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1、正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)選常春油麻藤總黃酮提取工藝的研究【關(guān)鍵詞】常春油麻藤總黃酮蘆丁紫外分光光度法正交實(shí)驗(yàn) AbstractObjectiveTostudytheoptimumextractiontechnologyoftotalflavonoidsinMucunasempervirensHemsl.MethodsUsingRutinastheevaluatingcriteriaandNaNO2-Al(NO3)3-NaOHaschromogenicagent,theextractionconditionumextractiontechnol
2、ogyin,3times.ThetotalflavonoidsinMucunasempervirensHemsleandnumberoftimeshavesignificantimpactonextractionoftotalflavonoidsinMucunasempervirensHemsl.TheoptimumextractiontechnologyisA2B3D1C1. KeypervirensHemsl.;Totalflavonoids;Rutin;UV;Orthogonaldesign 常春油麻藤，是豐城雞血藤的一
3、個(gè)品種，又名牛馬藤或大血藤，是豆科植物常春油麻藤M(fèi)ucunasempervirensHemsl.的藤莖。性溫，味苦。具有行血活血、通經(jīng)活絡(luò)之功效，主治關(guān)節(jié)風(fēng)濕痛、跌打損傷、血虛、月經(jīng)不調(diào)及經(jīng)閉?！ ∮形墨I(xiàn)報(bào)道，常春油麻藤中主要含有黃酮類成分，如刺芒柄花素、大豆黃素以及3,7-二羥基-6-甲氧基二氫黃酮等［1］。黃酮化合物具有降血糖、降血脂、抗菌消炎、抗氧化、抗衰老、消除體內(nèi)自由基等藥理作用?；邳S酮類化合物是其有效成分之一。因此，研究其定量方法，不僅對了解其中黃酮成分含量以觀察藥物的療效與成分間關(guān)系具有一定意義，而且對控制生藥質(zhì)量
4、，進(jìn)一步制定其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供了依據(jù)。本文以提取物中總黃酮含量為指標(biāo)，采用正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和紫外分光光度法對常春油麻藤中總黃酮的提取條件及含量測定進(jìn)行了系統(tǒng)的研究，為進(jìn)一步開發(fā)利用常春油麻藤及雞血藤資源提供科學(xué)依據(jù)。 1器材 1.1儀器 U-3000Spectrophotometer(日本島津公司)；電子分析天平（上海梅特勒-托利多儀器有限公司）；SB3200超聲波清洗儀（上海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠）；DZF-6050型真空干燥箱（上海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠）；X-9146MBE數(shù)顯鼓風(fēng)干燥箱（上海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠
5、）；HH-S數(shù)顯恒溫水浴鍋（江蘇省金壇市醫(yī)療儀器廠）；萬能粉碎機(jī)（天津市泰斯特儀器有限公司）。 1.2材料與試劑 蘆丁對照品（中國藥品生物制品檢定所提供，批號：100080-200306）；常春油麻藤藥材（采自于江西省南昌市灣里區(qū)梅嶺山脈，由江西中醫(yī)學(xué)院中藥系賴學(xué)文老師采集并鑒定）；所用試劑均為分析純?！ ?方法與結(jié)果 2.1總黃酮的測定方法 2.1.1測定方法 依據(jù)在黃酮類化合物的紫外光譜圖上主要有兩個(gè)吸收帶：環(huán)肉桂酰系統(tǒng)引起的吸收帶Ⅰ（300～550nm）和環(huán)苯酰系統(tǒng)引起的吸收帶Ⅱ（240～280nm）。若加入鋁鹽，
6、則鋁離子與黃酮化合物形成穩(wěn)定的配合物，帶Ⅱ會明顯向長波方向移動（紅移）；在NaNO2的強(qiáng)堿性溶液中，其在500～510nm處吸光度值最大，從而為分光光度法測定提供了可靠的依據(jù)?！ ?.1.2測定方法 取4個(gè)10ml容量瓶，1，2號分別加入1ml蘆丁對照品溶液和1ml稀釋到一定倍數(shù)的常春油麻藤溶液，各加60%的乙醇稀釋至刻度，以60%乙醇為空白，在紫外分光光度計(jì)上于200～760nm波長范圍內(nèi)進(jìn)行掃描。3，4號分別加入1ml蘆丁對照品溶液和1ml稀釋到與2號同樣倍數(shù)的常春油麻藤溶液，加入0.15ml5%NaNO2溶液搖勻，放置6m
7、in；加入0.15ml10%Al(NO3)3溶液搖勻，放置6min；加入4ml1mol/LNaOH溶液搖勻，定容，放置0～15min，用同樣方法加入顯色劑的溶劑作空白，在200～760nm波長范圍內(nèi)掃描［2］，得出吸收光譜，結(jié)果見圖1。 從圖1可以看出，在未加顯色劑以前，對照品在361nm和257nm處有最大吸收，供試品在282nm處有最大吸收，加入NaNO2-Al(NO3)3-NaOH顯色體系后，對照品和供試品的吸收峰都發(fā)生了紅移，在502nm處有最大吸收。因此，可以確定502nm為測定波長?！ ?.1.3對照品溶液的制備精密
8、稱取蘆丁對照品19.84mg，置于50ml容量瓶中，加60%乙醇溶解（如不溶，置水浴上微熱并短時(shí)超聲使之溶解），用60%乙醇稀釋至刻度，搖勻，即得蘆丁對照品溶液（每毫升含蘆丁0.992mg）?！ ?.1.4標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備精密量取蘆丁對照品溶液0，0
