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《efp蛋白介導(dǎo)芹菜素抗心肌缺氧復(fù)氧損傷保護(hù)作用的機制研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、分類號：密級：UDC：學(xué)號：406522512582南昌大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文Efp蛋白介導(dǎo)芹菜素抗心肌缺氧/復(fù)氧損傷保護(hù)作用的機制研究Themechanismofefpmediatingapigeninagainstcardiomyocytesanoxia/reoxygenationinjury蔡鑫之培養(yǎng)單位（院、系）：南昌大學(xué)藥學(xué)院指導(dǎo)教師姓名、職稱：何明教授申請學(xué)位的學(xué)科門類：醫(yī)學(xué)學(xué)科專業(yè)名稱：藥理學(xué)論文答辯日期：2015年6月日答辯委員會主席：程曉曙a評閱人：aa2015年6月I學(xué)位論文獨創(chuàng)性聲明一、學(xué)位論文獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)
2、行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得南昌大學(xué)或其他教育機構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名（手寫）：蔡鑫之簽字日期：2015年6月10日二、學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解南昌大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)南昌大學(xué)可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用
3、影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編本學(xué)位論文。同時授權(quán)北京萬方數(shù)據(jù)股份有限公司和中國學(xué)術(shù)期刊（光盤版）電子雜志社將本學(xué)位論文收錄到《中國學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》和《中國優(yōu)秀博碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》中全文發(fā)表，并通過網(wǎng)絡(luò)向社會公眾提供信息服務(wù)，同意按“章程”規(guī)定享受相關(guān)權(quán)益。學(xué)位論文作者簽名（手寫）：蔡鑫之導(dǎo)師簽名（手寫）：何明簽字日期：2015年6月10日簽字日期：2015年6月10日Efp蛋白介導(dǎo)芹菜素抗心肌缺氧/復(fù)氧損傷保護(hù)作用的機制研究論文題目姓名蔡鑫之學(xué)號406522512582論文級別博士□碩士?院/系/所藥學(xué)院專業(yè)藥理學(xué)E_mail備注：?公開□保密（向校學(xué)
4、位辦申請獲批準(zhǔn)為“保密”，年月后公開）I摘要摘要目的：芹菜素屬于黃酮類化合物，廣泛存在于多種蔬菜、中藥材中。研究發(fā)現(xiàn)其具有多種藥理學(xué)活性，其中發(fā)現(xiàn)具有抗心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用但其機制還尚未清楚。本實驗采用了H9c2心肌細(xì)胞，成功建立H9c2心肌缺氧/復(fù)氧（A/R）損傷模型，并利用已經(jīng)構(gòu)建成功的efp-siRNA腺病毒，深入探討芹菜素抗H9c2心肌樣細(xì)胞缺氧復(fù)氧（A/R）損傷的保護(hù)作用與雌激素效應(yīng)環(huán)指蛋白（efp）蛋白之間的關(guān)系。方法：采用狀態(tài)良好的H9c2心肌細(xì)胞，經(jīng)常規(guī)培養(yǎng)后隨機分成五組，每組重復(fù)六次：（1）正常對照組(Control)、（2）缺氧/復(fù)氧組（A/
5、R）、（3）芹菜素+A/R組(apigenin+A/R)、（4）芹菜素+陰性對照+A/R組(apigenin+NC+A/R)、（5）芹菜素+efp-siRNA+A/R組(apigenin+efp-siRNA+A/R)。采用MTT比色法測定各實驗組細(xì)胞存活率；采用Westernblotting（免疫印跡）法測定efp蛋白表達(dá)水平；采用流式細(xì)胞儀測定各實驗組細(xì)胞的細(xì)胞凋亡水平以及細(xì)胞內(nèi)線粒體膜電位（Δψm）穩(wěn)定性、活性氧（ROS）含量；采用酶聯(lián)免疫法測定各實驗組細(xì)胞上清中丙二醛(MDA)的含量以及谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、乳酸脫氫酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SO
6、D)的活性。結(jié)果：在成功建立缺氧復(fù)氧損傷模型基礎(chǔ)上，H9c2心肌細(xì)胞經(jīng)過芹菜素預(yù)處理24h后再經(jīng)過A/R損傷后，與A/R組相比，H9c2心肌細(xì)胞中efp蛋白表達(dá)水平明顯上調(diào)具有顯著性差異(P<0.01)；不同濃度芹菜素預(yù)處理組與A/R組相比，40μM濃度的芹菜素預(yù)處理組中efp蛋白表達(dá)量上調(diào)最為明顯且細(xì)胞存活率最高，具有顯著性差異(P<0.01)；通過酶聯(lián)免疫法測定各實驗組細(xì)胞上清后，與A/R組相比：芹菜素+A/R組MDA含量下降、LDH活性下降，SOD與GSH-Px活性都分別增強，具有顯著性差異(P<0.01)；采用流式細(xì)胞儀測定各實驗組后，與A/R組相比：芹菜素+A
7、/R組細(xì)胞凋亡數(shù)量減少、線粒體膜電位穩(wěn)定性增加、細(xì)胞內(nèi)ROS含量明顯減少，具有顯著性差異(P<0.01)；然而芹菜素+efp-siRNA+A/R組，與芹菜素+A/R組相比芹菜素抗心肌缺氧復(fù)氧（A/R）損傷的保護(hù)作用卻被顯著削弱。III摘要結(jié)論：芹菜素抗心肌缺氧復(fù)氧（A/R）損傷的保護(hù)作用至少部分地依賴于efp蛋白表達(dá)程度的增加。關(guān)鍵詞：芹菜素；雌激素效應(yīng)環(huán)指蛋白；缺氧復(fù)氧損傷；心肌保護(hù)IVAbstractABSTRACTObjective:Apigeninisthewidelydistributedflavonoidthatexitsin
