n-乙酰半胱氨酸對高氧致新生大鼠肺損傷中ros、p-jnk及細胞凋亡的影響

n-乙酰半胱氨酸對高氧致新生大鼠肺損傷中ros、p-jnk及細胞凋亡的影響

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1、分類號:密級:UDC:學號:416522712044南昌大學專業(yè)學位研究生學位論文N-乙酰半胱氨酸對高氧致新生大鼠肺損傷中ROS、p-JNK及細胞凋亡的影響EffectofN-acetylcysteineontheexpressionofROS,p-JNKandapoptosisinneonatalratlunginjuryinducedbyhighoxygen鄭瀟玥培養(yǎng)單位(院、系):南昌大學第一附屬醫(yī)院指導教師姓名、職稱:陳曉教授專業(yè)學位種類:臨床醫(yī)學專業(yè)領域名稱:兒科學論文答辯日期:2015年6月答辯委員會主席:陳強評閱人:楊

2、玉唐文燕2015年6月I一、學位論文獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學位論文是本人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知,除了文中特別加以標注和致謝的地方外,論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不包含為獲得南昌大學或其他教育機構的學位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學位論文作者簽名(手寫):簽字日期:年月日二、學位論文版權使用授權書本學位論文作者完全了解南昌大學有關保留、使用學位論文的規(guī)定,同意學校有權保留并向國家有關部門或機構送交論文的復印件和

3、電子版,允許論文被查閱和借閱。本人授權南昌大學可以將學位論文的全部或部分內容編入有關數(shù)據(jù)庫進行檢索,可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存、匯編本學位論文。同時授權北京萬方數(shù)據(jù)股份有限公司和中國學術期刊(光盤版)電子雜志社將本學位論文收錄到《中國學位論文全文數(shù)據(jù)庫》和《中國優(yōu)秀博碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫》中全文發(fā)表,并通過網(wǎng)絡向社會公眾提供信息服務,同意按“章程”規(guī)定享受相關權益。學位論文作者簽名(手寫):導師簽名(手寫):簽字日期:年月日簽字日期:年月日論文題目姓名學號論文級別博士□碩士□院/系/所專業(yè)E_mail備注:□公開□保密

4、(向校學位辦申請獲批準為“保密”,年月后公開)I摘要摘要目的:1.參照Ozdemir[1]所建立的大鼠高氧肺損傷模型,觀察高氧暴露后新生大鼠的肺組織病理變化情況。2.研究高氧致新生大鼠肺損傷肺組織中ROS、p-JNK蛋白的表達、細胞凋亡的情況及相互關系,探討三者在高氧致新生大鼠肺損傷中的作用3.研究N-乙酰半胱氨酸(NAC)對高氧致新生大鼠肺損傷肺組織中ROS、p-JNK及細胞凋亡的影響,并初步探討其可能的作用機制,為NAC成為早期防治新生兒高氧肺損傷的藥物提供實驗依據(jù)。方法:1.實驗分組:將72只生后第3d的SD大鼠隨機分為以下3

5、組(每組n=24):空氣+生理鹽水組(空氣組對照組)、高氧+生理鹽水組(高氧暴露組)和高氧+N-乙酰半胱氨酸組(NAC干預組)。2.模型制作及藥物干預:自制高氧氧箱,氧箱內持續(xù)通入100%氧氣,將高氧暴露組和NAC干預組的新生大鼠置于高氧氧箱中,空氣對照組置于同一室內的常壓空氣中。NAC組于實驗第1d開始腹腔注射NAC150mg/kg,連續(xù)14d,空氣對照組和高氧暴露組于相同時間點腹腔注射等容積的生理鹽水。3.標本的采集與檢測指標:分別在實驗第3d,7d,14d從各組中取8只新生鼠斷頭處死,開胸取肺組織。將右側肺組織置于少量的PBS

6、中,然后置于液氮中速凍,用Elisa法檢測肺組織中ROS濃度;將左側肺組織置于中性甲醛溶液中固定后石蠟包埋,用HE染色觀察肺組織病理學變化,用免疫組化法檢測p-JNK蛋白表達并計算累積光密度值(IOD),用TUNEL法檢測肺組織細胞凋亡并計算凋亡指數(shù)(AI)。結果:1.肺組織病理學改變:在光鏡下觀察,空氣對照組肺組織結構正常。高氧暴露組3d可見肺泡間隔充血水腫,少量炎癥細胞滲出。高氧暴露組7d可見肺泡間隔增寬,充血水腫加重,大量炎癥細胞浸潤,部分肺泡腔內可見滲出液,II摘要肺組織結構紊亂。高氧暴露組14d可見肺泡間隔充血水腫減輕,炎

7、癥細胞減少,肺組織結構紊亂。NAC干預組各時間點較高氧暴露組肺泡間隔充血水腫減輕,炎癥細胞減少,肺泡間隔厚度變薄,肺組織結構未見明顯紊亂。2.肺組織中ROS濃度變化:高氧暴露組、NAC干預組各時間點的ROS濃度均高于空氣對照組(P<0.01);NAC干預組各時間點ROS濃度均低于高氧暴露組(P<0.01)??諝鈱φ战M中各時間點之間的ROS濃度比較無統(tǒng)計學意義(P>0.05);高氧暴露組中3d的ROS濃度開始升高,7d達到高峰,14dROS濃度下降,各時間點兩兩比較差異均有顯著統(tǒng)計學意義(P<0.01);NAC干預組中3dROS濃度開

8、始升高,7d達到高峰,14dROS濃度下降,各時間點兩兩比較差異有顯著統(tǒng)計學意義(P<0.01)。3.肺組織中p-JNK蛋白變化及分布:高氧暴露組、NAC干預組各時間點的p-JNK蛋白表達均高于空氣對照組(P<0.01),肺泡上皮細胞

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