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《復發(fā)的視神經脊髓炎患者外周血單個核細胞bcl-2基因的表達》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在學術論文-天天文庫。
1、天津醫(yī)科大學碩士學位論文復發(fā)的視神經脊髓炎患者外周血單個核細胞Bcl-2基因的表達姓名：郭筱菲申請學位級別：碩士專業(yè)：神經病學指導教師：周廣喜20090501天津醫(yī)科大學碩士學位論文中文摘要目的1．探討視神經脊髓炎(Ne嘲nvditisoptica，NMO)患者外周血單個核細胞(peripheralbloodmonocxwyoncell，PBMC)Bel-2基因的表達水平與此疾病復發(fā)之間的相關性；2．進一步探討視神經脊髓炎患者復發(fā)的時限與患者外周血單個核細胞Bc]02基因表達水平之間的相關性。方法1．選擇確診的視神經脊髓炎患者25例，分為復發(fā)組及未復發(fā)組。其中復發(fā)組14例，未復發(fā)組11例。2
2、．分別取復發(fā)組和未復發(fā)組患者的新鮮外周靜脈血5ml，應用FicOll密度．梯度離心法分離其外周血單個核細胞。3．以分離后的外周血單個核細胞為材料，應用TRIzol法提取細胞內的mRNA。4．以提取的mRNA為模板，應用兩步法反轉錄．聚合酶鏈反應(reversetranscription·PCR，RT-PCR)技術，首先將mRNA反轉錄為cDNA，繼而以cDNA為模板，以Bcl-2為目的基因及GAPDH為內參對照，分別經其引物擴增。5．擴增后產物經嗅化乙啶(Ethidiumbromide，EB)染色，1％瓊脂糖凝膠電泳后觀察，應用凝膠成像分析儀攝片。6．以同一樣本Bd．2基因與GAPDH基因的
3、灰度比作為統計數據，主要應用QUANTITYONE軟件處理試驗圖片得出數據，經GENETOOLS軟件驗證性處理圖片得出數據，并選擇適當的統計學方法，應用SPSS軟件對所得數據進行統計學分析。爭士里：口木1．復發(fā)組與未復發(fā)組患者的一般資料比較，其年齡差異(t--o．216，P>0．05)、性別差異(X2=0．365，P>0．05)、發(fā)病次數差異艫：o．275，P>0．05)均無統計學意義。2．復發(fā)組與未復發(fā)組患者外周血單個核細胞Bd-2基因表達水平之間的差異有顯著統計學意義0=6．096，P6天組
4、別，各組間患者外周血單個核細胞Bcl．2基因表達水平之間的差異有顯著統計學意義(F=70．880，P6天組)的患者Bcl-2基因表達水平之間的差異均有顯著統計學意義(均P0．05)；但與邳天組相比則差距有顯著統計學意義(忙5．085，Po．05)。5．分別應用QUANTITYONE及GENETOOL
5、S軟件處理試驗圖片。處理后所得數據經SPSS軟件進行分析后得到相同的統計學結果。以上所有結果以QUANTITYONE軟件處理的數據為例進行說明。結論1．視神經脊髓炎患者復發(fā)時可檢測到外周血單個核細胞Bcl-2基因較未復發(fā)患者表達增強，可以認為視神經脊髓炎的復發(fā)與患者外周血單個核細胞Bcl-2基因的表達水平具有相關性。2。視神經脊髓炎患者復發(fā)時外周血單個核細胞Bcl-2基因表達增強的程度與發(fā)病時限存在相關性。其增強程度在發(fā)病初期更為明顯，隨著發(fā)病時間的延長而呈現逐漸減弱趨勢。關鍵詞：視神經脊髓炎復發(fā)Bcl=2凋亡免疫RT-PCRⅡ天津醫(yī)科大學碩士學位論文AbstractObjective1．T
6、oapproachtheexpressionofBcl-2geneinperipheralbloodmononuclearcdls(PBMC)ofpatients、以廿lNenromyelitisoptica(NMO)andthecorrelationbetweenBcl·2geneexpressionandrelapseofthedisease：2．Toapproachthecon'elationbctwcerltheexpressionofBcl一2geneandtherelapsingtime．Methods1．Tosek冠-t25OaSesofdefiniteNMOpatients，
7、anddividedinto2groups：14casesinrelapsedgroupand1casesatrestinremittinggroup．2．The5mlbloodsampleswereusedtoseparatePBMCbydensity-gradientcentrifugationmethodforallpatients．3．ItWasusedbyTRIzolmethodtoextractm
