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《血小板蛋白酶活化受體-1激活后對結(jié)腸癌細(xì)胞hct-116的趨化作用》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)位論文使用授權(quán)及知識產(chǎn)權(quán)歸屬承諾本學(xué)位論文在導(dǎo)師(或指導(dǎo)小組)的指導(dǎo)下,由本人獨立完成。本學(xué)位論文研究所獲得的研究成果,其知識產(chǎn)權(quán)歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。河北醫(yī)科大學(xué)有權(quán)對本學(xué)位論文進(jìn)行交流、公開和使用。凡發(fā)表與學(xué)位論文主要內(nèi)容相關(guān)的論文,第一署名為單位河北醫(yī)科大學(xué),試驗材料、原始數(shù)據(jù)、申報的專利等知識產(chǎn)權(quán)均歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。否則,承擔(dān)相應(yīng)法律責(zé)任。麓·研究生簽名:苗·砼鹼導(dǎo)師簽章季妯If乞二級學(xué)院領(lǐng)導(dǎo)蓋章:u1年月日河北醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文獨創(chuàng)性聲明本論文是在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果,除了文中特別加以標(biāo)注和致謝等內(nèi)容外,文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫的研究
2、成果,指導(dǎo)教師對此進(jìn)行了審定。本論文由本人獨立撰寫,文責(zé)自負(fù)。研究生簽名:菡砼鹼曰象月形多年章簽師導(dǎo)目錄㈣㈥qIMIIlllllllllllY2337267中文摘要???????????????????????????l英文摘要???????????????????????????3研究論文血小板蛋白酶活化受體.1激活后對結(jié)腸癌細(xì)胞HCT-116的趨化作用前言??????????????????????????一5刖舌??????????????????????????一材料與方法???????????????????????一6結(jié)果??????????????????????????·
3、12附圖??????????????????????????·15討論??????????????????????????·19結(jié)論??????????????????????????·22參考文獻(xiàn)????????????????????????·22綜述CXCLl2/CXCR4/CXCR7趨化軸在腫瘤進(jìn)展中的作用???一26致謝????????????????????????????·40個人簡歷??????????????????????????·41中文摘要血小板蛋白酶活化受體.1激活后對結(jié)腸癌細(xì)胞ItCT.116的趨化作用摘要目的:觀察血小板PARl激活后對結(jié)腸癌細(xì)胞HCT-11
4、6的趨化作用。方法:1以梯度濃度PARl激動劑TFLLR-Ntt2(1gM、3出、5釁、79M、9btM、11州、13州、lSgM、171xM、19bdVl)作用于結(jié)腸癌細(xì)胞HCT.116,同時設(shè)定空白對照組(加入10%胎牛血清培養(yǎng)基)。24h后,用MTT細(xì)胞增殖法檢測TFLLR-NH2對細(xì)胞增殖的影響,以初篩TFLLR-NH2濃度使用范圍。2以梯度濃度TFLLR-NH2(O.5出、lgM、3州、10出、30rtM)激活血小板后采用流式細(xì)胞術(shù)檢測血小板表面CD62P表達(dá)水平。對照組為靜息血小板。3選擇梯度濃度PARl激動劑TFLLR-NH2(1gM、3州、5州、79M、9/aM)激活血小
5、板,應(yīng)用Transwell趨化實驗,觀察激活后的血小板上清液對結(jié)腸癌細(xì)胞HCT.116的趨化作用,同時設(shè)定空白對照組及PARl未激活的血小板上清液組。同時為了排除激動劑對腫瘤細(xì)胞PARl的激活,設(shè)置單純激動劑組觀察是否對腫瘤細(xì)胞趨化有影響。4選用79lVlTFLLR-NH2激活血小板,取其上清液作用于結(jié)腸癌細(xì)胞HCT-116,同時設(shè)定空白對照組,空白對照組只加10%胎牛血清培養(yǎng)基。在培養(yǎng)箱中孵育24h后,應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測HCT.116細(xì)胞表面CXCR4表達(dá)情況。結(jié)果:l在MTT細(xì)胞增殖實驗中l(wèi)glVl.179lVlTFLLR-NH2對HCT-116細(xì)胞的增殖都沒有影響,各組所得OD值與
6、空白對照組OD值相比,其差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(尸>O.05)。而199MTFLLR-N-H2激動劑組的OD值較空白對照組升高(O.682--k0.014VS0.6474-0.291,P<0.05)。據(jù)此,初步限定了PARl激動劑TFLLR-NH2的使用濃度應(yīng)小于19rayl。2分別用0.51*M、lgM、3出、10腳、30州TFLLR-NH2激活血小中文摘要板PARl后采用流式細(xì)胞術(shù)檢測血小板表面CD62P陽性表達(dá)率,依次為(33.82士17.96)%、(39.64+19.53)%、(60.99+12.42)%、(55.78+10.49)%、(57.58+11.77)%,明顯高于未加激動劑
7、的對照組(14.97+6.28)%,尸