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《不同色光刺激對(duì)大鼠初級(jí)視皮層電活動(dòng)的影響》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、摘要達(dá)M—opsin，也表達(dá)UV—opsin，M-opsin幾乎在所有的哺乳動(dòng)物視網(wǎng)膜中都存在，其與動(dòng)物的生存、繁衍都具有密切的關(guān)系，S-opsin是決定大鼠是否具有顏色視覺(jué)的關(guān)鍵感光色素，但大鼠是否具有功能性的S-opsin還有待進(jìn)一步證實(shí)，大鼠的行為學(xué)測(cè)試結(jié)果也為其可能存在一定形式的顏色視覺(jué)提供了證據(jù)，但大鼠顏色視覺(jué)的具體情況目前并不是很清楚。本實(shí)驗(yàn)擬采用白色及不同單色光的刺激，探討色光刺激對(duì)大鼠視皮層腦電活動(dòng)的影響以及可能的強(qiáng)直后增強(qiáng)現(xiàn)象，進(jìn)一步加深對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)神經(jīng)元可塑性的認(rèn)識(shí)，為進(jìn)一步了解大鼠是否具有
2、顏色視覺(jué)以及單色光刺激對(duì)初級(jí)視皮層電活動(dòng)的影響的機(jī)制，采用免疫組化方法研究大鼠視網(wǎng)膜視桿細(xì)胞和視錐細(xì)胞感光色素以及視皮層感光色素的表達(dá)，為腦認(rèn)知的研究奠定一定的理論基礎(chǔ)。方法：1電生理記錄：健康成年SD大鼠10只，體重1809一---2209，雌雄不拘。水合氯醛腹腔注射麻醉，暴露顱骨，參照大鼠腦解剖圖譜定位初級(jí)視皮層V1區(qū)(前囟向后7．Om，左旁2．Omm)，分別將記錄電極置于Vl區(qū)，參考電極E1(前囟向前2．Om，右旁2．Omm)固定于額葉，牙托粉固定。于術(shù)后第5、7、9d行腦電信號(hào)采集。將已植入電極大鼠置于有
3、機(jī)玻璃鼠箱中，在鼠箱側(cè)壁安裝發(fā)光二極管，分別給予大鼠白、紅、綠LED閃光刺激。每次記錄約2h，描記前經(jīng)30min暗適應(yīng)，之后依次給予白、紅、綠閃光刺激，不同色光刺激轉(zhuǎn)換之間，間歇30min，并同時(shí)經(jīng)多道生理記錄儀記錄VI區(qū)腦電波的變化。分別測(cè)定實(shí)驗(yàn)大鼠術(shù)后第5、7、9d給予白、紅、綠光刺激前后各6s時(shí)間段，大鼠在清醒和探究行為狀態(tài)時(shí)V1區(qū)皮層場(chǎng)電位的幅值和面積。2免疫組化2．1大鼠視網(wǎng)膜感光蛋白R(shí)hod-opsin和S-opsin的表達(dá)：2．1．1將成年SD大鼠麻醉，迅速取出眼球，行連續(xù)冰凍切片，對(duì)視網(wǎng)膜進(jìn)行免疫
4、熒光雙標(biāo)：一抗為鼠多克隆抗Rhod—opsin抗體(1：400)+兔單克隆抗S-opsin抗體(1：400)，二抗為FITC一羊抗鼠IgG(1：250)和TEXRED-羊抗兔IgG(1：250)2．1．2將成年SD大鼠麻醉，4％多聚甲醛心臟灌注迅速取出眼球，石蠟切片，一抗為鼠多克隆抗Rhod—opsin抗體(1：400)+兔單克隆抗S-opsin抗體(1：400)，二抗為羊抗鼠IgG(1：250)和羊抗兔IgG(1：250)。2．2大鼠初級(jí)視皮層感光蛋白S-opsin的表達(dá)：n摘要2．2．1將成年SD大鼠麻醉，斷
5、頭取腦，對(duì)初級(jí)視皮層行連續(xù)冰凍切片，免疫熒光抗體技術(shù)鑒定視皮層感光蛋白S-opsin：一抗為兔單克隆抗S-opsin抗體(1：400)，4℃孵育過(guò)夜，二抗為T(mén)EXRED-羊抗兔IgG(1：250)。2．2．2將成年SD大鼠麻醉，4％多聚甲醛心臟灌注迅速取出腦組織，石蠟切片，一為抗兔單克隆抗S-opsin抗體(1：400)，二抗為羊抗兔IgG(1：250)。3結(jié)果：3．1電生理實(shí)驗(yàn)結(jié)果3．1．1場(chǎng)電位隨不同色光刺激天數(shù)的變化：結(jié)果顯示，4次重復(fù)測(cè)量的數(shù)據(jù)之間存在高度的相關(guān)性(尺O．01)，組內(nèi)(校正值)和組間的方差
6、分析結(jié)果顯示，時(shí)間因素、色光因素以及時(shí)間與色光的交互作用均有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P(O．05)。說(shuō)明幅值和面積有隨重復(fù)刺激天數(shù)變化的趨勢(shì)，并且這種趨勢(shì)隨著色光的不同而不同。3．1．2每一實(shí)驗(yàn)日不同色光之間引起場(chǎng)電位的兩兩比較實(shí)驗(yàn)同第5天刺激前與刺激后相比較，各種色光引起初級(jí)視皮層Vl區(qū)腦電波場(chǎng)電位幅值和面積均未見(jiàn)顯著性差異；實(shí)驗(yàn)日第7天給于相同色光刺激，白、綠色光引起Vl區(qū)場(chǎng)電位的幅值和面積均顯著性強(qiáng)于刺激前(白光，尺0．01；綠光，P(O．05)，白光同時(shí)明顯強(qiáng)于紅光(P(O．05)；實(shí)驗(yàn)日第9天再次給于相同色光
7、刺激，白、綠色光引起V1區(qū)場(chǎng)電位的幅值和面積均極顯著性強(qiáng)于刺激前(P(O．01)，且白綠色光均明顯強(qiáng)于紅光(P(O．01)。紅光在各實(shí)驗(yàn)同刺激前后比較均未見(jiàn)顯著性差別。3．1．3每種色光不同實(shí)驗(yàn)日間場(chǎng)電位的兩兩比較3．1．3．1對(duì)白光分析實(shí)驗(yàn)日第7天和第9天Vl區(qū)場(chǎng)電位的的幅值和面積均顯著強(qiáng)于刺激前和第5天(第7、9天VS刺激前P(O．01，第7、9天VS第5天P(O．05)，余組間未見(jiàn)顯著性差異。3．1．3．2對(duì)綠光分析實(shí)驗(yàn)同第7天和第9天的V1區(qū)場(chǎng)電位的幅值和面積均顯著強(qiáng)于刺激前(幅值，第7天VS刺激前P(O
8、．05，第9天VS刺激前P(O．01，面積第7、9天VS刺激前P(O．01)，余組間未見(jiàn)顯著性差異。3．1．3．3對(duì)紅光分析不同實(shí)驗(yàn)日間的幅值和砸積均未見(jiàn)顯著性差異(乃O．05)。3．2免疫組化實(shí)驗(yàn)結(jié)果3．2．1大鼠視網(wǎng)膜感光蛋白R(shí)hod—opsin和S-opsin表達(dá)陽(yáng)性。摘要3．2．2大鼠初級(jí)視皮層S-opsin表達(dá)陽(yáng)性。結(jié)論：白、綠色閃光刺激能顯著增強(qiáng)大鼠初級(jí)視皮層
