物對(duì)小鼠低氧/復(fù)氧損傷的保護(hù)作用文德鑒,陳國(guó)棟,朱云超,張翠蘭,肖本見(jiàn)【摘要】 目的探討黃精提取物對(duì)小鼠低氧/復(fù)氧損傷的保護(hù)作用。方法將小鼠用黃精提取物處理后,建立小鼠低氧/復(fù)氧損傷的模型,觀察小鼠血液中ROS,SOD,MDA等的變化。結(jié)果黃精提取物能降低小鼠ROS和MDA值,增強(qiáng)SOD活性,對(duì)CAT作用不明顯。結(jié)論黃精提取物對(duì)小鼠低氧/復(fù)氧脂質(zhì)過(guò)氧化損傷有保護(hù)作用。【關(guān)鍵詞】黃精提取物低氧/復(fù)氧活性氧超氧化物歧化酶丙二醛過(guò)氧化氫酶;酸性磷酸酶 黃精為百合科黃柏屬多種植物的干燥根莖,具補(bǔ)腎、滋陰潤(rùn)燥之功,用于滋補(bǔ)強(qiáng)身和治療腎虛精虧、肺虛燥咳以及脾胃虛弱之癥〔
2、1〕,已有很長(zhǎng)歷史,是中醫(yī)常用藥物之一。生長(zhǎng)在湖北恩施富硒(恩施是我國(guó)的高硒區(qū))深山叢林中的黃精,由于其富硒而使藥效獨(dú)特,療效顯著。本實(shí)驗(yàn)以小鼠為研究對(duì)象,建立低氧/復(fù)氧損傷的模型,主要研究黃精提取物對(duì)小鼠低氧/復(fù)氧損傷的保護(hù)作用,為黃精的臨床應(yīng)用和進(jìn)一步研究開(kāi)發(fā)提供理論依據(jù)和參考?! ?材料 1.1藥材黃精購(gòu)于恩施中藥材公司,采用雙道束原子熒光光譜法測(cè)定硒的含量為0.58μg/g?! ?.2動(dòng)物昆明種小鼠30只,體重18~22g,♂♀兼用,由同濟(jì)醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供?! ?.3試劑活性氧(ROS)測(cè)定試劑盒、超氧化物歧化酶(SOD)測(cè)定試劑盒、丙二醛(MDA)測(cè)
3、定試劑盒、酸性磷酸酶(ACP)測(cè)定試劑盒、過(guò)氧化氫酶(CAT)測(cè)定試劑盒均為南京建成生物研究所產(chǎn)品,氯胺酮(Ketamine)為美國(guó)Sigma公司產(chǎn)品?;瘜W(xué)試劑均為分析純?! ?.4供試藥液的制備取適量富硒黃精根莖粗粉,用水煎煮3次,濾過(guò)后,濃縮成0.5g/ml的溶液,攪拌下加入乙醇至含醇量達(dá)70%,低溫放置過(guò)夜,濾過(guò),回收乙醇,再濾過(guò)濃縮制成1g/ml的水溶液,115℃滅菌45min,備用,以下簡(jiǎn)稱提取物。 1.5儀器 TG328A型電子分析天平;RE-52型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器;DL-50型超級(jí)恒溫器;756MC型紫外可見(jiàn)光分光光度計(jì);GL-20G高速冷凍離心機(jī)?! ?方
4、法和結(jié)果 昆明種小鼠30只,隨機(jī)分為3組,富硒黃精提取物組ig提取液20ml/kg,對(duì)照組ig等量生理鹽水,自由攝食飲水,連續(xù)給藥5周。實(shí)驗(yàn)前30min陽(yáng)性藥組ip氯胺酮0.08g/kg,將小鼠放入鈉石灰瓶(150ml廣口瓶,10g鈉石灰)中,每瓶放1只,塞緊瓶塞,8min后取出,自由呼吸8min后〔2〕,將小鼠斷頭取血,放入帶蓋的肝素化試管中,立即蓋緊,按試劑盒說(shuō)明書測(cè)ROS,CAT,SOD,MDA和ACP各項(xiàng)指數(shù),進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理后結(jié)果見(jiàn)表1~2。表1黃精提取物對(duì)小鼠ROS和CAT的影響(略)表2黃精提取物對(duì)小鼠SOD,MDA和ACP的影響(略) 結(jié)果表明:富硒黃
5、精和氯胺酮均能降低ROS,且氯胺酮的作用顯著強(qiáng)于富硒黃精;富硒黃精能增加SOD,CAT活性,氯胺酮能降低SOD活性,但對(duì)CAT活性影響無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,富硒黃精與氯胺酮均能減少M(fèi)DA,但兩者作用的差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,富硒黃精與氯胺酮對(duì)ACP影響均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義?! ?討論 小鼠經(jīng)低氧/復(fù)氧應(yīng)激刺激后有大量氧自由基產(chǎn)生,它通過(guò)與不飽和脂肪酸作用引發(fā)脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)生成MDA,氧自由基及MDA通過(guò)多種途徑造成細(xì)胞膜及亞細(xì)胞器膜結(jié)構(gòu)破壞,導(dǎo)致?lián)p傷〔3〕。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,富硒黃精對(duì)小鼠低氧/復(fù)氧脂質(zhì)過(guò)氧化損傷有保護(hù)作用,谷胱甘肽過(guò)氧化物酶GSH-Px是一種重要的抗氧化酶,硒是GSH-Px
6、的活性成分之一,富硒黃精根莖中富含硒,可以提高GSH-Px活力,從而對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生保護(hù)作用;SOD是一種內(nèi)源性自由基清除劑,本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明富硒黃精能增加SOD及CAT活性即達(dá)到保護(hù)作用。氯胺酮能降低ROS及MDA,且降低ROS的作用明顯強(qiáng)于富硒黃精組,表明富硒黃精在小鼠低氧/復(fù)氧脂質(zhì)過(guò)氧化損傷方面的保護(hù)作用比氯胺酮要溫和一些,對(duì)低氧/復(fù)氧脂質(zhì)過(guò)氧化損傷均有保護(hù)作用?!?/p>