資源描述：
《不同色光刺激對大鼠初級視皮層電活動的影響》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學術(shù)論文-天天文庫。
1、摘要達M—opsin，也表達UV—opsin，M-opsin幾乎在所有的哺乳動物視網(wǎng)膜中都存在，其與動物的生存、繁衍都具有密切的關(guān)系，S-opsin是決定大鼠是否具有顏色視覺的關(guān)鍵感光色素，但大鼠是否具有功能性的S-opsin還有待進一步證實，大鼠的行為學測試結(jié)果也為其可能存在一定形式的顏色視覺提供了證據(jù)，但大鼠顏色視覺的具體情況目前并不是很清楚。本實驗擬采用白色及不同單色光的刺激，探討色光刺激對大鼠視皮層腦電活動的影響以及可能的強直后增強現(xiàn)象，進一步加深對中樞神經(jīng)系統(tǒng)神經(jīng)元可塑性的認識，為進一步了解大鼠是否具有
2、顏色視覺以及單色光刺激對初級視皮層電活動的影響的機制，采用免疫組化方法研究大鼠視網(wǎng)膜視桿細胞和視錐細胞感光色素以及視皮層感光色素的表達，為腦認知的研究奠定一定的理論基礎。方法：1電生理記錄：健康成年SD大鼠10只，體重1809一---2209，雌雄不拘。水合氯醛腹腔注射麻醉，暴露顱骨，參照大鼠腦解剖圖譜定位初級視皮層V1區(qū)(前囟向后7．Om，左旁2．Omm)，分別將記錄電極置于Vl區(qū)，參考電極E1(前囟向前2．Om，右旁2．Omm)固定于額葉，牙托粉固定。于術(shù)后第5、7、9d行腦電信號采集。將已植入電極大鼠置于有
3、機玻璃鼠箱中，在鼠箱側(cè)壁安裝發(fā)光二極管，分別給予大鼠白、紅、綠LED閃光刺激。每次記錄約2h，描記前經(jīng)30min暗適應，之后依次給予白、紅、綠閃光刺激，不同色光刺激轉(zhuǎn)換之間，間歇30min，并同時經(jīng)多道生理記錄儀記錄VI區(qū)腦電波的變化。分別測定實驗大鼠術(shù)后第5、7、9d給予白、紅、綠光刺激前后各6s時間段，大鼠在清醒和探究行為狀態(tài)時V1區(qū)皮層場電位的幅值和面積。2免疫組化2．1大鼠視網(wǎng)膜感光蛋白Rhod-opsin和S-opsin的表達：2．1．1將成年SD大鼠麻醉，迅速取出眼球，行連續(xù)冰凍切片，對視網(wǎng)膜進行免疫
4、熒光雙標：一抗為鼠多克隆抗Rhod—opsin抗體(1：400)+兔單克隆抗S-opsin抗體(1：400)，二抗為FITC一羊抗鼠IgG(1：250)和TEXRED-羊抗兔IgG(1：250)2．1．2將成年SD大鼠麻醉，4％多聚甲醛心臟灌注迅速取出眼球，石蠟切片，一抗為鼠多克隆抗Rhod—opsin抗體(1：400)+兔單克隆抗S-opsin抗體(1：400)，二抗為羊抗鼠IgG(1：250)和羊抗兔IgG(1：250)。2．2大鼠初級視皮層感光蛋白S-opsin的表達：n摘要2．2．1將成年SD大鼠麻醉，斷
5、頭取腦，對初級視皮層行連續(xù)冰凍切片，免疫熒光抗體技術(shù)鑒定視皮層感光蛋白S-opsin：一抗為兔單克隆抗S-opsin抗體(1：400)，4℃孵育過夜，二抗為TEXRED-羊抗兔IgG(1：250)。2．2．2將成年SD大鼠麻醉，4％多聚甲醛心臟灌注迅速取出腦組織，石蠟切片，一為抗兔單克隆抗S-opsin抗體(1：400)，二抗為羊抗兔IgG(1：250)。3結(jié)果：3．1電生理實驗結(jié)果3．1．1場電位隨不同色光刺激天數(shù)的變化：結(jié)果顯示，4次重復測量的數(shù)據(jù)之間存在高度的相關(guān)性(尺O．01)，組內(nèi)(校正值)和組間的方差
6、分析結(jié)果顯示，時間因素、色光因素以及時間與色光的交互作用均有顯著性統(tǒng)計學意義(P(O．05)。說明幅值和面積有隨重復刺激天數(shù)變化的趨勢，并且這種趨勢隨著色光的不同而不同。3．1．2每一實驗日不同色光之間引起場電位的兩兩比較實驗同第5天刺激前與刺激后相比較，各種色光引起初級視皮層Vl區(qū)腦電波場電位幅值和面積均未見顯著性差異；實驗日第7天給于相同色光刺激，白、綠色光引起Vl區(qū)場電位的幅值和面積均顯著性強于刺激前(白光，尺0．01；綠光，P(O．05)，白光同時明顯強于紅光(P(O．05)；實驗日第9天再次給于相同色光
7、刺激，白、綠色光引起V1區(qū)場電位的幅值和面積均極顯著性強于刺激前(P(O．01)，且白綠色光均明顯強于紅光(P(O．01)。紅光在各實驗同刺激前后比較均未見顯著性差別。3．1．3每種色光不同實驗日間場電位的兩兩比較3．1．3．1對白光分析實驗日第7天和第9天Vl區(qū)場電位的的幅值和面積均顯著強于刺激前和第5天(第7、9天VS刺激前P(O．01，第7、9天VS第5天P(O．05)，余組間未見顯著性差異。3．1．3．2對綠光分析實驗同第7天和第9天的V1區(qū)場電位的幅值和面積均顯著強于刺激前(幅值，第7天VS刺激前P(O
8、．05，第9天VS刺激前P(O．01，面積第7、9天VS刺激前P(O．01)，余組間未見顯著性差異。3．1．3．3對紅光分析不同實驗日間的幅值和砸積均未見顯著性差異(乃O．05)。3．2免疫組化實驗結(jié)果3．2．1大鼠視網(wǎng)膜感光蛋白Rhod—opsin和S-opsin表達陽性。摘要3．2．2大鼠初級視皮層S-opsin表達陽性。結(jié)論：白、綠色閃光刺激能顯著增強大鼠初級視皮層
