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《海蜇活性肽的制備及降血壓效果的研究》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫(kù)。
1、989585分類號(hào)⑧研究生學(xué)位論文海蜇活性肽的制備及降血壓效果的研究研究生姓名窒掛歪指導(dǎo)教師姓名拄湛夔授申請(qǐng)學(xué)位囊剮一亟土專業(yè)名稱壅左晶拋王皇壁疊論文答辯日期至鯉§生墨且至2目學(xué)位授予日期至鯉曼笙墾且中國(guó)海洋大學(xué)摘要本文對(duì)新鮮海蜇的頭部和腕部進(jìn)行了一般成分和氨基酸成分的分析,海蜇的蛋白占其干重的50%,其氨基酸成分種類齊全,必須氨基酸含量豐富。分別用酸性蛋白酶、中型蛋白酶、堿性蛋白酶、冒蛋白酶胰、蛋白酶以及復(fù)合酶對(duì)海蜇的蛋白部分進(jìn)行了酶解,并根據(jù)酶解后對(duì)ACE抑制活性的強(qiáng)弱,選擇出堿性蛋白酶為制備ACE抑制肽的最佳水解酶。通過(guò)正交試驗(yàn),確定出堿性蛋白酶酶解的最適反應(yīng)條件為酶
2、用量為2%,反應(yīng)溫度為50。C,pH值為9,底物濃度為4%,反應(yīng)后的水解度為41.8%,酸溶性肽為31.3mg/ml。并對(duì)測(cè)定海蜇水解液脫苦、調(diào)味、殺菌后ACE的抑制活性沒(méi)有改變。對(duì)海蟄水解液進(jìn)行超濾膜分離,選用截流分子量為2500和250的膜進(jìn)行分離出三個(gè)部分,結(jié)果表明,分子量在250--2500之間的組分對(duì)ACE的抑制活性最強(qiáng)并動(dòng)物試驗(yàn)中效果明顯,再用SephedexG--15凝膠過(guò)濾對(duì)其進(jìn)一步分離,分離出對(duì)ACE抑制活性較強(qiáng)的組分Ⅲ、組分Ⅳ,進(jìn)行抗消化實(shí)驗(yàn)和氨基酸組成分析,組分III、組分Ⅳ被消化酶處理后,活性下降不大,保持較高的ACE抑制活性。組分IⅡ主要包括Pro
3、、ryr、Leu、Gly、Lys、Glu6種氨基酸;組分Ⅳ主要包括Tyr、Val、Met、Glu、Gly5種氨基酸。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)主要研究了海蜇中降壓肽對(duì)腎動(dòng)脈狹窄和L—NNA藥物兩種高血壓模型的血壓和心率的影響。腎動(dòng)脈狹窄型組灌胃和L—NNA藥物組的最小有效分別為0.69/Kg和0.Se/Kg。腎動(dòng)脈狹窄型動(dòng)物灌胃最小有效劑量的海蜇降壓肽其血壓下降為22/16mmHg(收縮壓/舒張壓),持續(xù)時(shí)間為4小時(shí),同樣條件,L~NNA藥物組血壓下降15/8mmHg(收縮壓/舒張壓),持續(xù)時(shí)間為6小時(shí)。并且在海蜇降壓肽降壓過(guò)程中,對(duì)心率也有一定的平穩(wěn)作用。由LD50毒理試驗(yàn),海蜇降壓肽LD
4、50均大于109爪g.bw。根據(jù)急性毒性分級(jí),海蟄降壓肽屬于實(shí)際無(wú)毒物質(zhì)。關(guān)鍵詞:海蜇血管緊張素酶抑制肽制備降血壓StudyontheactiVepeptidett啉,/el/yfishanditseffectofdecreasingbIoodpressureAbstractThecommoncomponentandthecompositionofproteinoftheumbrellaandoralarmsoffleshJellyfisharedetectedandanalyzedinthisarticle.TheproteinofJellyfishisthehalfof
5、thewholedryweightandincludeskindsofaminoacidsandabundantnecessaryaminoacids.Acidicprotease.a(chǎn)lkalineprotease.neutralprotease.trypsin.pepsinandthecompoundin.goftwoofthemwereusedtohydrolyzejellyfish,respectively.AccordingtoinhibitoryactivityagainstangiotensinI—ConvertingEnzyme(ACE)ofhydrolysa
6、tesandeconomicbenefitalkalineproteasewasselectedfortheproperenzymestoprepareACEinhibitorypeptides.Inordertolookfortheoptimalhydrolysisconditionsofalkalineprotease,orthogonalexperimentwereprocessed.AfteranalyzingtheinhibitoryactivityagainstangiotensinI-Convertingenzyme(ACE)ofhydrolysates.th
7、eoptimalhydrolysisconditionswereascertained,ratioofenzymeandsubstrateis2%,theoptimalhydrolysistemperatureis50。C,theoptimalpHis9,concentrationofsubstrateis4%。Andthehydrolysisratiois41.8%,acid-solubleproteinis3I.3mg/m1.moreover,theinhibitoryactivityagainstangiot