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《血小板蛋白酶激活受體-1激活在誘導(dǎo)結(jié)腸癌細胞sw620細胞上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化的作用和機制》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
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2、加以標(biāo)注和致謝等內(nèi)容外,文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫的研究成果,指導(dǎo)教師對此進行了審定。本論文由本人獨立撰寫,文責(zé)自負(fù)。研究生簽名:五,,.夠復(fù)、導(dǎo)師簽章名污刎z>¨月1日目錄中文摘要???????????????????????????1英文摘要???????????????????????????4研究論文血小板蛋白酶激活受體一l激活在誘導(dǎo)結(jié)腸癌細胞SW620細胞上皮一間質(zhì)轉(zhuǎn)化的作用和機制前言???????????????????????????1/日U舌???????????????????????????材料與方法??????
3、??????????????????8結(jié)果??????????????????????????‘l8附圖??????????????????????????。20討論???????????··??????????????一28結(jié)論??????????????????????????‘31參考文獻??????????·??????????????31綜述血小板在腫瘤進展中的作用??????????????35致謝????????????????????????????。51個人簡歷??????????????????????????。52
4、中文摘要血小板蛋白酶激活受體一1激活在誘導(dǎo)結(jié)腸癌細胞SW620細胞上皮一問質(zhì)轉(zhuǎn)化的作用和機制摘要結(jié)直腸癌是一種常見的惡性腫瘤,而區(qū)域淋巴結(jié)或遠處轉(zhuǎn)移常導(dǎo)致治療失敗。腫瘤細胞發(fā)生上皮一間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelialmesenchymaltransition,EMT)是進入血管、淋巴管轉(zhuǎn)移的首要步驟。誘導(dǎo)EMT的細胞因子和轉(zhuǎn)錄因子有Snail、Twist、TGF—p、Tiaml等。其中,TGF—p是EMT最主要的誘導(dǎo)因子之一。與腫瘤轉(zhuǎn)移的關(guān)系最為密切。近年來,血小板與腫瘤進展的關(guān)系引人注目。血小板表面蛋白激活受體(Proteinase.a(chǎn)c
5、tivatedreceptor,PAR-1)活化后可激活Q顆粒,在腫瘤進展過程中有著非常重要的意義。但目前尚不清楚血小板PARl激活是否誘導(dǎo)結(jié)直腸癌EMT。目的:探討血小板蛋白酶激活受體.1激活在結(jié)腸癌細胞SW620細胞上皮一間質(zhì)轉(zhuǎn)化中的作用并探討其機制。方法:l用梯度濃度(09M,1¨M,3pM,59M,7“M,9pM,101xM)的血小板PARl激動劑(TFLLR-NH2)處理SW620細胞,用MTT法檢測SW620細胞的增殖情況。用梯度濃度(0pM,1}lM,3pM,5jaM,79M,99M)的血小板PARl激動劑(盯UR-NH2
6、)激活血小板,用流式細胞學(xué)技術(shù)檢測血小板表面的CD62P來判斷血小板的活化程度。2實驗分組:①未激活血小板懸液100/.tL+SW620細胞(實驗對照組)②激活血小板懸液100肛L+SW620細胞(實驗對照組)③激活血小板上清100}tL+SW620細胞(實驗組)@TGF.B129L+SW620細胞(陽性對照組)⑤TFLLR-NH2O.04}tL+SW620細胞(單純激動劑組)⑥培養(yǎng)基100}tL+SW620細胞(陰性對照組)。按照實驗分組,24孔板培養(yǎng)24小時后PathScan%MTDuplexIFKit染色,激光共聚焦顯微鏡下觀察S
7、W620細胞E。cadherin、Vimentin表達情況。3實驗分組:①未激活血小板懸液400/aL+SW620細胞(實驗對照組)②激活血小板懸液400p.L+SW620細胞(實驗對照組)③激活血小板上清中文摘要4001上L+SW620細胞(實驗組)④TGF.B120I.tL+SW620細胞(陽性對照)⑤TFLLR-NH20.49L+SW620細胞(單純激動劑組)⑥培養(yǎng)基400/aL+SW620細胞(陰性對照)。按照實驗分組,6孔板培養(yǎng)24小時后westemblot檢測SW620細胞E.ca曲erin、Vimentin、Smad4的表
8、達。4ELISA法(酶聯(lián)免疫吸附實驗法)檢測梯度濃度(0l-tM,1腳,39M,5“M,7p.M,99M)的PARl激動劑(TFLLR-NH2)激活血小板后TGF—B1釋放量。結(jié)果:1MTT實驗:各個不同濃