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《病原體誘導(dǎo)前后家蠅幼蟲差異基因的表達及表達產(chǎn)物活性研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、分類號：S859.7單位代碼：10193密級：無學(xué)號：2012601碩士學(xué)位論文病原體誘導(dǎo)前后家蠅幼蟲差異基因的表達及表達產(chǎn)物活性研究TheexpressionandactivityofdifferentexpressedgenesofMuscadomesticalarvaebeforeandafterstimulatedwithpathogens作者姓名：邵清學(xué)位類別：農(nóng)學(xué)碩士專業(yè)名稱：基礎(chǔ)獸醫(yī)學(xué)研究方向：動物藥理與毒理指導(dǎo)教師：馬紅霞教授所在學(xué)院：動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院2015年5月項目來源國家自然科學(xué)基金資助項目（No.31140026;30940055）Granted
2、byNationalNatureFund（No.31140026;30940055）吉林省世行貸款農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全項目（No.2011-Y05）ProjectFundonagriculturalproductsqualityandsafetyfromWorldBankLoanofJilinProvince（No.2011-Y05）教育部新世紀優(yōu)秀人才計劃項目（No.CET-10-0174）NewCenturyExcellentTalentsProjectFundofeducationministryin2010（No.CET-10-0174）吉林省科技發(fā)展計劃項目（No.
3、20111820;20120229）ScienceandTechnologyDevelopmentProjectFundofJilinProvince（No.20111820;20120229）獨創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下，獨立進行研究所取得的成果。盡我所知，除文中特別加以標注和致謝所列內(nèi)容外，論文中不包含其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)或其它教育機構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。本學(xué)位論文所有內(nèi)容若有不實之處，本人愿意承擔(dān)一切
4、相關(guān)法律責(zé)任和后果。學(xué)位論文作者簽名：簽字日期：年月日關(guān)于論文使用授權(quán)的聲明1、本人完全了解吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留和使用學(xué)位論文的規(guī)定，即：研究生在校攻讀學(xué)位期間所完成的論文及相關(guān)成果的知識產(chǎn)權(quán)屬吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)所有，并同意將本論文的版權(quán)授權(quán)給吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)，學(xué)校有權(quán)保留送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。2、本人（同意/不同意，務(wù)必打印后填寫）吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)將本論文版權(quán)授權(quán)給不同媒體進行電子出版、多媒體出版、網(wǎng)絡(luò)出版以及其他形式出版（涉密學(xué)位論文解密后應(yīng)遵守此協(xié)議）。3、本人聲明畢業(yè)后若發(fā)表在攻讀研究生學(xué)位期間完成
5、的論文及相關(guān)的學(xué)術(shù)成果，必須以吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)作為第一署名單位。學(xué)位論文作者簽名：簽字日期：年月日導(dǎo)師簽名：簽字日期：年月日摘要家蠅幼蟲長期生活在潮濕、富含有機質(zhì)的環(huán)境中，常攜帶大量的病原體和有害因子，但本身卻很少發(fā)病。據(jù)研究人員預(yù)測，家蠅幼蟲獨特的免疫防御能力源于其體內(nèi)產(chǎn)生的抗病活性物質(zhì)。這些抗病活性物質(zhì)不僅具有廣譜抗菌能力，還有抗真菌、原生動物、病毒乃至殺死癌細胞而不破壞體內(nèi)正常細胞作用的功能，已成為國內(nèi)外學(xué)者關(guān)注的焦點。在病原體的誘導(dǎo)刺激下家蠅幼蟲可通過基因?qū)ζ涿庖叻磻?yīng)進行調(diào)控，合成多種增量表達的抗病活性物質(zhì)，如抗菌肽、凝集素、溶菌酶、幼蟲體外分泌物、幾丁質(zhì)、殼聚糖以
6、及一些未知的活性物質(zhì)等。這些抗病活性物質(zhì)的發(fā)現(xiàn)使研發(fā)新型藥物代替抗生素進而緩解病原體耐藥壓力成為可能。本研究分別選取牛多殺性巴氏桿菌、豬肺炎支原體及雞致病性大腸桿菌誘導(dǎo)家蠅幼蟲前、后的三個差異基因為研究對象，進行其克隆、表達及表達產(chǎn)物活性研究。應(yīng)用RACE技術(shù)（RapidamplificationofcDNAends，RACE）以3'和5'-RACEReadycDNA為模板克隆牛多殺性巴氏桿菌誘導(dǎo)前后構(gòu)建的抑制性消減文庫（SSH文庫）中的一個家蠅幼蟲未知功能基因MdU-F501（Muscadomesticauncharacterized-F501）全長序列，測序分析后應(yīng)
7、用生物信息學(xué)軟件對MdU-F501的ORF（openreadingframe）序列進行分析并預(yù)測其功能，并進一步將克隆獲得的MdU-F501全長序列與原核表達載體pGEX-4T-1連接，構(gòu)建重組表達質(zhì)粒MdU-F501-pGEX-4T-1；將豬肺炎支原體誘導(dǎo)家蠅幼蟲前后構(gòu)建的SSH文庫中的一個家蠅幼蟲未知功能基因MdU-132（Muscadomesticauncharacterized-132）全長序列和雞致病性大腸桿菌誘導(dǎo)家蠅幼蟲前后構(gòu)建的SSH文庫中的家蠅幼蟲溶菌酶II基因MdL-II（Muscadomesticalysozyme-I
