腎素(前體)受體在h9c2心肌細(xì)胞缺氧復(fù)氧損傷中的作用及機制研究

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1、大連醫(yī)科大學(xué)博士畢業(yè)論文中圖分類號密級腎素(前體)受體在H9c2心肌細(xì)胞缺氧復(fù)氧損傷中的計:學(xué)位論文:93頁表格:9個插圖:18幅作用及機制研究劉巖指導(dǎo)教師:姜一農(nóng)教授申請學(xué)位級別:博士學(xué)位學(xué)科(專業(yè)):內(nèi)科學(xué)培養(yǎng)單位:大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院完成時間:二O一四年三月答辯委員會主席:大連醫(yī)科大學(xué)博士畢業(yè)論文獨創(chuàng)性聲明l

2、IIIIBillIIIIIIIIIIlUIY2587033本人鄭重聲明:所呈交的學(xué)位論文是本人在指導(dǎo)教師指導(dǎo)下進行的研究工作及所取得的研究成果。除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外,論文中不包含

3、其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不包含為獲得大連醫(yī)科大學(xué)或其它教育機構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均己在論文中作了明確的說明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名:簽字日期:——年一月——日大連醫(yī)科大學(xué)博士畢業(yè)論文關(guān)于學(xué)位論文使用授權(quán)的說明本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,同意學(xué)校保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版,允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)大連醫(yī)科大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索,可以采用影印、縮印或掃描等

4、復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。本學(xué)位論文屬于(請在以下相應(yīng)方框內(nèi)打“√”):1.保密口,在一年解密后適用本授權(quán)書。2.不保密口。作者簽名:導(dǎo)師簽名:日期:年月日日期:年月日大連醫(yī)科大學(xué)博士畢業(yè)論文目錄一、摘要?????????????????????????..1(一)中文摘要????????????????????..1(二)英文摘要???????????一?????????6二、正文?????????????????????????.1l第一部分缺氧復(fù)氧導(dǎo)致腎素(前體)受體在H9c2胚胎大鼠心肌細(xì)胞中的表

5、達(dá)變化(一)前言???????????..????????????..11(一)月Ⅱ舌???????????..?????????????.¨(二)材料和方法?????????????????????..111、實驗材料??????????????????????.112、H9c2細(xì)胞培養(yǎng)及傳代????????????????..143、免疫細(xì)胞化學(xué)方法和步驟???????????????144、免疫熒光方法和步驟?????????????????155、RT·PCR檢測(P)RRmRNA表達(dá)????????

6、????166、siRNA干擾實驗???????????????????187、Real-TimePCR檢N(P)RRmRNA的表達(dá)????????..198、心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧模型的建立?????????????219、實驗分組??????????????????????。2110、Westernblot方法測定(P)RR蛋白表達(dá)??????.???..21(--)數(shù)據(jù)統(tǒng)計方法?????????????????????23(四)結(jié)果?????????????????????????231、(P)RR在H9c

7、2胚胎大鼠心肌細(xì)胞中的表達(dá)???????..23大連醫(yī)科大學(xué)博士畢業(yè)論文2、(P)RR干擾的效率檢測結(jié)果??????????????.243、缺氧復(fù)氧致(P)RR蛋白表達(dá)的變化???????????.25(五)討論????????????????????????..26(六)結(jié)論????????????????????????..29(七)參考文獻(xiàn)??????????????????????..30第二部分缺氧復(fù)氧致H9c2心肌細(xì)胞凋亡及炎癥因子表達(dá)增加(一)前言???????????????????????

8、??35(二)材料和方法?????????????????????..351、實驗材料??????????????????????.352、H9c2細(xì)胞培養(yǎng)及傳代?????????????????373、心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧模型的建立?????????????384、AnnexinV.FITC/PI雙染法檢測細(xì)胞凋亡步驟??????385、Westernblot方法檢測Caspase.3蛋白表達(dá)????????..386、ELISA方法測定炎癥因子表達(dá)?????????????.40(三)數(shù)據(jù)統(tǒng)計方法?????

9、????????????????41(四)結(jié)果?????????????????????????411、AnnexinV.FITC/PI法檢測缺氧復(fù)氧組H9c2細(xì)胞凋亡率??..412、缺氧復(fù)氧致H9c2細(xì)胞Caspase.3蛋白表達(dá)水平增加????..423、缺氧復(fù)氧致H9c2細(xì)胞分泌炎癥因子增加?????????43(五)討論????????..????????????????43(六)結(jié)論??

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