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《藍(lán)莓對肝纖維化大鼠肝臟tgf藍(lán)莓對肝》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、藍(lán)莓對肝纖維化大鼠肝臟TGF藍(lán)莓對肝 摘要： 目的觀察藍(lán)莓對大鼠肝纖維化肝組織TGF-B1和MMP-2、TIMP-1mRNA表達(dá)的影響，探討藍(lán)莓對大鼠肝纖維化的預(yù)防保護(hù)作用機制?！ 》椒⊿D大鼠隨機分為生理鹽水對照組（A），模型組（B），藍(lán)莓汁預(yù)防組（C），丹芍化纖膠囊預(yù)防組（D），藍(lán)莓汁+丹芍化纖膠囊預(yù)防組（E），用四氯化碳（CC14）復(fù)合因素復(fù)制大鼠肝纖維化模型，共8周。測定各組大鼠血清谷氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）活性；并進(jìn)行肝組織病理學(xué)檢查；采用實時熒光定量PCR（Real-time
2、PCR）檢測TGFβ1和MMP-2、TIMP-2mRNA的表達(dá) 結(jié)果與B組比較，各預(yù)防組血清ALT及AST均明顯降低（P<0.05）。與A組比較，B組TGFB1、TIMP1的表達(dá)增加（P<0.05），MMP2的表達(dá)減少（P<0.05）。與B組比較，各預(yù)防組的TGFβ1、TIMP1的表達(dá)均減少（P<0.05），而MMP2的表達(dá)增加（P<0.05）。 結(jié)論藍(lán)莓對CC14所致大鼠肝纖維化具有一定的預(yù)防保護(hù)作用，其機制可能與藍(lán)莓抑制TGF-β1及TIMP-1分子的表達(dá)，增加MMP-2的表達(dá)有關(guān)?！ ￡P(guān)鍵詞：藍(lán)莓；肝纖維化；TG
3、F-β1；MMP-2：TIMP-1 肝纖維化（hepatic8fibrosis）是機體對慢性肝損傷的一種修復(fù)反應(yīng)，是慢性肝病的共有病理變化。肝纖維化的實質(zhì)是細(xì)胞外基質(zhì)（extracellularMatrix，ECM）合成與降解失衡，導(dǎo)致ECM在肝內(nèi)過度沉積所致。在肝內(nèi)ECM降解中起關(guān)鍵作用的是基質(zhì)金屬蛋白酶（MatrixMettalloproteinases，MMPs）和天然抑制物金屬蛋白組織抑制劑（TissueinhibitorofMettalloproteinases，TIMPs）。TIMPs可特異性結(jié)合活化型的MM
4、Ps，導(dǎo)致后者功能失活。通過動物實驗和臨床研究，目前已認(rèn)識到MMPs和TIMPs在肝纖維化中發(fā)揮著重要作用?！ ∷{(lán)莓屬杜鵑花科越桔屬，因其富含花青素、多酚類和黃酮類等生物活性物質(zhì)，具有較強的抗氧化作用。本課題組的前期研究結(jié)果顯示，藍(lán)莓對四氯化碳（CC14）所致的大鼠急性肝損傷和大鼠肝纖維化有一定的預(yù)防作用。本研究旨在觀察藍(lán)莓對大鼠肝纖維化組織中TGFβ1和MMP2、TIMP1表達(dá)的影響，進(jìn)一步探討藍(lán)莓預(yù)防肝纖維化作用機制?！ ?.材料 1.1實驗動物雄性SD大鼠清潔級，體重220±20g，由貴陽醫(yī)學(xué)院動物實驗室提供。批號
5、：SCXK（黔）2002-0001?！ ?.2主要藥品與試劑藍(lán)莓（兔眼品種），由貴州省麻江縣藍(lán)莓生產(chǎn)基地提供，7月份采摘，-20℃保存，臨用時解凍榨汁，2g干果約榨1ml藍(lán)莓汁。丹芍化纖膠囊，膠囊由貴陽制藥廠生產(chǎn)（批號：20081011）。TGF-β1、TIMP1、MMP2引物用PrimerExpressSoftWare設(shè)計，委托上海捷瑞生物有限公司合成。β-actin引物由美國國家環(huán)境衛(wèi)生科學(xué)研究所劉杰博士惠贈。CC14由成都金山化學(xué)試劑有限公司生產(chǎn)（批號：070410），膽固醇由北京化學(xué)試劑公司生產(chǎn)（批號：060801
6、），SYBRGreen試劑盒由美國Applied8Biosystems公司生產(chǎn)（批號：10804104），RNA純化試劑盒由北京天根生化科技有限公司生產(chǎn)（批號：#H6820），反轉(zhuǎn)錄試劑盒由加拿大FermentasMBI公司生產(chǎn)（批號：00033699），Trizol由美國Invitrogen公司生產(chǎn)（批號：382739），DEPC、磷酸鹽緩沖液（PBs液）、枸櫞酸鹽緩沖液均由武漢博士德生物工程有限公司（批號：AR0044、AR0030、AK0024）?！ ?.方法 2.1分組45只雄性SD大鼠隨機分為5組：生理鹽水對照
7、組（A組）、模型組（B組）、藍(lán)莓汁預(yù)防組（C組）、丹芍化纖膠囊預(yù)防組（D組）、藍(lán)莓汁+丹芍化纖膠囊預(yù)防組（E組），每組各9只。 2.2模型復(fù)制除正常對照組外，其他4組用復(fù)合病因刺激制備肝纖維化模型。模型制備首劑為0.4ml/100gCC14皮下注射，CC14濃度為40%，按2：3比例與花生油配制，每隔4d注射1次，以后劑量為0.3ml/100g，同時給予高脂飲食（79.5%玉米粉、20%豬油、0.5%膽固醇），共8周。同期，藍(lán)莓汁預(yù)防組用藍(lán)莓汁（1.5ml//100g）每天灌胃1次。丹芍化纖膠囊預(yù)防組用丹芍化纖膠囊（0.
8、1g/100g）每天灌胃1次。藍(lán)莓汁+丹芍化纖膠囊預(yù)防組用藍(lán)莓汁（1.5ml//100g）+丹芍化纖膠囊（0.1g/100g）每天灌胃1次。正常對照組，從飼養(yǎng)即日起，每天予0.9%氯化鈉注射液2ml灌胃，并予普通大鼠飼料飼養(yǎng)?！ ?.3標(biāo)本采集實驗結(jié)束時從股動脈放血處死全部動物，血液以半徑5cm，150
