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《海蜇活性肽的制備及降血壓效果的研究》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、989585分類號⑧研究生學(xué)位論文海蜇活性肽的制備及降血壓效果的研究研究生姓名窒掛歪指導(dǎo)教師姓名拄湛夔授申請學(xué)位囊剮一亟土專業(yè)名稱壅左晶拋王皇壁疊論文答辯日期至鯉§生墨且至2目學(xué)位授予日期至鯉曼笙墾且中國海洋大學(xué)摘要本文對新鮮海蜇的頭部和腕部進行了一般成分和氨基酸成分的分析,海蜇的蛋白占其干重的50%,其氨基酸成分種類齊全,必須氨基酸含量豐富。分別用酸性蛋白酶、中型蛋白酶、堿性蛋白酶、冒蛋白酶胰、蛋白酶以及復(fù)合酶對海蜇的蛋白部分進行了酶解,并根據(jù)酶解后對ACE抑制活性的強弱,選擇出堿性蛋白酶為制備ACE抑制肽的最佳水解酶。通過正交試驗,確定出堿性蛋白酶酶解的最適反應(yīng)條件為酶
2、用量為2%,反應(yīng)溫度為50。C,pH值為9,底物濃度為4%,反應(yīng)后的水解度為41.8%,酸溶性肽為31.3mg/ml。并對測定海蜇水解液脫苦、調(diào)味、殺菌后ACE的抑制活性沒有改變。對海蟄水解液進行超濾膜分離,選用截流分子量為2500和250的膜進行分離出三個部分,結(jié)果表明,分子量在250--2500之間的組分對ACE的抑制活性最強并動物試驗中效果明顯,再用SephedexG--15凝膠過濾對其進一步分離,分離出對ACE抑制活性較強的組分Ⅲ、組分Ⅳ,進行抗消化實驗和氨基酸組成分析,組分III、組分Ⅳ被消化酶處理后,活性下降不大,保持較高的ACE抑制活性。組分IⅡ主要包括Pro
3、、ryr、Leu、Gly、Lys、Glu6種氨基酸;組分Ⅳ主要包括Tyr、Val、Met、Glu、Gly5種氨基酸。動物實驗主要研究了海蜇中降壓肽對腎動脈狹窄和L—NNA藥物兩種高血壓模型的血壓和心率的影響。腎動脈狹窄型組灌胃和L—NNA藥物組的最小有效分別為0.69/Kg和0.Se/Kg。腎動脈狹窄型動物灌胃最小有效劑量的海蜇降壓肽其血壓下降為22/16mmHg(收縮壓/舒張壓),持續(xù)時間為4小時,同樣條件,L~NNA藥物組血壓下降15/8mmHg(收縮壓/舒張壓),持續(xù)時間為6小時。并且在海蜇降壓肽降壓過程中,對心率也有一定的平穩(wěn)作用。由LD50毒理試驗,海蜇降壓肽LD
4、50均大于109爪g.bw。根據(jù)急性毒性分級,海蟄降壓肽屬于實際無毒物質(zhì)。關(guān)鍵詞:海蜇血管緊張素酶抑制肽制備降血壓StudyontheactiVepeptidett啉,/el/yfishanditseffectofdecreasingbIoodpressureAbstractThecommoncomponentandthecompositionofproteinoftheumbrellaandoralarmsoffleshJellyfisharedetectedandanalyzedinthisarticle.TheproteinofJellyfishisthehalfof
5、thewholedryweightandincludeskindsofaminoacidsandabundantnecessaryaminoacids.Acidicprotease.a(chǎn)lkalineprotease.neutralprotease.trypsin.pepsinandthecompoundin.goftwoofthemwereusedtohydrolyzejellyfish,respectively.AccordingtoinhibitoryactivityagainstangiotensinI—ConvertingEnzyme(ACE)ofhydrolysa
6、tesandeconomicbenefitalkalineproteasewasselectedfortheproperenzymestoprepareACEinhibitorypeptides.Inordertolookfortheoptimalhydrolysisconditionsofalkalineprotease,orthogonalexperimentwereprocessed.AfteranalyzingtheinhibitoryactivityagainstangiotensinI-Convertingenzyme(ACE)ofhydrolysates.th
7、eoptimalhydrolysisconditionswereascertained,ratioofenzymeandsubstrateis2%,theoptimalhydrolysistemperatureis50。C,theoptimalpHis9,concentrationofsubstrateis4%。Andthehydrolysisratiois41.8%,acid-solubleproteinis3I.3mg/m1.moreover,theinhibitoryactivityagainstangiot