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1、第三章基因組和基因組學(xué)GenomeandGenomics基因(Gene)的概念定義:基因是決定一定功能產(chǎn)物的DNA序列(片斷),是遺傳的結(jié)構(gòu)和功能單位。功能產(chǎn)物:RNA和蛋白質(zhì)染色體組(Chromosomeset)每個(gè)生殖細(xì)胞中的全部染色體稱為一個(gè)染色體組。人體體細(xì)胞內(nèi)含兩個(gè)染色體組。基因組(Genome)每個(gè)染色體組的DNA構(gòu)成一個(gè)基因組。廣義的基因組包括細(xì)胞核染色體基因組和細(xì)胞質(zhì)中的線粒體基因組。是一個(gè)細(xì)胞或一種生物體的整套遺傳物質(zhì)基因組學(xué)(Genomics)是指對(duì)所有基因進(jìn)行基因組作圖,核苷酸序列分析,基因定位和基因功能分析。第一節(jié)原核生物基因組原核生物的
2、生命活動(dòng)可進(jìn)行基因復(fù)制復(fù)雜的代謝活動(dòng)適應(yīng)環(huán)境的變化獲取自身所需的能量合成自身生長(zhǎng)所需的原料調(diào)節(jié)自身的酶系統(tǒng)組成及功能調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)某種蛋白質(zhì)的數(shù)量一、原核生物基因組一般特征DNA較小,一般為106~107堿基對(duì)基因數(shù)目較少,大約為3500個(gè)基因通常為一條環(huán)狀雙鏈DNA(dsDNA)只有一個(gè)DNA復(fù)制起始點(diǎn)GC含量差異很大,25%~75%之間,可用于推測(cè)細(xì)菌的種類(一)原核生物的類核結(jié)構(gòu)基因組DNA位于細(xì)胞中央的核區(qū),無核膜形成類核結(jié)構(gòu),中央為RNA和支架蛋白,外圍是雙鏈閉環(huán)的超螺旋DNA原核基因組類核結(jié)構(gòu)(二)原核生物的操縱子結(jié)構(gòu)是指數(shù)個(gè)功能上相關(guān)聯(lián)的結(jié)構(gòu)基因串聯(lián)在
3、一起,連同上游的調(diào)控區(qū)(包括調(diào)節(jié)基因、啟動(dòng)子、操縱基因)以及下游的轉(zhuǎn)錄終止信號(hào),共同組成的一個(gè)基因表達(dá)單位。(三)原核生物的結(jié)構(gòu)基因結(jié)構(gòu)基因是連續(xù)的,無內(nèi)含子成分多順反子結(jié)構(gòu)多數(shù)為單拷貝基因,編碼rRNA、tRNA的基因?yàn)槎嗫截惤Y(jié)構(gòu)基因的編碼順序一般不重疊*基因重疊是指基因組DNA中某些順序被兩個(gè)及以上基因所共用(四)具有編碼同功酶的基因表達(dá)功能相同的產(chǎn)物的一類基因,但基因結(jié)構(gòu)不完全相同。二、質(zhì)粒質(zhì)粒(plasmid)指細(xì)菌細(xì)胞染色體以外,能獨(dú)立復(fù)制并穩(wěn)定遺傳的共價(jià)閉合環(huán)狀DNA分子(一)質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)及理化性質(zhì)環(huán)狀雙鏈超螺旋DNA分子分子量4×106~1×108D
4、可發(fā)生構(gòu)象變化,出現(xiàn)超螺旋、半開環(huán)、線狀三種構(gòu)象具有較強(qiáng)的抗切割和抗變性的能力(二)質(zhì)粒的命名與分類命名:用p代表質(zhì)粒,后面用兩個(gè)大寫字母代表作者或?qū)嶒?yàn)室名稱及編號(hào)。如pUC118分類:可根據(jù)復(fù)制機(jī)制、功能、轉(zhuǎn)移方式、大小以及對(duì)宿主的依賴程度不同進(jìn)行分類。復(fù)制機(jī)制嚴(yán)緊型質(zhì)粒松弛型質(zhì)粒質(zhì)粒功能F質(zhì)粒(性質(zhì)粒)R質(zhì)粒(抗藥性質(zhì)粒)Col質(zhì)粒(大腸桿菌素生長(zhǎng)因子)轉(zhuǎn)移方式結(jié)合型質(zhì)??梢苿?dòng)型質(zhì)粒自傳遞型質(zhì)粒質(zhì)粒的宿主范圍窄宿主譜型質(zhì)粒廣宿主譜型質(zhì)粒(三)質(zhì)粒的生物學(xué)特性可移動(dòng)性;自我復(fù)制的能力;攜帶篩選標(biāo)記(抗藥性基因、營(yíng)養(yǎng)缺陷型基因、抗重金屬基因、抗紫外線/X射線抗性
5、基因);不相容性。pBR322質(zhì)粒物理圖譜三、可移動(dòng)的DNA序列定義:又稱轉(zhuǎn)座因子(tranposableelement)或轉(zhuǎn)座元件。是一類在細(xì)菌染色體、質(zhì)?;蚴删w之間自行移動(dòng)并具有轉(zhuǎn)位特性的獨(dú)立DNA序列。是基因重組的一種方式。分類:可分為三類插入序列轉(zhuǎn)座子可轉(zhuǎn)座的噬菌體(一)插入序列插入序列(insertionsequence,IS):具有轉(zhuǎn)座能力的簡(jiǎn)單遺傳因子,長(zhǎng)度一般小于2kb。IS因子只含有與轉(zhuǎn)座有關(guān)的基因與序列。共同特征是在其末端都具有一段反向的重復(fù)序列(IR)。(二)轉(zhuǎn)座子轉(zhuǎn)座子(transposons): 每個(gè)轉(zhuǎn)座子都帶有3個(gè)基因:一個(gè)是編
6、碼對(duì)氨芐青霉素抗性的β–內(nèi)酰胺酶(β-lactamase)基因,其它二個(gè)是編碼與轉(zhuǎn)座作用有關(guān)的基因(TnpA和TnpR)。(三)可轉(zhuǎn)座的噬菌體可轉(zhuǎn)座的噬菌體(transposablephage):是一類溫和型噬菌體,如Mu噬菌體。(四)轉(zhuǎn)座子的遺傳效應(yīng)引起突變引入新的基因基因重排第二節(jié)病毒基因組病毒的生物學(xué)特性結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,不能獨(dú)自復(fù)制依賴宿主細(xì)胞完成復(fù)制完整的病毒顆粒由核酸和蛋白質(zhì)組成一、病毒基因組特征分子較小,一般為1.5×103~3.6×106,基因數(shù)少;每種病毒只含一種核酸(RNA或DNA),可為雙鏈或單鏈、環(huán)狀或線性;核酸分正鏈和負(fù)鏈,與mRNA序列一致的
7、為正鏈,與mRNA序列互補(bǔ)的為負(fù)鏈;反轉(zhuǎn)錄病毒(逆轉(zhuǎn)錄病毒)是一類特殊類型的單鏈正鏈RNA病毒,含有RNA指導(dǎo)的DNA聚合酶,能使RNA反轉(zhuǎn)錄生成DNA。一、病毒基因組特征基因組中有基因重疊現(xiàn)象,能攜帶較多的遺傳信息;有操縱子結(jié)構(gòu)和相關(guān)基因叢集;感染真核細(xì)胞的病毒基因內(nèi)部含有內(nèi)含子;少或無重復(fù)序列;基因組中編碼序列占90%以上;基因組多為單倍體;含有不規(guī)則結(jié)構(gòu)基因病毒基因組結(jié)構(gòu)二、幾種典型的病毒基因組SV40病毒基因組:又稱為猴猿病毒40,分離于猴腎細(xì)胞。雙鏈環(huán)狀DNA。引起細(xì)胞空泡變性或誘發(fā)肉瘤。是分子病毒學(xué)研究的工具。SV40病毒轉(zhuǎn)錄后加工二、幾種典型的病毒
8、基因組腺病毒基因組:線狀