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《肝癌癌基因p28gank及其新家族成員p28-ⅱ的克隆 鑒定與功能分析》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、麓三星瓢鑫室勰QQ強健圭壘艟豫塞基建黧蛭星委英文績略讕表HCCHepatoeeUularCarcinoma麟綱腿瞧翳癭ICeIntrahepaticCholangiocareinoma肝內(nèi)膽管細胞瘸MHCMetastatichepaticcarcinoma轉(zhuǎn)移性脬癌NlS竣兔疫菠應(yīng)評分CICSChineseImmunoReactiveCountingScores中國免疫反應(yīng)計數(shù)評分鞲孓nest-PCRl*everse—transcriptionnest-polymerase逆轉(zhuǎn)錄鬃茂粥疑chainreactionAN
2、KaracyrmrepeatdomainAmcyrin震復(fù)序列IpTG異囂基驤代．§-D．半乳糖營D囂PeDiethylpyrocarbonate焦碳酸二乙酯DTTDithiothreitol二虢蘇糖醇MOpS3一(辯璃辯代)稀磺酸EDl：AEthylenediamineteraaeeticacid2-二&胺熙乙酸NLSNuclearlocation蠡耐核定位镕譬NESNuclearexportsignal出援債號R8DRblbindingdomainR§l疆鑫縫合鬣燾筮三墨醫(yī)盤繳2Q塑繳遐±望些鯰塞夔墓燕銎中文摘要
3、肝細胞性肝癌(簡稱肝癌。HepatocellularCarcinoma，HCC)是我國最常見夔藤發(fā)艟癌之一，焚發(fā)生發(fā)震是壹體肉多蒸囂參與、多步驟貉圈靜炭雜遘稷。囂前，盡管已綴鑒定了一些肝癌的抑瘸基因，如p53和p』6_舢洲，并明確了它們在肝薅審鶼特舅牲失滔，毽是襲瓤癌發(fā)囊串特異縫激活麴瘞基戳熹
4、】少覓鞭道。蘆囂矗糍是新近克隆的一個農(nóng)肝癌中高表達的癌基因，其致瘢性可能舄p280AN‘蛋白通過離磷酸純并陣解摔瘸蛋自gbl，促使細施自Gl期商S期轉(zhuǎn)化有關(guān)。gbl與E2F轉(zhuǎn)蒙因子榍結(jié)合共闋調(diào)控下游基因的表達；選些基因的開放與
5、細胞的增殪分裂有關(guān)。gbl-E2F轉(zhuǎn)錄復(fù)合物的功能受剿CDK4．CyclinDl．p16制K48信號通路的調(diào)控。本綴與國強安驗室鮑研究郡諼驥，p2sGANK鼉纓熬羼麓激酶CDK4提縫會，撼零其在CDK4．CyclinDl-p16刪“氣_Rbl．E2F信號轉(zhuǎn)蹲通路中的調(diào)節(jié)作用。零輯褒罄在逶避應(yīng)靄NorthemBlot及受疫綴緩純學(xué)接拳撿灝懿艿積麟基溺在天肝癌組織中的表達水平與I
6、笛床病理指標(biāo)間的關(guān)聯(lián)，確定p28溯胖基因在肝癌發(fā)生發(fā)震遙程孛靜作蘑。邋過基禹轉(zhuǎn)染、免疫熒光染色、細胞生物攀行為檢測和裸鬣荷瘤等實驗技術(shù)，研究p
7、280^N‘濺自在細胞內(nèi)的定位及對于細胞生長能力的影響。應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄．巢式PCR技術(shù)尋我p2妒4孵基因在肝癌內(nèi)的新家族成員，并應(yīng)用RT-PCR方法檢測簸發(fā)現(xiàn)基閡在人翳癟組織中的表達零平。避過免疫共沉淀、GSTpull．down等技術(shù)研究p28GANK和p28．H與抑癌灝白Rbl及細胞周期激酶CDK4間的相互作用，探討貯s6ANK窺癬g．囂在Rbl．CDK4-CyclinDl-p16科期‘篷號轉(zhuǎn)導(dǎo)逶爨孛熬露瓣。Northernblot雜交顯示，辟船副刪基因在人腦組織中高表選，較弱表達于肺、脾、囂黎瓿霰心飄，不表達予舞、獲
8、、黌、，l、瑟秘大醞等游純遂綴織。崧醴鍘入艇癌組織中，p2艿刪眥基暇mRNA的檢出率為96，9％(62／64)，其中癌較瘀旁組織表達瞬顯升高靜蠢91．9％(57／62，2．708士1．418，P<0．001)。商門脈癌柱形成的肝癌p28Ga眥基因的表達攝著離子無癌栓的腮癌(p=0．021)。脾瘤組織內(nèi)竅靜脈饅濾的肝癌p28酬脯基因韻表達明鼴高于無靜脈侵潤的肝癌(p=0．047)。束發(fā)現(xiàn)p2∥觥載表達舞裹譬乙翳襄毒感染、矗漶AFP求乎、翳疆像、瓣攘大，l、及翳癌分綴等其它臨床病理指標(biāo)之間有明顯的相關(guān)性。皰愛蠡磐摹《備弱
9、兔獲天蝣86媸‘撬薄行瓣癌及霪莘耱警癌綴緩留學(xué)豹免疫綴純結(jié)果顯示．p280AN‘特異性高表達于惡性肝上皮細胞，不表達于良惡性膽管上皮細胞、筮三攀醫(yī)去燮2Q盟級燧±望些浚塞藏震蘊要血管內(nèi)皮細胞、Kuffer氏細胞及肝問質(zhì)細胞。對肝癌組織的兔疫組化染色評分與臨床瘸理資拳章程關(guān)聯(lián)，發(fā)現(xiàn)p28GAN＆在囂手癌內(nèi)靜過表述與瓣瘤大小鬃正穗關(guān)(p=o．009)，與贏清HBs抗原感染呈受相關(guān)(盧=0．001)，與Edmonson分級凰負相關(guān)。26例入肝癌綴織切片同時行p28GA獄與Rbl的免疫組化染色結(jié)果鼴示，p280ANK巍疑癌纓
10、溉胞核內(nèi)救表達求平(NISscores)與Rbl的寢達無嘴顯關(guān)聯(lián)．而p28GANK在肝癌組織內(nèi)的總體表達水平(CICSScores，胞核+胞漿)與Rbl蛋是靜表達曼延撼關(guān)(，=8，475，P=0，019)。應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄．巢式PCR技術(shù)首次在國人肝癌中發(fā)現(xiàn)了p勰側(cè)M纂因新家族成員p28-II(GenBank登蒙號：AY057056)。p28-II與
