家兔胃酸分泌的調節(jié)

家兔胃酸分泌的調節(jié)

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1、家兔胃液分泌的調節(jié)一、實驗目的本實驗采用麻醉狀態(tài)下家兔灌流方法,測定胃酸排除量,觀察各種因素對胃酸分泌的影響并掌握其作用途徑。二、實驗原理胃粘膜有許多腺體。胃底和胃體粘膜的腺體分泌胃蛋白酶和鹽酸,一般所稱的胃液,就是指這部分液體。在一般情況下,胃液的分泌受神經與體液的調節(jié)。胃液中主要成分是鹽酸(胃酸)和胃蛋白酶,進行胃酸測量,可以了解胃的消化腺的分泌情況。在正常生理情況下,胃酸的分泌處于相對穩(wěn)定的狀態(tài)。這是神經和體液多種因素中促進分泌的因素與抑制分泌的因素之間協(xié)同作用的結果。胃受交感神經和副交感神經的共同支配。交感神經的作用是抑制胃的興奮,減少胃酸的分泌,抑制胃的運動。副交感神

2、經對胃的運動和胃酸的分泌起興奮作用。交感神經來自腹腔神經節(jié),去甲腎上腺素是支配胃的交感神經節(jié)后纖維釋放的神經遞質。乙酰膽堿是支配胃的迷走神經節(jié)后纖維釋放的神經遞質,可直接作用于壁細胞上的M3受體,引起胃酸的分泌,還可以促進釋放組胺和促胃泌素間接增加胃酸的分泌。去甲腎上腺素、乙酰膽堿都是通過與其特異性受體結合而進行胃酸分泌調節(jié)。阿托品能競爭性拮抗M膽堿受體,酚妥拉明能競爭性地阻斷α受體。本實驗通過阻斷相應的受體,觀察胃液分泌的變化。三、實驗器材與藥品兔手術臺,哺乳動物手術器械1套,食管插管,氣管插管,幽門插管,靜脈插管,三通管,輸液架,輸液瓶及輸液管,微量滴管,三角瓶,棉簽,縫合

3、針及縫合線,有色絲線,注射器(20ml)及針頭,一次性使用外周神經叢刺激針,生理鹽水,1g/L阿托品,10g/L酚妥拉明,20%烏拉坦,0.01mol/LNaOH溶液,1%酚紅。四、實驗對象取經12h禁食不禁水的家兔一只,體重2.0~3.0kg,雌雄不拘。五、實驗步驟與觀察項目1、手術操作(1)麻醉與固定:家兔稱重,耳緣靜脈緩慢注射20%烏拉坦溶液5ml/kg,注射時應密切觀察動物的肌張力、心跳、呼吸、瞳孔大小和角膜反射、皮膚夾捏的疼痛反應等。麻醉完將動物仰臥固定于手術臺上,注意頸部要放正。(2)氣管插管:剪去頸部的毛,自甲狀軟骨到胸骨上方沿正中線切開皮膚及皮下組織(切口長5~

4、7cm),分離皮下組織和肌肉,暴露氣管,氣管下方穿線,在甲狀軟骨下方的氣管上做一倒“T”形切口,插入氣管插管后結扎固定。(3)右頸外靜脈插管:將氣管兩旁的肌肉拉開,用左手拇指和食指捏住頸部左側緣皮膚切口,其余三指從皮膚外向上頂起外翻,可清晰的看見位于頸部皮下,胸骨乳突肌外緣的頸外靜脈。沿血管走向,用玻璃分針鈍性分離頸外靜脈二側的皮下筋膜,仔細分離3~5cm長,在血管的遠心端穿絲線,在靠近鎖骨端用動脈夾夾閉頸外靜脈的近心端,待血管內血液充盈后用手術線結扎頸外靜脈的遠心端。靠遠心端結扎線處用眼科剪向心方向呈45o角在靜脈上剪一“V”型小口(約為管徑的1/3或1/2),用彎型眼科鑷挑

5、起血管切口,向心插入導管2.5cm。用線將血管和插管結扎在一起,此線在導管固定處打一活結,繞導管二圈打結固定。緩慢輸生理鹽水,以維持體液量。注意插管前應排空管道中氣泡,插管前端須安置三通管供注射藥物。(4)食管插管:鈍性分離氣管下方的食管(切勿損傷頸部神經),剪開食管并插入食管插管至胃,用絲線固定食管插管。(5)幽門插管:沿劍突下方正中線切開腹部皮膚肌肉(切口長約2cm,打開腹腔,輕輕拉出十二指腸),在距胃幽門約1.5cm處結扎十二指腸幽門端的絲線,打一個松結備用。在兩線之間剪開十二指腸,并將幽門插管插入胃內,立即結扎固定,盡量不要用插管刺激胃壁。(6)用手指輕輕觸摸胃,檢查胃

6、內是否有食物殘渣,若胃內有固體物,則要在胃大彎側切開胃體,取出胃內食物團,并用蘸有溫熱生理鹽水的棉簽將胃內食物殘渣清除干凈,然后縫合胃切口。(7)用少許37℃生理鹽水從食管插管注入胃內,用手指輕壓胃體,觀察幽門插管出口是否通暢、流出液有無食物殘渣和血液,如出口通暢即手術成功。(8)分離腹腔神經節(jié)和迷走神經,分離后分別在各神經節(jié)下方穿不同顏色的線以備用。(9)將家兔體位由仰臥位改為側臥位,在手術后20~30min后開始測定胃酸分泌情況。2、觀察項目(1)用注射器將37℃生理鹽水10ml從食管插管注入胃內,同時用三角瓶收集幽門插管流出的液體,每10min注入一次并收集樣品。在每個樣

7、品中加入酚紅1~2滴,用0.01mol/LNaOH溶液滴定至剛好變色,按下式即可計算出每10min胃酸排出量:10min胃酸排出量(μmol/10min)=中和胃酸用去NaOH量(ml)×濃度(mol/L)×10(2)基礎胃酸分泌量測定:收集并測定3個以上胃酸樣品,待連續(xù)3個樣品數值接近后,即可進行下列實驗。(3)連續(xù)收集5個樣品并測定其排酸量作為實驗對照,再靜脈推注1g/L的阿托品0.1ml/kg,連續(xù)收集5個樣品,測定其胃酸排出量。(4)在收集對照樣品后,靜脈推注10g/L酚妥拉明0.1

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