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《HBcAb陽性供肝組織內(nèi)cccDNA檢測及與肝移植術(shù)后乙肝復(fù)發(fā)的關(guān)系》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、分類號：I嶼12．6密級：學位類別：科學學位口專業(yè)學位團學校代碼：1062學號：20102680學科門類：醫(yī)學天洋醬科史粵TIA掛J
2、INM￡OICALU糙IV囂RSll●Y碩士學位論文MLASTER’SDISSERl、ATION論文題目HBcAb陽性供肝組織內(nèi)cccDNA檢測及與肝移植術(shù)后乙肝復(fù)發(fā)的關(guān)系TITLETherelationshipbetweencccDNAofHBcAb—positivedonorlivertissueandhepatitisBrecurrenceafterlivertransplantation一級學科
3、：臨床醫(yī)學二級學科：外科學普外論文作者：姜然然指導(dǎo)教師：張建軍教授天津醫(yī)科大學研究生院二。一三年五月學位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所呈交的論文是我個人在導(dǎo)師指導(dǎo)下獨立進行研究工作取得的研究成果。除了文中特別加以標注引用的內(nèi)容和致謝的地方外，論文中不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。學位論文作者簽名：塾箜日期：2013年5月，。Et學位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學位論文作者完全了解天津醫(yī)科大學有關(guān)保留、使用學位論文的規(guī)定，即：學校有權(quán)將學位論文的
4、全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索，并采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編以供查閱和借閱。同意學校向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文，并編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫。保密口，在——年解密后適用本授權(quán)書。本論文屬于不保密囪。(請在相對應(yīng)的方框內(nèi)打“√”)學位論文作者簽名：導(dǎo)師簽名：日期：知B年娟D日日期：少，3年朋(D日天津醫(yī)科大學碩士學位論文中文摘要【目的】檢測乙肝核心抗體陽性供肝組織內(nèi)HBVcccDNA，結(jié)合肝移植術(shù)后乙肝復(fù)發(fā)率，探討HBcAb陽性供肝中cccDNA與術(shù)后HBV復(fù)發(fā)的關(guān)系?！痉椒ā繉嶒灧譃閮刹糠?。第一部分：建立檢測供肝組織中HBV
5、cccDNA的熒光定量PCR檢測體系。根據(jù)入組病例的種族和地理分布特點，在GenBank選取HBV常見B、C基因型50株的全基因組序列，結(jié)合HBVrcDNA、HBVcccDNA結(jié)構(gòu)特點選擇相對保守的序列設(shè)計HBVcccDNA選擇性引物和探針。根據(jù)cccDNA的結(jié)構(gòu)和生物學特點，利用PSAD消化去除rcDNA和整合型HBVDNA的干擾后，利用跨越缺口的選擇性引物擴增，延長到探針結(jié)合位點時，利用其外切酶活性將探針切斷，產(chǎn)生熒光信號。以pCPl0質(zhì)粒構(gòu)建標準曲線，13-actin作為內(nèi)參照，對供肝組織提取的DNA樣本進行PSAD消化后進行c
6、ccDNA檢測，確定引物的最佳退火溫度和檢測靈敏度。第二部分：HBcAb陽性供肝組織內(nèi)HBVcccDNA的熒光定量PCR檢測與術(shù)后HBV的復(fù)發(fā)率的關(guān)系。2007年1月至2010年1月因乙肝相關(guān)性疾病在我院行肝移植手術(shù)患者1200例，根據(jù)實驗分組、入選標準、排除標準，選取病例共85例，其中男性65例，女性20例，年齡18．65歲，平均為44．55+12．37歲，隨訪18．60個月，平均隨訪32．12+10．06個月。分為實驗組(HBcAb陽性供肝、HBsAg陰性，n=40)、對照組(HBsAg陽性供肝，n=15)、正常組(無肝炎供肝，n
7、=30)三組。入選標準：1)年齡18．65歲，性別不限；2)HBsAg或HBsAg和DNA陽性；3)簽署知情同意；4)預(yù)計術(shù)后存活6個月以上者。排除標準：1)術(shù)前血清學HBsAg陰性；2)預(yù)計術(shù)后生存期<6個月者；3)存在其它肝炎病毒混合感染；4)HBV病毒變異者；5)嚴重藥物過敏者。利用第一部分創(chuàng)建的方法，檢測供肝組織內(nèi)的HBVcccDNA。所有患者肝移植術(shù)后給予HBIG聯(lián)合核苷類藥物預(yù)防乙肝復(fù)發(fā)方案。定期檢測HBV血清學及HBVDNA，如有HBsAg陽性或HBV．DNA陽性者取肝穿活檢病理確認復(fù)發(fā)。計算乙肝復(fù)發(fā)率，探討HBcAb陽
8、性供肝中cccDNA與術(shù)后HBV復(fù)發(fā)的關(guān)系。實驗結(jié)果采用SPSS16．0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行x：檢驗。p<0．05為差異有統(tǒng)計學意義。【結(jié)果】天津醫(yī)科大學碩士學位論文第一部分：成功建立了檢測供肝組織中HBVcccDNA的熒光定量PCR檢測體系。第二部分：入組患者共85例，實驗組、對照組及正常組分別有12例、11例和0例cccDNA檢測呈陽性，其陽性率分別為30％(12／40)、73．3％(11／15)、o。實驗組與對照組的HBVcccDNA陽性率的差異有統(tǒng)計學意義(f=8．419戶O．004)。實驗組、對照組及正常組術(shù)后HBV的復(fù)發(fā)率分
9、別為10％(4／40)、80％(12／15)和3．3％(1／30)。實驗組與對照組術(shù)后HBV的復(fù)發(fā)之間差異有統(tǒng)計學意義(矛=25．913P<0．001)。實驗組、正常組術(shù)后HBV的復(fù)發(fā)之間差異無統(tǒng)計學意義(#=1．149
