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《復(fù)氧損傷的作用.pdf》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、中國病理生理雜志ChineseJournalofPathophysiology2014，30(12)：2201-2205[文章編號]1000—4718(2014)12—2201．05ROS／PKC／p38MAPK途徑在山茱萸多糖抑制心肌細(xì)胞缺氧／復(fù)氧損傷的作用木來麗娜，宋麗華，張曉京，張曉一，雷靜文，劉芳，郭春花，宋曉亮(長治醫(yī)學(xué)院藥學(xué)系，山西長治046000)[摘要]目的：觀察山茱萸多糖(polysaccharidefromFructuscorni，PFC)對缺復(fù)氧(hypoxia／reoxygenation
2、，}L／R)損傷心肌細(xì)胞的保護(hù)作用，并探討其對ROS／PKC／p38MAPK途徑的影響。方法：分離原代乳鼠心肌細(xì)胞，建立H／R模型，細(xì)胞分為7組：正常對照組(N組)、缺復(fù)氧組(H／R組)、缺氧／復(fù)氧+PFC(終濃度20ms／L、100ms／L和200msZL)預(yù)處理組、缺氧／復(fù)氧+PFC(100ms／L)預(yù)處理+蛋白激酶C特異性阻斷劑chelerythrine(1i．Lmol／L)組及缺氧／復(fù)氧+PFC(100ms／L)預(yù)處理+p38MAPK特異性阻斷劑SB203580(10I~mol／L)組。倒置顯微鏡下觀察
3、細(xì)胞形態(tài)和自發(fā)搏動頻率，Hoechst33258染色觀察細(xì)胞凋亡率，酶標(biāo)儀測定ROS含量、SOD活性及LDH漏出量，免疫印跡法檢測PKC、p-p38MAPK和HSP70的蛋白水平。結(jié)果：H／R組細(xì)胞活力下降，搏動頻率減慢，細(xì)胞ROS含量、LDH漏出量、細(xì)胞凋亡率及p-p38MAPK的水平均較N組顯著增加(P<0．01)。經(jīng)PFC預(yù)處理后，細(xì)胞搏動頻率、SOD活性及PKC、HSP70的水平較H／R組顯著增加(P<0．05，)，p-p38MAPK的水平和細(xì)胞凋亡率均減少(P<0．05)，而PFC的保護(hù)作用能被che
4、lerythrine或SB203580抑制。結(jié)論：山茱萸多糖可抑制心肌細(xì)胞缺氧／復(fù)氧損傷，其作用可能與增加SOD活性、抑制ROS產(chǎn)生、激活PKC并抑制p38MAPK的過度激活有關(guān)。[關(guān)鍵詞】山茱萸；多糖；缺氧／復(fù)氧；心肌細(xì)胞；活性氧[中圖分類號]R285．5[文獻(xiàn)標(biāo)志碼]Adoi：10．3969／j．issn．1000-4718．2014．12．015RoleofROS／PKC／p38MAPKpathwayinprotectiveefectsofpolysac—charidefromFructuscornion
5、ratcardiomyocytesagainsthypoxia-reoxy·genationinjuryLAILi-na，SONGLi—hua，ZHANGXiao-jing，ZHANGXiao—yi，LEIJing—wen，LIUFang，GUOChun．hua．SONGXiao．1iang(DepartmentofPharmacology，ChangzhiMedicalCollege，Changzhi046000，China．E-mail：songxiaoliang62@sina．con)[ABSTRACT]
6、AIM：ToinvestigatetheeffectofpolysaccharidefromFructuscorni(PFC)oncardiomyoeytesagainsthypoxia／reoxygenation(H／R)injuryanditspossiblerelationshipwithROS／PKC／p38MAPKpathway．METHODS：Prima-ryeardiomyocyteswereisolatedfromneonatalSDratsandrandomlydividedintonorma
7、lgroup，H／Rgroup，PFC(20ms／L，100mLand200mg／L)preconditioning+H／Rgroups，chelerythrine+PFC(100ms／L)+I-I／RgroupandSB203580+PFC(100ms／L)+H／Rgroup．Thecellviabilitywasmeasuredbyinve~edmicroscopicobservation．Apoptosisinthecar-diomyocyteswasdetectedbyHoechst33258stain
8、ingandfluorescencemicroscopy．Thelevelsoflactatedehydmgenase(LDH)andsuperoxidedismutase(SOD)inthecellculturesupematants，andthereactiveoxygenspecies(ROS)inthecellswerealsomeasuredbymicroplatereade
