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《血小板蛋白酶活化受體-1激活后下調(diào)結(jié)腸癌細胞mir-200b的表達》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在學術論文-天天文庫。
1、河北醫(yī)科大學學位論文使用授權及知識產(chǎn)權歸屬承諾本學位論文在導師(或指導小組)的指導下，由本人獨立完成。本學位論文研究所獲得的研究成果，其知識產(chǎn)權歸河北醫(yī)科大學所有。河北醫(yī)科大學有權對本學位論文進行交流、公開和使用。凡發(fā)表與學位論文主要內(nèi)容相關的論文，第一署名為單位河北醫(yī)科大學，申報的專利等知識產(chǎn)權均歸河北醫(yī)科大學所有。否研究生簽師簽章：參浮二級學院河北醫(yī)科大學研究生學位論文獨創(chuàng)性聲明本論文是在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特別加以標注和致謝等內(nèi)容外，文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫的研究成果，指導教師對此進行了審定。本論文由本人獨立撰寫，文責自負。
2、研究生簽名導師簽章．番蓐Qjl9年月日目錄中文摘要??????????????????????????1英文摘要??????????????????????????4研究論文血小板蛋白酶活化受體．1激活后下調(diào)結(jié)腸癌細胞miR-200b的表達前言??????????????????????????8剛舌??????????????????????????芍材料與方法???????????????????????9結(jié)果??????????????????????????18附圖??????????????????????????20附表?????????????????
3、?????????24討論??????????????????????????25結(jié)論??????????????????????????29參考文獻????????????????????????29綜述微小RNA和腫瘤的研究進展?????????????34致謝????????????????????????????49個人簡歷??????????????????????????50中文摘要IIllIIIlUIIJIlIJIIIIIIIl血小板蛋白酶活化受體．1激活后下調(diào)結(jié)腸癌箋旦跚j；18J表達摘要目的3結(jié)直腸癌是人類常見的惡性腫瘤之一，據(jù)全球癌癥統(tǒng)計，其死亡
4、率在惡性腫瘤中排第四位。在我國，結(jié)直腸癌的發(fā)病率和死亡率呈逐年增高趨勢。轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤致死的主要原因。結(jié)直腸癌是一類上皮來源的惡性腫瘤。越來越多的研究顯示，上皮．間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymaltransition，聊胛)是上皮來源腫瘤轉(zhuǎn)移的首要步驟。微小RNA是一類近十年來備受關注的廣泛存在于真核生物及病毒中的非編碼小分子RNA，其大小約22個核苷酸。成熟的微小RNA通過與靶mRNA的3’端非編碼區(qū)完全或不完全互補結(jié)合，在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控基因的表達，調(diào)控細胞的多種生物學行為，與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關。而miR-200家族是一類重要的上皮．間質(zhì)轉(zhuǎn)
5、化(EMT)調(diào)控因子，TGF．131和ZEBl／2是其蕈要的靶基因。臨床上發(fā)現(xiàn)，晚期結(jié)直腸癌患者往往合并血小板增多癥。早期研究發(fā)現(xiàn)，血小板也能促進腫瘤轉(zhuǎn)移。最新研究顯示，血小板通過TGF—B1途徑參與了EMT的發(fā)生。眾所周知，血小板a顆粒富含TGF．B1，而PARl是人血小板表面的一種蛋白酶活化受體，血小板PARl激活后Q顆?？赡茚尫糯罅考毎蜃?如TGF．p1)影響腫瘤血管生成和轉(zhuǎn)移。血小板和miR-200家族均可通過TGF．B1途徑影響腫瘤的轉(zhuǎn)移。而它們兩者在調(diào)控腫瘤轉(zhuǎn)移過程中是否存在關聯(lián)在國內(nèi)外罕有報道。本實驗采用熒光實時定量PCR、MTT、ELISA等方法探
6、討血小板蛋白酶活化受體．1以PARl激動劑(訊．I『R-NH2)激活后對SW620細胞miR-200b表達水平的影響，旨在為結(jié)直腸痛治療提供新的依據(jù)。方法：1以不同濃度(1uM、3uM、5LlM、7uM、9uM、30aM)的PARl激動劑(訊．I瓜凇)處理SW620，同時設定空白對照組(單純加細胞培養(yǎng)液)，在溫箱中孵育24h后，采用MTT法槍測各組細胞，比較各中文摘要厶日翻可昂白{I萌霸}下h臺匕6h爿畏，pjl且；m再啦■iZ巨哆a霸匕稿=JX‘rLo2應用ELISA法對不同濃度(1pM、3pM、5pM、7pM、9pM)PARl激動痢(TFLLR-NH2)激活的血
7、小板上清的TGF．pl迸行定量分析。3以3州濃度的PARl激動劑(TFLLR-NH2)激活人血小板后，提取血小板上清，設定4個處理組，分別取不同體積量(60p1、120lal、240ttl、480u1)的血小板上清處理6孔板中的SW620細胞，同時設定空白對照組及單純激動劑組，空白對照組單純加細胞培養(yǎng)液，單純激動劑組加入0．72ttMPARl激動劑。存渝箱中分別孵育24h及48h后，利用TRIZOL法提取總RNA，反轉(zhuǎn)錄合成eDNA，采用基于2(．AACt)的實時熒光定量RT-PCR法對各組miR-200b的表達水平進行定量分析。結(jié)果：1MTT結(jié)果顯示，小劑量各
