基于糜子轉(zhuǎn)錄組的nced基因克隆及干旱脅迫下的表達(dá)分析

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1、?分類(lèi)號(hào).S516學(xué)號(hào)誦063'?巧輔賴(lài)則;如苗:遲護(hù)、巧襲素丈聲全日制碩zb學(xué)位論文基于糜子轉(zhuǎn)錄組的/1/化》基因克?。崳娂案珊得{迫下的表達(dá)分析姓名:楊陽(yáng).指導(dǎo)教師;王瑞云副教授學(xué)科專(zhuān)業(yè)、:植物學(xué)培養(yǎng)單位;農(nóng)學(xué)院’‘巧’:蘭;驗(yàn)?;:叫\1'V1>斗片強(qiáng)〇^^告4較駕竄藝1賽轟《誇冢轅鷄費(fèi)-'<竄印每辜呈:i:/苦號(hào)與;;小;節(jié):錯(cuò)晉麗議讚讓鑽;叫看:詔:轉(zhuǎn)著;誦中園,山西.太谷^L;■.■ ̄-川二0五年六月;扇:>;;:.:::,;:;::::;::一""’.?i

2、:??--^’■'■:r:VJ::‘1.,;ShanxiAriculturalUniversitgyFu-lltimeMasterDereeDissertationg-ANCEDgenecloninbasedonRNASeqinrosomilletgpPanicummiliaceumL.andexressionanalsisunder()pydrouhtstressgName:YanYanggSupervisor:AssociateProf.

3、RuiunWanygMaor;BotanjyTraininit:ColleeofAriculturegunggTaiuShanxiChinag化ne.2015學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明:所提交的學(xué)位論文,是在導(dǎo)師指導(dǎo)下,獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中6>注明引用的內(nèi)容外,本論文不包含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的作品成果。對(duì)本文研究做出過(guò)重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體,均已在文中切明確方式標(biāo)明。本人完全意識(shí)到本聲明的法律后果由本人7衣?lián)#崳娮髡吆炦`(親筆):A年《月,戶(hù)日捉p學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書(shū)?,本學(xué)位

4、論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定。即學(xué)位論文的知識(shí)產(chǎn)權(quán)屬山西農(nóng)業(yè)大學(xué);同意學(xué)校保留并向國(guó)家有關(guān)*口或機(jī)構(gòu)送交論文的原件部、復(fù)印件和電子版允許論文被查閱和借;閱;本人授權(quán)山西農(nóng)業(yè)大學(xué)可將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)巧檢索'〔,可從采用影印、縮印或擔(dān)描等復(fù)制手段保存、;編學(xué)位論文。作者簽為(親筆):奮M心長(zhǎng)年i月作日谷月導(dǎo)師簽違(親筆):日本研究論文由國(guó)家自然科學(xué)基金(31271791)提供資助ThisworkwassupportedbytheNationalNaturalScienceFoundati

5、onofChina31271791()目錄摘要1一第胃前胃313.1引胃1.2糜子概述3134.糜子抗旱硏究現(xiàn)狀)14.4功能基因iVC邸的研究進(jìn)展1.5論文選題及研究意文6第二章干旱脅迫下糜子H葉期葉片的解剖結(jié)構(gòu)828.1材料與方法2丄1材料82丄2方法82.2結(jié)果和分析102.3艦10第H章基于轉(zhuǎn)錄組的糜子AmM:思)基因的克?。墸保玻崳姡常壙冢崳姡辈牧吓c方法3丄1材料123丄2糜子葉片總RNA的提取口3丄3糜子葉片總RNA完整性及純度檢測(cè)13一3丄4cDNA-PCR第鏈的合

6、成及RT133丄5目的基因的PCR擴(kuò)増133丄6PC民產(chǎn)物的回收和純化143丄7DNA片段的連接反應(yīng)143丄8轉(zhuǎn)化及培養(yǎng)1513丄9菌落PCR及PCR產(chǎn)物的瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)5)3丄1016JVC邸基因及其編碼蛋白質(zhì)的分析36.2結(jié)果與分析13.2.1NCED目的基因的獲得163PCR17.2.2iVC£公目的基因的克隆及菌落鑒定3.2.3M:正公基因序列分析1732.4M:說(shuō))基因的18.糜子氨基酸序列、蛋白結(jié)構(gòu)及分子進(jìn)化樹(shù)分析321.3職第四章干旱脅迫下糜子戶(hù)wM:巧)基因的表達(dá)分析224.

7、1材辭與方法224丄1材料224丄2不同干旱脅迫時(shí)間cDNA樣品的制備234.1.3巧niVC拉)基因的實(shí)時(shí)萊光定量234丄4干旱脅迫下糜子H葉期葉片可溶性糖含量的測(cè)定244丄5干旱脅迫下糜子H葉期葉片脯氨酸含量的測(cè)定254丄6干旱脅迫下糜子H葉期葉片相對(duì)含水量的測(cè)定254丄7干旱脅迫下糜子H葉期MDA含量的測(cè)定264.2結(jié)果分析264.2.1干旱脅迫下糜

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