資源描述：
《HBcAb陽(yáng)性供肝組織內(nèi)cccDNA檢測(cè)及與肝移植術(shù)后乙肝復(fù)發(fā)的關(guān)系》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫(kù)。
1、分類號(hào)：I嶼12．6密級(jí)：學(xué)位類別：科學(xué)學(xué)位口專業(yè)學(xué)位團(tuán)學(xué)校代碼：1062學(xué)號(hào)：20102680學(xué)科門類：醫(yī)學(xué)天洋醬科史粵TIA掛J
2、INM￡OICALU糙IV囂RSll●Y碩士學(xué)位論文MLASTER’SDISSERl、ATION論文題目HBcAb陽(yáng)性供肝組織內(nèi)cccDNA檢測(cè)及與肝移植術(shù)后乙肝復(fù)發(fā)的關(guān)系TITLETherelationshipbetweencccDNAofHBcAb—positivedonorlivertissueandhepatitisBrecurrenceafterlivertransplantation一級(jí)學(xué)科
3、：臨床醫(yī)學(xué)二級(jí)學(xué)科：外科學(xué)普外論文作者：姜然然指導(dǎo)教師：張建軍教授天津醫(yī)科大學(xué)研究生院二。一三年五月學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所呈交的論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下獨(dú)立進(jìn)行研究工作取得的研究成果。除了文中特別加以標(biāo)注引用的內(nèi)容和致謝的地方外，論文中不包含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。學(xué)位論文作者簽名：塾箜日期：2013年5月，。Et學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解天津醫(yī)科大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即：學(xué)校有權(quán)將學(xué)位論文的
4、全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，并采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編以供查閱和借閱。同意學(xué)校向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文，并編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)。保密口，在——年解密后適用本授權(quán)書。本論文屬于不保密囪。(請(qǐng)?jiān)谙鄬?duì)應(yīng)的方框內(nèi)打“√”)學(xué)位論文作者簽名：導(dǎo)師簽名：日期：知B年娟D日日期：少，3年朋(D日天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文中文摘要【目的】檢測(cè)乙肝核心抗體陽(yáng)性供肝組織內(nèi)HBVcccDNA，結(jié)合肝移植術(shù)后乙肝復(fù)發(fā)率，探討HBcAb陽(yáng)性供肝中cccDNA與術(shù)后HBV復(fù)發(fā)的關(guān)系。【方法】實(shí)驗(yàn)分為兩部分。第一部分：建立檢測(cè)供肝組織中HBV
5、cccDNA的熒光定量PCR檢測(cè)體系。根據(jù)入組病例的種族和地理分布特點(diǎn)，在GenBank選取HBV常見B、C基因型50株的全基因組序列，結(jié)合HBVrcDNA、HBVcccDNA結(jié)構(gòu)特點(diǎn)選擇相對(duì)保守的序列設(shè)計(jì)HBVcccDNA選擇性引物和探針。根據(jù)cccDNA的結(jié)構(gòu)和生物學(xué)特點(diǎn)，利用PSAD消化去除rcDNA和整合型HBVDNA的干擾后，利用跨越缺口的選擇性引物擴(kuò)增，延長(zhǎng)到探針結(jié)合位點(diǎn)時(shí)，利用其外切酶活性將探針切斷，產(chǎn)生熒光信號(hào)。以pCPl0質(zhì)粒構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線，13-actin作為內(nèi)參照，對(duì)供肝組織提取的DNA樣本進(jìn)行PSAD消化后進(jìn)行c
6、ccDNA檢測(cè)，確定引物的最佳退火溫度和檢測(cè)靈敏度。第二部分：HBcAb陽(yáng)性供肝組織內(nèi)HBVcccDNA的熒光定量PCR檢測(cè)與術(shù)后HBV的復(fù)發(fā)率的關(guān)系。2007年1月至2010年1月因乙肝相關(guān)性疾病在我院行肝移植手術(shù)患者1200例，根據(jù)實(shí)驗(yàn)分組、入選標(biāo)準(zhǔn)、排除標(biāo)準(zhǔn)，選取病例共85例，其中男性65例，女性20例，年齡18．65歲，平均為44．55+12．37歲，隨訪18．60個(gè)月，平均隨訪32．12+10．06個(gè)月。分為實(shí)驗(yàn)組(HBcAb陽(yáng)性供肝、HBsAg陰性，n=40)、對(duì)照組(HBsAg陽(yáng)性供肝，n=15)、正常組(無(wú)肝炎供肝，n
7、=30)三組。入選標(biāo)準(zhǔn)：1)年齡18．65歲，性別不限；2)HBsAg或HBsAg和DNA陽(yáng)性；3)簽署知情同意；4)預(yù)計(jì)術(shù)后存活6個(gè)月以上者。排除標(biāo)準(zhǔn)：1)術(shù)前血清學(xué)HBsAg陰性；2)預(yù)計(jì)術(shù)后生存期<6個(gè)月者；3)存在其它肝炎病毒混合感染；4)HBV病毒變異者；5)嚴(yán)重藥物過敏者。利用第一部分創(chuàng)建的方法，檢測(cè)供肝組織內(nèi)的HBVcccDNA。所有患者肝移植術(shù)后給予HBIG聯(lián)合核苷類藥物預(yù)防乙肝復(fù)發(fā)方案。定期檢測(cè)HBV血清學(xué)及HBVDNA，如有HBsAg陽(yáng)性或HBV．DNA陽(yáng)性者取肝穿活檢病理確認(rèn)復(fù)發(fā)。計(jì)算乙肝復(fù)發(fā)率，探討HBcAb陽(yáng)
8、性供肝中cccDNA與術(shù)后HBV復(fù)發(fā)的關(guān)系。實(shí)驗(yàn)結(jié)果采用SPSS16．0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行x：檢驗(yàn)。p<0．05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義?！窘Y(jié)果】天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文第一部分：成功建立了檢測(cè)供肝組織中HBVcccDNA的熒光定量PCR檢測(cè)體系。第二部分：入組患者共85例，實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照組及正常組分別有12例、11例和0例cccDNA檢測(cè)呈陽(yáng)性，其陽(yáng)性率分別為30％(12／40)、73．3％(11／15)、o。實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組的HBVcccDNA陽(yáng)性率的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(f=8．419戶O．004)。實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照組及正常組術(shù)后HBV的復(fù)發(fā)率分
9、別為10％(4／40)、80％(12／15)和3．3％(1／30)。實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組術(shù)后HBV的復(fù)發(fā)之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(矛=25．913P<0．001)。實(shí)驗(yàn)組、正常組術(shù)后HBV的復(fù)發(fā)之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(#=1．149
