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《核盤菌蛋白激發(fā)子sscut的基因克隆、原核表達及誘導植物的多重防衛(wèi)反應》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在學術論文-天天文庫。
1、萬方數(shù)據(jù)ADissertationfortheDegreeofMasterGeneCloning，PurificationandInducingMultipleDefenseResponsesinPlantsofaNovelProteinElicitor--SsCutfrom一■．●●■』●3"clero以刀Z口SClP，移以D，．跖，咒ByWuQunSupervisedbyProf．GaoZhimouandAssociateProf．ZhangHuajianAnhuiAgriculturalUniversityHefei230036，P．R．Ch
2、inaJune，2014萬方數(shù)據(jù)萬方數(shù)據(jù)摘要核盤菌(Sclerotiniasclerotiorum(Lib．)deBary)引起的油菜菌核病是油菜上的一種重要病害。目前對于該病的防治主要采取以種植抗病品種為基礎、改進栽培管理、適時化學防治的綜合治理策略。由于生產上缺乏高抗品種，農業(yè)防治費時費工且收效甚微，化學防治又易導致環(huán)境污染、農藥殘留及抗藥性。因此，需要發(fā)展天然且環(huán)境友好型的制劑對油菜菌核病進行防治。激發(fā)子可替代化合物，誘發(fā)植物的抗病性，從而阻止或限制病害的發(fā)生和擴展。本研究根據(jù)核盤菌的全基因組數(shù)據(jù)信息，通過基因芯片信息篩選出可能誘導植物產生非
3、寄主抗性的角質酶基因。在實驗中，對核盤菌編碼角質酶的SsCut基因(GenBankAccessionNo．XM001590986．1)進行了克隆，該基因片段大小為609bp，編碼分子量為20．4kDa含有202個氨基酸的多肽，SsCut異源表達產物(His．SsCut)能夠引起煙草葉片類似過敏性壞死反應(Hypersensitiveresponse，HR)的壞死斑，同時還能引起擬南芥(Arabidopsis)、大_豆_(Glycinemax)、油菜(Brassicanapus)、水稻(Oryzasativa)、大麥(Zeamays)和小麥(Trit
4、icumaestivum)等其他雙子葉和單子葉植物葉片的壞死反應。此外，激發(fā)子His．SsCut處理后與植物抗病相關的過氧化氫、苯丙氨酸解氨酶(Phenylalanineammonialyase，PAL)，過氧化物酶(Peroxidase，POD)和多酚氧化酶(Polyphenoloxidase，PPO)也有顯著的變化。激發(fā)子His．SsCut能明顯提高植株的抗性，顯著抑制大豆疫霉(Phytophthorasojae)、煙草疫霉僻nicotianae)和核盤菌(Ssclerotiorum)在寄主上的病斑擴展。實時熒光定量PCR顯示，激發(fā)子能夠調節(jié)與
5、抗病相關基因和信號轉導相關基因的表達。本研究證明激發(fā)子His．SsCut能夠觸發(fā)植物的防衛(wèi)反應，并有助于闡明它與下游信號誘導的防衛(wèi)反應的相關性。關鍵詞：角質酶；激發(fā)子；過敏反應；植物防衛(wèi)；核盤菌萬方數(shù)據(jù)AbstractStemrotcausedbySc胞rotiniasclerotiorumISanimportantdiseaseonoilseedrape．Atpresent，wecangrowresistantvarieties，strengthenthemanagementofcultivation，andusechemicalfungicid
6、etreatmentforthepreventionandcontrolofthedisease．Butnow,biologicalcontrolCancontributetothesustainabledevelopmentofagriculture,andhasattractedmoreandmoreattentioninrecentyears．Elicitorscanriggertheplantimmunesystembyreceptormoleculesonthesurfaceofcells，notbysterilization．These
7、sreceptormoleculesCantriggersignaltransduction，aswellasexpressionofdefensegenes．TheelicitorshavemanyadvantagesoverchemicalpesticideandCanbeusedasanewtypeofmicrobeproteinpesticidetosolveagriculturalpestanddiseaseproblems．Inthisstudy,wereportthecloningoftheSsCutgene(GenBankAcces
8、sionNo．XM一001590986．1)encodingcutinasefromSclerotiniascleroti
