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《枯草芽孢桿菌s-16抑制核盤菌形成活性物質(zhì)的鑒定及其相關(guān)功能基因的克隆》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)研究生學(xué)位論文獨創(chuàng)聲明本人申明所呈交的學(xué)位論文是我本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包括其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包括為獲得我?；蚱渌逃龣C(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料，與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。申請學(xué)位論文與資料若有不實之處，本人承擔(dān)一切相關(guān)責(zé)任。論文作者簽名：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)研究生學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人完全了解內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保護(hù)知識產(chǎn)權(quán)的規(guī)定，即：研究生在攻讀學(xué)位期間論文工作的知識產(chǎn)權(quán)單位屬內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)。本人保證畢
2、業(yè)離校后，發(fā)表論文或使用論文工作成果時署名單位為內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)，且導(dǎo)師為通訊作者，通訊作者單位亦署名為內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)。學(xué)校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子文檔，允許論文被查閱和借閱。學(xué)校可以公布學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容(保密內(nèi)容除外)，采用影印、縮印或其他手段保存論文。論文作者簽名：指導(dǎo)教師簽名：日期：盎～摘要向日葵菌核病是由核盤菌(Sclerotiniasclerotiorum(Lib)deBary．)侵染所引起的一種向日葵毀滅性病害。目前，抗病品種選育、農(nóng)業(yè)防治、化學(xué)防治等對該病害均無有效防治效果。因此本課題組從生物防治著手，對向日葵菌核病的防治
3、進(jìn)行了系列的研究。以課題組已分離得到的，對核盤菌(Ssclerotiorum)有顯著抑菌效果的枯草芽孢桿菌S．16為材料，對其抗茵活性物質(zhì)的理化性質(zhì)、氣體抑菌物質(zhì)的組分、不同的培養(yǎng)條件對核盤菌生長影響等進(jìn)行研究；并利用質(zhì)粒pHVl249(包含mini．TnlO)進(jìn)行電擊轉(zhuǎn)化，構(gòu)建突變子庫；同時對突變子的生物膜的形成能力進(jìn)行了研究。目的是找到抑菌物質(zhì)產(chǎn)生的相關(guān)基因，為枯草芽孢桿菌工程菌的改造提供一定的理論依據(jù)。具體研究結(jié)果如下：1．構(gòu)建了3000個突變子庫，并從中篩選到了3株喪失抑菌能力的突變子；同時也篩選到l株喪失產(chǎn)生氣體抑菌物質(zhì)的突變子；從隨機(jī)挑選的200株突變菌株中
4、找到6株喪失形成生物能力的菌株。2．抗菌活性物質(zhì)理化性質(zhì)的研究。40mL(100mL三角瓶)的裝液量，分別以葡萄糖和牛肉浸膏為碳、氮源時最有利于抑菌物質(zhì)的產(chǎn)生，同時S一16的抑菌粗提物的抑菌活性最高；抑菌物質(zhì)的熱穩(wěn)定性較高，對蛋白酶較為穩(wěn)定，較耐酸不耐堿，紫外照射處理對于抑菌活性的影響不明顯。根據(jù)以上結(jié)論，初步推斷枯草芽抱桿菌S．16的抑菌物質(zhì)的主要成分為脂肽類物質(zhì)。3．探究氣體抑菌物質(zhì)的組分。(1)1．Butanamine，N．methyl一(N—E}={基『F丁胺)、2一Hexynoicacid(乙炔酸)、3-Butenamide(正丁胺)、Cyclobutanol
5、(環(huán)丁醇)、2-Octanamine(正辛胺)和Benzothiazole，2一methyl一(2一甲基苯并噻唑)能夠完全抑制核盤菌菌絲的生長。(2)Formamide，N．ethyl．N．phenyl一(N，N一二甲基甲酰胺)、Piperazine，2-methyl一(2一甲基丙酰胺)影響菌絲正常生長，造成菌絲黃化，但是并不影響菌核形成。(3)Ethyne，fluoro一(十二烷基甲銨)和3，3一Dimethyl一4一methylamino-butan一2一one(3，3一二甲基一4一甲氨基r酮)，對核盤菌菌絲和菌核影響較小，只是造成菌絲稀疏，但是不會影響菌核的形成。
6、實驗結(jié)果表明，抑菌氣體中含有多個可以抑制核盤菌菌絲和菌核形成的成分。4．不同培養(yǎng)條件對核盤菌生長的影響。核盤菌gt長最適的培養(yǎng)基是PSA，最適的碳源、氮源分別為蔗糖和硝酸銨，在以碳酸銨為氮源培養(yǎng)的核盤菌，菌絲，li長情況較差，其培養(yǎng)條件卜．的核盤菌并不產(chǎn)生菌核原基和菌核。核盤菌的生長情況隨著培養(yǎng)基體積和含糖量的增多。偏酸‘陛條件下較有利jj-核篇‘菌茼絲的生長及蔭核的J^二￡E，其中，pH6為最適宜核盤菌，上長的pH。關(guān)鍵詞：枯草芽孢打簡S一16；抑藺物質(zhì)；mini—Tnl0：突變子；7卜物膜CloningoftheBacteriostatRelatedGeneandI
7、dentificationofAntifungalSubstancesfromBacillussubtilisSm16AbstractSunflowersclerotiniaisadevastatingdiseaseinfectedbySclerotiniasclerotiorum，atpresent，thereisnoeffectivepreventionandcontrolmeasures．Chemicalcontrol、agriculturalcontrolandmultiresistancevarietyselectivebree
