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《血小板蛋白酶活化受體-1激活后下調(diào)結(jié)腸癌細(xì)胞mir-200b的表達(dá)》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)位論文使用授權(quán)及知識產(chǎn)權(quán)歸屬承諾本學(xué)位論文在導(dǎo)師(或指導(dǎo)小組)的指導(dǎo)下，由本人獨(dú)立完成。本學(xué)位論文研究所獲得的研究成果，其知識產(chǎn)權(quán)歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。河北醫(yī)科大學(xué)有權(quán)對本學(xué)位論文進(jìn)行交流、公開和使用。凡發(fā)表與學(xué)位論文主要內(nèi)容相關(guān)的論文，第一署名為單位河北醫(yī)科大學(xué)，申報(bào)的專利等知識產(chǎn)權(quán)均歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。否研究生簽師簽章：參浮二級學(xué)院河北醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本論文是在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝等內(nèi)容外，文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫的研究成果，指導(dǎo)教師對此進(jìn)行了審定。本論文由本人獨(dú)立撰寫，文責(zé)自負(fù)。
2、研究生簽名導(dǎo)師簽章．番蓐Qjl9年月日目錄中文摘要??????????????????????????1英文摘要??????????????????????????4研究論文血小板蛋白酶活化受體．1激活后下調(diào)結(jié)腸癌細(xì)胞miR-200b的表達(dá)前言??????????????????????????8剛舌??????????????????????????芍材料與方法???????????????????????9結(jié)果??????????????????????????18附圖??????????????????????????20附表?????????????????
3、?????????24討論??????????????????????????25結(jié)論??????????????????????????29參考文獻(xiàn)????????????????????????29綜述微小RNA和腫瘤的研究進(jìn)展?????????????34致謝????????????????????????????49個(gè)人簡歷??????????????????????????50中文摘要IIllIIIlUIIJIlIJIIIIIIIl血小板蛋白酶活化受體．1激活后下調(diào)結(jié)腸癌箋旦跚j；18J表達(dá)摘要目的3結(jié)直腸癌是人類常見的惡性腫瘤之一，據(jù)全球癌癥統(tǒng)計(jì)，其死亡
4、率在惡性腫瘤中排第四位。在我國，結(jié)直腸癌的發(fā)病率和死亡率呈逐年增高趨勢。轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤致死的主要原因。結(jié)直腸癌是一類上皮來源的惡性腫瘤。越來越多的研究顯示，上皮．間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymaltransition，聊胛)是上皮來源腫瘤轉(zhuǎn)移的首要步驟。微小RNA是一類近十年來備受關(guān)注的廣泛存在于真核生物及病毒中的非編碼小分子RNA，其大小約22個(gè)核苷酸。成熟的微小RNA通過與靶mRNA的3’端非編碼區(qū)完全或不完全互補(bǔ)結(jié)合，在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控基因的表達(dá)，調(diào)控細(xì)胞的多種生物學(xué)行為，與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。而miR-200家族是一類重要的上皮．間質(zhì)轉(zhuǎn)
5、化(EMT)調(diào)控因子，TGF．131和ZEBl／2是其蕈要的靶基因。臨床上發(fā)現(xiàn)，晚期結(jié)直腸癌患者往往合并血小板增多癥。早期研究發(fā)現(xiàn)，血小板也能促進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移。最新研究顯示，血小板通過TGF—B1途徑參與了EMT的發(fā)生。眾所周知，血小板a顆粒富含TGF．B1，而PARl是人血小板表面的一種蛋白酶活化受體，血小板PARl激活后Q顆?？赡茚尫糯罅考?xì)胞因子(如TGF．p1)影響腫瘤血管生成和轉(zhuǎn)移。血小板和miR-200家族均可通過TGF．B1途徑影響腫瘤的轉(zhuǎn)移。而它們兩者在調(diào)控腫瘤轉(zhuǎn)移過程中是否存在關(guān)聯(lián)在國內(nèi)外罕有報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)采用熒光實(shí)時(shí)定量PCR、MTT、ELISA等方法探
6、討血小板蛋白酶活化受體．1以PARl激動(dòng)劑(訊．I『R-NH2)激活后對SW620細(xì)胞miR-200b表達(dá)水平的影響，旨在為結(jié)直腸痛治療提供新的依據(jù)。方法：1以不同濃度(1uM、3uM、5LlM、7uM、9uM、30aM)的PARl激動(dòng)劑(訊．I瓜凇)處理SW620，同時(shí)設(shè)定空白對照組(單純加細(xì)胞培養(yǎng)液)，在溫箱中孵育24h后，采用MTT法槍測各組細(xì)胞，比較各中文摘要厶日翻可昂白{I萌霸}下h臺匕6h爿畏，pjl且；m再啦■iZ巨哆a霸匕稿=JX‘rLo2應(yīng)用ELISA法對不同濃度(1pM、3pM、5pM、7pM、9pM)PARl激動(dòng)痢(TFLLR-NH2)激活的血
7、小板上清的TGF．pl迸行定量分析。3以3州濃度的PARl激動(dòng)劑(TFLLR-NH2)激活人血小板后，提取血小板上清，設(shè)定4個(gè)處理組，分別取不同體積量(60p1、120lal、240ttl、480u1)的血小板上清處理6孔板中的SW620細(xì)胞，同時(shí)設(shè)定空白對照組及單純激動(dòng)劑組，空白對照組單純加細(xì)胞培養(yǎng)液，單純激動(dòng)劑組加入0．72ttMPARl激動(dòng)劑。存渝箱中分別孵育24h及48h后，利用TRIZOL法提取總RNA，反轉(zhuǎn)錄合成eDNA，采用基于2(．AACt)的實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR法對各組miR-200b的表達(dá)水平進(jìn)行定量分析。結(jié)果：1MTT結(jié)果顯示，小劑量各
