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《血清胃蛋白酶原的檢測和臨床應(yīng)用》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在應(yīng)用文檔-天天文庫。
1、血清胃蛋白酶原的檢測和臨床應(yīng)用山東省千佛山醫(yī)院檢驗(yàn)科業(yè)務(wù)講座課件（2011.02.06）姜新民胃癌是我國常見的惡性腫瘤之一，其病死率在常見惡性腫瘤中居第二位。目前診斷胃癌的主要方法是鋇餐X線檢查和內(nèi)窺鏡檢查，這兩種檢查都需要大型醫(yī)療設(shè)備和專職人員，耗時(shí)、費(fèi)力、費(fèi)用高，不適于大批量普查和隨時(shí)檢查。胃癌的發(fā)展過程：慢性非萎縮性胃炎→萎縮性胃炎→腸化生→異型增生→腸型胃癌。萎縮性胃炎是胃癌的主要癌前狀態(tài)，約80%的中至重度萎縮性胃炎患者可檢測到幽門螺旋菌感染（HP)，世界衛(wèi)生組織已經(jīng)將其列為人類胃癌的肯定致癌原
2、。胃蛋白酶原早在19世紀(jì)初期，科研人員在胃液中發(fā)現(xiàn)一種可以分解蛋白質(zhì)的物質(zhì)故命名為胃蛋白酶。半世紀(jì)后研究發(fā)現(xiàn)，胃蛋白酶是以無活性的酶原的形式分泌，以保護(hù)胃組織不受損傷，稱其為胃蛋白酶原（pepsinogen,PG）。經(jīng)過大量、長期、深入的研究，人們對其不斷產(chǎn)生新的認(rèn)識，并研制出各種測定方法應(yīng)用于臨床。胃蛋白酶原胃蛋白酶原（PG)是胃蛋白酶的前體，屬于天冬氨酸酶家族，由375個(gè)氨基酸組成，分子量42KD。用瓊脂糖電泳可將PG分為7個(gè)區(qū)帶，從陽極到陰極按遷移速率為PG1-7.根據(jù)免疫反應(yīng)性差異，又將這7種分為
3、二大類，PG1-5免疫原性相似稱為PGⅠ，PG6-7稱為PGⅡ。二者氨基酸排序有50%相同，但沒有共同抗原性。兩類胃蛋白酶原生化性質(zhì)也有差異，其激活的最適pH分別為1.5-2.0和3.2，PGⅠ對堿性產(chǎn)生的變性較PGⅡ敏感，二者在pH﹥5時(shí)失活、pH﹥7.2或溫度大于65℃時(shí)發(fā)生不可逆的變性。胃蛋白酶原PGⅠ主要由胃體和胃底粘膜的主細(xì)胞和粘液頸細(xì)胞分泌，PGⅡ除此之外還可由幽門腺、賁門腺和十二指腸的Brunner腺分泌。引起胃蛋白酶原分泌最強(qiáng)的刺激是膽堿能神經(jīng)的興奮，分泌細(xì)胞受刺激時(shí)大量釋放，胃泌素和組胺
4、以及注射胰島素引發(fā)低血糖時(shí)也可刺激分泌，安靜狀態(tài)下是以恒定的速率持續(xù)少量分泌，分泌有以顆粒形式釋放和非顆粒形式直接釋放。研究表明，HP可誘導(dǎo)胃粘膜細(xì)胞分泌胃蛋白酶原。具有抑制胃酸分泌作用的藥物均可使胃蛋白酶原的分泌減少。胃蛋白酶無活性的胃蛋白酶原在酸性環(huán)境下和（或）自身的催化作用下，從氨基末端斷裂一段42-44個(gè)氨基酸殘基的肽段，轉(zhuǎn)變?yōu)橛写呋钚缘奈傅鞍酌?，分子?5KD。胃蛋白酶為內(nèi)切酶，可分解大部分蛋白質(zhì)為眎和胨，產(chǎn)生多肽和氨基酸較少。主要水解苯丙氨酸、酪氨酸、蛋氨酸或亮氨酸等殘基組成的肽鍵，對谷氨酸
5、組成的肽鏈也有作用。胃蛋白酶的最適pH2-3.5.胃蛋白酶原的檢測上世紀(jì)80年代日本最早報(bào)道建立PGⅠ和PGⅡ檢測，使用最早的方法學(xué)主要以放免法和酶免法，后來又有時(shí)間分辨熒光免疫分析。這些方法的靈敏度和特異性較好，適合于大批量標(biāo)本的檢測，并多為繁瑣的手工操作。另外，放免法的同位素污染和半衰期的限制以及需要特定的計(jì)數(shù)儀，時(shí)間分辨熒光免疫分析也需要特定的檢測儀等因素也限制了其在臨床的應(yīng)用。近幾年推出的膠乳增強(qiáng)免疫比濁測定法，具有與上述方法相同的靈敏度和特異性，可在任意一臺生化分析儀上檢測，方便、快捷、穩(wěn)定的定
6、量測定PGⅠ和PGⅡ含量，并計(jì)算PGⅠ/PGⅡ比值，自動(dòng)化程度高、試劑易保存、無放射性污染，適合于各種年齡、各種體質(zhì)的患者，可與其他生化項(xiàng)目組合，既可以單個(gè)標(biāo)本隨時(shí)測定，又適合于大批量普查。免疫組化染色可檢測胃粘膜中胃蛋白酶原。胃蛋白酶原檢測的臨床應(yīng)用胃粘膜產(chǎn)生的胃蛋白酶原大部分進(jìn)入胃腔，約1%透過胃粘膜毛細(xì)血管進(jìn)入血液循環(huán)，正常人血清中PGⅠ是PGⅡ的6倍。由于胃幾乎是胃蛋白酶原的唯一來源，檢測血清胃蛋白酶原含量可反映胃粘膜的分泌水平，推斷不同部位胃粘膜的形態(tài)和功能。尿中可檢測到少量PGⅠ,精液中可檢測
7、到少量PGⅡ，因前列腺可有少量表達(dá)。與幽門螺桿菌感染的關(guān)系早期HP感染可刺激胃竇部G細(xì)胞分泌胃泌素，胃泌素分泌的增多刺激了胃蛋白酶原的分泌，雖然PGⅠ和PGⅡ均升高，但PGⅠ不如PGⅡ升高明顯，因此PGⅠ/PGⅡ的比值下降。大量PG進(jìn)入胃腔，遇酸活化形成胃蛋白酶，對粘膜造成損傷和破壞，促進(jìn)胃粘膜炎癥和潰瘍的形成，繼續(xù)發(fā)展成胃粘膜萎縮、腸上皮化生、甚至胃癌，此時(shí)PG測定的高低不能完全反映HP對胃粘膜的影響，所以測定血清胃蛋白酶原對HP感染早期的意義明顯優(yōu)于晚期粘膜發(fā)生較大變化時(shí)的意義。但是，血清PGⅡ水平會(huì)
8、隨著HP的清除而降低，這對判斷治療效果具有意義。淺表性胃炎早期淺表性胃粘膜的炎癥反應(yīng)，一方面刺激主細(xì)胞分泌胃蛋白酶原并使胃酸和胃泌素增加，二者又可刺激胃蛋白酶原的分泌；另一方面炎癥和粘膜的反應(yīng)可造成主細(xì)胞的損傷，使其分泌胃蛋白酶原的能力下降。糜爛性胃炎的胃粘膜增生、再生和炎細(xì)胞浸潤，使損傷的胃粘膜通透性增加，滲入血液中的胃蛋白酶原增加。測定血清中胃蛋白酶原水平可反映胃粘膜組織學(xué)狀態(tài)。淺表性胃炎患者血清胃蛋白酶原水平升高，其中P
