果實(shí)采后品質(zhì)測(cè)定方法總結(jié)

果實(shí)采后品質(zhì)測(cè)定方法總結(jié)

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1、果實(shí)采后品質(zhì)測(cè)定方法總結(jié)將整株按照花球、莖、葉、根4個(gè)器官分割,清洗,葉片取植株中部健壯的成熟葉片,重復(fù)間取相同部位。含水量測(cè)定所需儀器:烘箱,天平,濾紙取樣,洗凈,105°C殺青2小時(shí),70°C烘干至恒重,測(cè)定其含水量可溶性固形物測(cè)定一、試劑:二、儀器:手持式折光儀(手持式糖度計(jì))、研體、滴管、濾紙、擦鏡紙、蒸憾水三、實(shí)驗(yàn)步驟1.樣品制備:取5.0g果實(shí)放入研體磨碎,4000r/m,離心10min取汁液。2.調(diào)零:打開(kāi)手持式折光儀棱鏡蓋板,用擦鏡紙輕擦折光鏡面,滴兒滴蒸鐳水于折光鏡面上,合上蓋板,將儀器對(duì)向光線(xiàn),由目鏡觀察,轉(zhuǎn)動(dòng)棱鏡旋鈕,使視野分成明暗兩部分。若有偏離,

2、用專(zhuān)用螺絲刀補(bǔ)償器旋鈕,使視野分為黑白兩色,同時(shí)使明暗分解線(xiàn)與標(biāo)尺上的0位重合。打開(kāi)蓋板擦干水分3.測(cè)定,滴入樣品在折光鏡上,并讀取讀數(shù)。重復(fù)三次,計(jì)算平均值和標(biāo)準(zhǔn)偏差。葉綠素測(cè)定一、儀器設(shè)備:1)分光光度計(jì);2)電子頂載天平(感量0.01g);3)研缽;4)棕色容量瓶;5)小漏斗;6)定量濾紙;7)吸水紙;8)擦境紙;9)滴管。二、試劑:1)80%丙酮;2)石英砂;3)碳酸鈣粉。三、實(shí)驗(yàn)步驟1)取新鮮葉片(或其它綠色組織)或干材料,擦凈組織表面污物,剪碎(去中脈),混勻。2)稱(chēng)取剪碎的新鮮樣品0.5g,共3份,分別放入研缽中,加少量石英砂和碳酸鈣粉及2?3ml丙酮,研成

3、均漿,再加丙酮10ml,繼續(xù)研磨至組織變白。靜置3?5mino3)取濾紙1張,置漏斗中,用乙醇濕潤(rùn),沿玻棒把提取液倒入漏斗中,過(guò)濾到25ml棕色容量瓶屮,用少量丙酮沖洗研缽、研棒及殘?jiān)鼣?shù)次,最后連同殘?jiān)黄鸬谷肼┒峰?)用滴管吸取丙酮,將濾紙上的葉綠體色素全部洗入容量瓶中。直至濾紙和殘?jiān)袩o(wú)綠色為止。最后用丙酮定容至25ml,搖勻。5)把葉綠體色素提取液倒入光徑1cm的比色杯內(nèi),以80%丙酮為空口,在波長(zhǎng)663nm和645nm下測(cè)定吸光度。四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算葉綠素a的含量=12.7xOD663?2.69xOD645葉綠素b的含量=22.9xOD645?4.86xOD663

4、葉綠素a、b的總含量=8.02xOD663+20.20xOD645Brandford法檢測(cè)蛋白質(zhì)含量-、儀器和試劑1.儀器:分光光度計(jì)、移液搶、具塞刻度試管、燒杯、量瓶、研缽、85%磷酸2.試劑:考馬斯亮藍(lán)G-250染料、牛血清蛋白、90%乙考馬斯亮藍(lán)G-250:稱(chēng)取lOOmg考馬斯亮藍(lán),溶于50ml90%乙醇中,加入100ml85%的磷酸,再用蒸憾水定溶到1L,貯于棕色瓶中。標(biāo)準(zhǔn)牛血清蛋白溶液:100ug/ml牛血清蛋白:稱(chēng)取牛血清蛋白25ing加水溶解并定溶至100ml,吸取上述溶液40ml,用蒸憾水稀釋至100ml即可。二、實(shí)驗(yàn)步驟1.標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制取6支試管,按下

5、表加入試劑(0?100ug/m1的標(biāo)準(zhǔn)蛋白)?;旌暇鶆蚝螅蚋鞴苤屑尤?ml考馬斯亮藍(lán)溶液,搖勻,并放置5min左右,用lcm光徑的比色皿在595nm下比色測(cè)定吸光度。以蛋白質(zhì)濃度為橫坐標(biāo),以吸光度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的各試劑加入量管號(hào)123456標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)/ml00.200.400.600.801.00水/ml1.000.800.600.400.200蛋白質(zhì)質(zhì)量/ml0204060801002.樣品的測(cè)定(1)樣品的提取:稱(chēng)取鮮樣0.25?0.5g,用5ml水研磨成勻漿后,3000r/min離心10min,取上清液1.0ml(視蛋白質(zhì)含量適當(dāng)稀釋?zhuān)┯谠嚬苤?/p>

6、(每個(gè)樣品重復(fù)2次)。(2)加入5ml考馬斯亮藍(lán)溶液,充分混合,放置2min后在595nm下比色,測(cè)定吸光度,并通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)查得蛋白質(zhì)含量。四、結(jié)果計(jì)算樣品中蛋白質(zhì)含量=V5x^xl000(mg/g)式中:C—查標(biāo)曲值;VT—提取液總體積;WF—樣品鮮重;VS—測(cè)定時(shí)加樣量,mlo總糖和還原糖的測(cè)定——3,5—二硝基水楊酸法一、試劑3,5—二硝基水楊酸(DNS)試劑:稱(chēng)取6.5gDNS溶于少量熱蒸飾水中,溶解后移入1000ml容量瓶中,加入2mol/L氫氧化鈉溶液325ml,再加入45g丙三醇,搖勻,冷卻后定容至1000ml。葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液:準(zhǔn)確稱(chēng)取干燥恒重的葡萄糖200

7、mg,加少暈蒸餡水溶解后,以蒸餡水定容至100ml,即含葡萄糖為2.0mg/mlo6moVLHC1:取250ml濃HC1(35%?38%)用蒸飾水稀釋到500ml。碘一碘化鉀溶液:稱(chēng)取5g碘,10g碘化鉀溶于100ml蒸鐳水中。6NNaOH:稱(chēng)取120gNaOH溶于500ml蒸懈水中。0.1%酚酥指示劑。二、器材WFJUV-2000型分光光度計(jì),水浴鍋,電爐,15mmxl80mm試管。三、操作方法1、葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)制作取5支15mmx180mm試管,按下表加入2.0mg/ml葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液和蒸飾水。管號(hào)葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液(/ml)蒸憾

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