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《血小板蛋白酶活化受體-1激活后對結(jié)腸癌細胞hct-116的趨化作用》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學術(shù)論文-天天文庫。
1、河北醫(yī)科大學學位論文使用授權(quán)及知識產(chǎn)權(quán)歸屬承諾本學位論文在導師(或指導小組)的指導下,由本人獨立完成。本學位論文研究所獲得的研究成果,其知識產(chǎn)權(quán)歸河北醫(yī)科大學所有。河北醫(yī)科大學有權(quán)對本學位論文進行交流、公開和使用。凡發(fā)表與學位論文主要內(nèi)容相關(guān)的論文,第一署名為單位河北醫(yī)科大學,試驗材料、原始數(shù)據(jù)、申報的專利等知識產(chǎn)權(quán)均歸河北醫(yī)科大學所有。否則,承擔相應法律責任。麓·研究生簽名:苗·砼鹼導師簽章季妯If乞二級學院領(lǐng)導蓋章:u1年月日河北醫(yī)科大學研究生學位論文獨創(chuàng)性聲明本論文是在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果,除了文中特別加以標注和致謝等內(nèi)容外,文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫的研究
2、成果,指導教師對此進行了審定。本論文由本人獨立撰寫,文責自負。研究生簽名:菡砼鹼曰象月形多年章簽師導目錄㈣㈥qIMIIlllllllllllY2337267中文摘要???????????????????????????l英文摘要???????????????????????????3研究論文血小板蛋白酶活化受體.1激活后對結(jié)腸癌細胞HCT-116的趨化作用前言??????????????????????????一5刖舌??????????????????????????一材料與方法???????????????????????一6結(jié)果??????????????????????????·
3、12附圖??????????????????????????·15討論??????????????????????????·19結(jié)論??????????????????????????·22參考文獻????????????????????????·22綜述CXCLl2/CXCR4/CXCR7趨化軸在腫瘤進展中的作用???一26致謝????????????????????????????·40個人簡歷??????????????????????????·41中文摘要血小板蛋白酶活化受體.1激活后對結(jié)腸癌細胞ItCT.116的趨化作用摘要目的:觀察血小板PARl激活后對結(jié)腸癌細胞HCT-11
4、6的趨化作用。方法:1以梯度濃度PARl激動劑TFLLR-Ntt2(1gM、3出、5釁、79M、9btM、11州、13州、lSgM、171xM、19bdVl)作用于結(jié)腸癌細胞HCT.116,同時設(shè)定空白對照組(加入10%胎牛血清培養(yǎng)基)。24h后,用MTT細胞增殖法檢測TFLLR-NH2對細胞增殖的影響,以初篩TFLLR-NH2濃度使用范圍。2以梯度濃度TFLLR-NH2(O.5出、lgM、3州、10出、30rtM)激活血小板后采用流式細胞術(shù)檢測血小板表面CD62P表達水平。對照組為靜息血小板。3選擇梯度濃度PARl激動劑TFLLR-NH2(1gM、3州、5州、79M、9/aM)激活血小
5、板,應用Transwell趨化實驗,觀察激活后的血小板上清液對結(jié)腸癌細胞HCT.116的趨化作用,同時設(shè)定空白對照組及PARl未激活的血小板上清液組。同時為了排除激動劑對腫瘤細胞PARl的激活,設(shè)置單純激動劑組觀察是否對腫瘤細胞趨化有影響。4選用79lVlTFLLR-NH2激活血小板,取其上清液作用于結(jié)腸癌細胞HCT-116,同時設(shè)定空白對照組,空白對照組只加10%胎牛血清培養(yǎng)基。在培養(yǎng)箱中孵育24h后,應用流式細胞術(shù)檢測HCT.116細胞表面CXCR4表達情況。結(jié)果:l在MTT細胞增殖實驗中l(wèi)glVl.179lVlTFLLR-NH2對HCT-116細胞的增殖都沒有影響,各組所得OD值與
6、空白對照組OD值相比,其差異均無統(tǒng)計學意義(尸>O.05)。而199MTFLLR-N-H2激動劑組的OD值較空白對照組升高(O.682--k0.014VS0.6474-0.291,P<0.05)。據(jù)此,初步限定了PARl激動劑TFLLR-NH2的使用濃度應小于19rayl。2分別用0.51*M、lgM、3出、10腳、30州TFLLR-NH2激活血小中文摘要板PARl后采用流式細胞術(shù)檢測血小板表面CD62P陽性表達率,依次為(33.82士17.96)%、(39.64+19.53)%、(60.99+12.42)%、(55.78+10.49)%、(57.58+11.77)%,明顯高于未加激動劑
7、的對照組(14.97+6.28)%,尸