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1、正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)選常春油麻藤總黃酮提取工藝的研究論文張凌劉亞麗饒志軍馮軍【摘要】目的研究提取常春油麻藤中總黃酮的最佳工藝條件。方法以蘆丁為指標(biāo)，用NaNO2-Al(NO3)3-NaOH顯色體系作為顯色劑，用正交實(shí)驗(yàn)法對(duì)常春油麻藤總黃酮提取方法進(jìn)行了系統(tǒng)研究。結(jié)果最佳提取工藝為30倍量60%乙醇回流3次，40min/次，常春油麻藤中總黃酮的含量為12.43%。結(jié)論乙醇濃度、料液比、回流時(shí)間和提取次數(shù)對(duì)常春油麻藤總黃酮的提取均有影響。最佳提取工藝為A2B3D1C1。【關(guān)鍵詞】常春油麻藤總黃酮蘆丁紫外分光光度法正交實(shí)驗(yàn)A
2、bstractObjectiveTostudytheoptimumextractiontechnologyoftotalflavonoidsinMucunasempervirensHemsl.MethodsUsingRutinastheevaluatingcriteriaandNaNO2-Al(NO3)3-NaOHaschromogenicagent,theextractionconditionumextractiontechnologyin,3times.ThetotalflavonoidsinMucuna
3、sempervirensHemsleandnumberoftimeshavesignificantimpactonextractionoftotalflavonoidsinMucunasempervirensHemsl.TheoptimumextractiontechnologyisA2B3D1C1.KeypervirensHemsl.;Totalflavonoids;Rutin;UV;Orthogonaldesign常春油麻藤，是豐城雞血藤的一個(gè)品種，又名牛馬藤或大血藤，是豆科植物常春油麻藤M(fèi)ucunase
4、mpervirensHemsl.的藤莖。性溫.freeleter(日本島津公司)；電子分析天平（上海梅特勒-托利多儀器有限公司）；SB3200超聲波清洗儀（上海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠）；DZF-6050型真空干燥箱（上海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠）；X-9146MBE數(shù)顯鼓風(fēng)干燥箱（上海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠）；HH-S數(shù)顯恒溫水浴鍋（江蘇省金壇市醫(yī)療儀器廠）；萬能粉碎機(jī)（天津市泰斯特儀器有限公司）。1.2材料與試劑蘆丁對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所提供，批號(hào)：100080-200306）；常春油麻藤
5、藥材（采自于江西省南昌市灣里區(qū)梅嶺山脈，由江西中醫(yī)學(xué)院中藥系賴學(xué)文老師采集并鑒定）；所用試劑均為分析純。2方法與結(jié)果2.1總黃酮的測(cè)定方法2.1.1測(cè)定方法依據(jù)在黃酮類化合物的紫外光譜圖上主要有兩個(gè)吸收帶：環(huán)肉桂酰系統(tǒng)引起的吸收帶Ⅰ（300～550nm）和環(huán)苯酰系統(tǒng)引起的吸收帶Ⅱ（240～280nm）。若加入鋁鹽，則鋁離子與黃酮化合物形成穩(wěn)定的配合物，帶Ⅱ會(huì)明顯向長(zhǎng)波方向移動(dòng)（紅移）；在NaNO2的強(qiáng)堿性溶液中，其在500～510nm處吸光度值最大，從而為分光光度法測(cè)定提供了可靠的依據(jù)。2.1.2測(cè)定方法取4
6、個(gè)10ml容量瓶，1，2號(hào)分別加入1ml蘆丁對(duì)照品溶液和1ml稀釋到一定倍數(shù)的常春油麻藤溶液，各加60%的乙醇稀釋至刻度，以60%乙醇為空白，在紫外分光光度計(jì)上于200～760nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)進(jìn)行掃描。3，4號(hào)分別加入1ml蘆丁對(duì)照品溶液和1ml稀釋到與2號(hào)同樣倍數(shù)的常春油麻藤溶液，加入0.15ml5%NaNO2溶液搖勻，放置6min；加入0.15ml10%Al(NO3)3溶液搖勻，放置6min；加入4ml1mol/LNaOH溶液搖勻，定容，放置0～15min，用同樣方法加入顯色劑的溶劑作空白，在200～760
7、nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)掃描［2］，得出吸收光譜，結(jié)果見圖1。從圖1可以看出，在未加顯色劑以前，對(duì)照品在361nm和257nm處有最大吸收，供試品在282nm處有最大吸收，加入NaNO2-Al(NO3)3-NaOH顯色體系后，對(duì)照品和供試品的吸收峰都發(fā)生了紅移，在502nm處有最大吸收。因此，可以確定502nm為測(cè)定波長(zhǎng)。2.1.3對(duì)照品溶液的制備精密稱取蘆丁對(duì)照品19.84mg，置于50ml容量瓶中，加60%乙醇溶解（如不溶，置水浴上微熱并短時(shí)超聲使之溶解），用60%乙醇稀釋至刻度，搖勻，即得蘆丁對(duì)照品溶液（每毫升含
8、蘆丁0.992mg）。2.1.4標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備精密量取蘆丁對(duì)照品溶液0，0.2，0.5，1，1.2，1.5ml，分別置于10ml容量瓶中，加60%乙醇至2ml，然后按照“2.1.2”項(xiàng)中“加入0.5ml5%NaNO2溶液”起，至“放置0～15min”操作，以第一瓶溶液作空白，在502nm測(cè)定各溶液的吸收度，以吸收度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，得回歸方程：C=78.93A+0.201，相關(guān)系數(shù)：r=0.9
