0000006a_海參皂苷活性成分研究

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1、海參皂昔活性成分研究易楊華,李玲二孫鵬,劉寶姝,張淑瑜,巫軍,張詩龍,韓華,閆冰,王曉華,翁怡毅(第二軍醫(yī)大學藥學院海洋藥物研究中心上海200433)(Email:lilingly@holmail.com,021-25074466-801)[摘要]目的:研究方柱五角瓜參(PentactaquadrangulasisLesson)>一色桌片參(MensamariainteccedensLampert)黑乳海參(HolothurianobilisSelenka)^黃疣海參(HolothuriahillaLesson)>紫偽嵬手參(Pseudocolochirusviol

2、aceusTheel)>棕環(huán)海參(HolothuriafuscocinereaJaeger)糙海參(HolothuriascabraJaeger)>花刺參(StichopusvariegatusSemper)、子安輻肛參(Actinopygalecanora)裸五角瓜參(Acolochirusinornatus)、蚓參(HolothuriaarenicolaSemper)、IL海參(Holothuriaimpaliens)、白底輻月「參(Actinopygamauritiana)和玉足海參(Holothurialeucospilota)的三禍皂昔類活性成分。方法:以

3、稻瘟每活性篩選模型作為活性監(jiān)測手段,應用正相、反相硅膠色譜、葡?聚糖凝膠過濾以及高效液相色譜等多種現(xiàn)代色譜分離技術,對采自我國海域的上述14種海參中所含的皂昔類成分進行了系統(tǒng)活性追蹤分離;應用現(xiàn)代波譜技術('HNMR,,3CNMR,DEPT,'H^HCOSY,DQCOSY,TOCSY,HMQC,HMBC,NOESY,ESI-MS,MS/MS,HRESI-MS等)和化學手段進行結(jié)構測定以及部分藥理實驗。結(jié)果:分離鑒定了117個三祈皂昔類化合物。結(jié)論:發(fā)現(xiàn)69個新化合物,這些三祜皂昔具有多種較強的生物活性。[關鍵詞]海參皂昔;牛物活性,細胞毒,抗真菌海參屬棘皮動物門海參

4、綱動物,棲居海底,分布廣泛,全世界品種總數(shù)達900余種,我國沿海海域約140利J海參美味可口,營養(yǎng)豐富,具有較高的藥用價值,在我國一向被視為佐膳珍品。明代以后,海參收入《木草綱1=1拾遺》列為補益藥。據(jù)資料記載,海參具有補益精腎、養(yǎng)血潤燥等功用。長期以來,海參奇特的藥理作用引起了國內(nèi)外學者的廣泛重視。經(jīng)過近半個世紀廣泛而深入的研究,發(fā)現(xiàn)海參體壁、體腔、內(nèi)腺管及內(nèi)臟均含冇多種生物活性物質(zhì),如海參皂廿、粘多糖及脂類籌成分。海參皂廿是海參體內(nèi)主要的次生代謝產(chǎn)物,迄今為止,國內(nèi)外發(fā)現(xiàn)并確定結(jié)構的海參皂苗有100多種?,F(xiàn)代藥理研究結(jié)果顯示,海參皂昔具有廣泛的藥理活性,具有抗有

5、絲分裂、抗病毒、抗真菌、抗輻射、抗腫瘤等藥理活性,己成為研制開發(fā)新藥的一個來源。近十年來,我們研究中心對多種海參進行了系統(tǒng)的化學成分研究,從中提取分離得到大屋的羊毛笛醇型海參三菇皂苻,其中有不少是新化合物。經(jīng)過多年的研究,課題組己經(jīng)拿握了成熟的海參皂昔單體化合物的分離純化路線和活性研究方法,在國內(nèi)外重要刊物上發(fā)表論文三十余篇。目前國內(nèi)冇關單體海參皂昔的研究報道主要來自于本研究中心。1材料和方法1.1儀器和試劑北京市科儀電光儀器廠XT5顯微熔點測定儀(溫度未校止);BrukerVector22型紅外光譜儀;VarianInova-600核磁共振儀;Quatrro質(zhì)譜儀

6、Micromass公司;SephadexLH-20為Pharmacia公司產(chǎn)品;煙臺芝宋黃務硅膠開發(fā)試驗廠層析用硅膠和HSGF254硅膠預制板;HPLC:Aglient1100Series,RID檢測器Aglient公司;反相柱為Zobrax300SB-C1&9.4x250mmZorbax公司;洗脫劑為色譜純甲醇;其余試劑均為分析純。1.2實驗材料二色桌片參采自于福建省詔女海域,紫偽翼手參、花刺參、蚓參和玉足海參釆自海南三亞海域,黑乳海參、疣海參和糙海參采口福建東山,方柱五角瓜參、子安輻肚參和棕環(huán)海參采口廣東湛江,裸五角瓜參采口舟山海域,迫海參和口底輻肛參采口海南島

7、。以上14種海參的種屬鑒定由廈門國家海洋三所易瑞灶教授和中國科學院海洋研究所廖玉麟研究員完成,標本現(xiàn)存放于上海第二軍醫(yī)大學海洋藥物研究中心。1.3提取和分離將海參材料洗凈,切碎,用60%~85%的乙醇冷浸提取,回收乙醇得流浸膏。將浸膏均勻分散于水中,依次用石油瞇、二氯甲烷、止丁醇萃取,取止丁醇部位,回收溶劑得到海參總皂甘。采用多種層析、分離純化技術,如人孔吸附樹脂柱層析,正相硅膠柱層析,SephadexLH-20?聚糖凝膠柱層析,RP-C18反相硅膠柱層析,所得化合物,再進行高效液相柱層析純化,層析柱為ZobraxSBC-18型ODS反相柱,洗脫劑為不同濃度甲醉

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