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《降香總黃酮提取工藝的正交設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)優(yōu)選》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、降香總黃酮提取工藝的正交設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)優(yōu)選【摘要】目的優(yōu)選提取降香中總黃酮的最佳工藝。方法采用正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，以總黃酮提取量為指標(biāo)，對(duì)降香總黃酮提取條件進(jìn)行優(yōu)選。結(jié)果最佳提取工藝為10倍量70%乙醇在90℃提取3次，1.5h/次，測(cè)得總黃酮平均提取量為92.13mg，平均含量為4.61%。結(jié)論該提取工藝條件簡(jiǎn)單、穩(wěn)定、提取效率高。【關(guān)鍵詞】降香總黃酮;正交實(shí)驗(yàn);提取方法 中藥降香是豆科植物降香檀DalbergiaodoriferaT.Chen的樹(shù)干和根的干燥心材。降香的功效為行氣活血，止痛，止血，用于治療脘腹疼痛，肝郁脅痛
2、，胸痹刺痛，跌撲損傷，外傷出血[1]。降香的主要成分為揮發(fā)油和黃酮類(lèi)化合物，其中，降香檀藥材中總黃酮的含量為2.51%～5.82%[2]。黃酮類(lèi)化合物具有抗炎、鎮(zhèn)痛、抗氧化、中樞神經(jīng)作用及心血管方面的作用[3]。本課題組對(duì)降香進(jìn)行了系統(tǒng)研究，建立了一個(gè)適合降香總黃酮的含量測(cè)定方法[4]。本文應(yīng)用該含量測(cè)定方法，以降香總黃酮提取量為考察指標(biāo)，通過(guò)正交設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行工藝優(yōu)化，對(duì)提取總黃酮的條件和影響因素進(jìn)行了探討，為降香總黃酮的提取工藝提供了科學(xué)依據(jù)。 1儀器與材料5 1.1儀器UV-2450紫外可見(jiàn)分光光度儀(SHI
3、MADZU)，電子分析天平(BP211D)，HH-4型恒溫水浴鍋(江蘇省金壇市宏華儀器廠)，RE52-98型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(上海亞榮生化儀器廠)?！ ?.2試劑乙醇(分析純，汕頭市西隴化工廠)，甲醇鈉(新制)?！ ?.3藥材和對(duì)照品降香藥材(廣州市藥材公司中藥飲片廠，產(chǎn)地海南)，柚皮素對(duì)照品(實(shí)驗(yàn)室自制，經(jīng)UV、1H-NMR鑒定結(jié)構(gòu)，HPLC檢測(cè)計(jì)算，純度大于98%)。 2方法 2.1降香總黃酮含量測(cè)定方法及工作曲線的確定精密稱(chēng)取柚皮素對(duì)照品0.00143g，用70%乙醇溶解并定容至50ml備用。分別精密吸取對(duì)照品溶
4、液0.00，1.00，2.00，3.00，4.00，5.00，6.00ml于10ml容量瓶?jī)?nèi)，準(zhǔn)確加入1ml甲醇鈉，用70%乙醇定容至刻度，搖勻，放置40min，在410nm處測(cè)定其吸光度。計(jì)算得回歸方程為Y=3.2422X-0.0193，r=0.9998，線性范圍是0.0143～0.0859mg?！ ?.25正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)根據(jù)影響總黃酮的提取因素，在預(yù)試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，選取提取時(shí)間(A)，提取次數(shù)(B)，提取溫度(C)，乙醇濃度(D)作為考察因素，每個(gè)因素設(shè)定3個(gè)水平，以總黃酮提取量為考察指標(biāo)，采用L9(34)表安排正交
5、實(shí)驗(yàn)。結(jié)果見(jiàn)表1。表1正交實(shí)驗(yàn)因素和水平 2.3樣品溶液的提取及含量測(cè)定將干燥的降香藥材粉碎，精密稱(chēng)量2g/份，按照L9(34)正交實(shí)驗(yàn)表的工藝條件加入10倍量乙醇進(jìn)行回流提取。提取液合并蒸干后用70%乙醇定容至25ml，取1ml各提取液稀釋至10ml，再取1ml稀釋液按對(duì)照品測(cè)定方法測(cè)量其吸光度并計(jì)算總黃酮提取量。結(jié)果見(jiàn)表2。表1L9(34)正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和結(jié)果 2.4方差分析上述實(shí)驗(yàn)所用正交表無(wú)空白列作對(duì)照，所以將離差平方和中最小的項(xiàng)來(lái)近似作為誤差的估計(jì)，用于計(jì)算各因子列的F比值[5]，本實(shí)驗(yàn)采用“提取時(shí)間(因
6、素A)”項(xiàng)作為誤差來(lái)源項(xiàng)，對(duì)表2的總黃酮含量進(jìn)行方差分析。結(jié)果見(jiàn)表3。表3方差分析 2.5最佳提取工藝的驗(yàn)證精密稱(chēng)取3份降香粉末各2g，按最佳提取工藝條件平行操作，提取液定容至25ml，按“2.3”項(xiàng)下方法測(cè)定吸光度并計(jì)算總黃酮提取量和提取率。結(jié)果見(jiàn)表4。表4最佳提取工藝驗(yàn)證 3結(jié)果 本實(shí)驗(yàn)得出的最佳提取工藝為10倍量70%乙醇在90℃提取3次，1.5h/次，測(cè)得總黃酮平均提取量為92.135mg，平均含量為4.61%。該提取工藝具有穩(wěn)定性好、黃酮得率高、操作簡(jiǎn)單且成本較低的特點(diǎn)?！ ?討論 實(shí)驗(yàn)先用石油醚索
7、氏提取除去部分脂溶性雜質(zhì)，再用乙醇提取總黃酮。發(fā)現(xiàn)是否使用石油醚脫脂對(duì)總黃酮含量測(cè)定結(jié)果影響不大，故省去石油醚脫脂而直接使用乙醇提取。 正交實(shí)驗(yàn)前考察了乙醇用量對(duì)于總黃酮提取量的影響，采用5，8，10，15，20倍量乙醇進(jìn)行提取，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明乙醇用量超過(guò)10倍以上則總黃酮提取量無(wú)顯著性差別，故以10倍量乙醇進(jìn)行提取?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】 [1]國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典，Ⅰ部[S].北京：化學(xué)工業(yè)出版社,2005:158. [2]肖省娥，林勵(lì).不同來(lái)源的降香藥材中總黃酮含量測(cè)定[J].基層中藥雜志,2000,14(6):1
8、2. [3]ZhaoQ,GuoJ,ZhangY.ChemicalandpharmacologicalresearchprogressofChinesedrug“JiangXiang”(Lignum5DalbergiaeOdoriferae)[J].JournalofChinesepharmaceuticalsciences,2000,9(1)
