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《0000006a_海參皂苷活性成分研究》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、海參皂昔活性成分研究易楊華,李玲二孫鵬,劉寶姝,張淑瑜,巫軍,張?jiān)婟?,韓華,閆冰,王曉華,翁怡毅(第二軍醫(yī)大學(xué)藥學(xué)院海洋藥物研究中心上海200433)(Email:lilingly@holmail.com,021-25074466-801)[摘要]目的:研究方柱五角瓜參(PentactaquadrangulasisLesson)>一色桌片參(MensamariainteccedensLampert)黑乳海參(HolothurianobilisSelenka)^黃疣海參(HolothuriahillaLesson)>紫偽嵬手參(Pseudocolochirusviol
2、aceusTheel)>棕環(huán)海參(HolothuriafuscocinereaJaeger)糙海參(HolothuriascabraJaeger)>花刺參(StichopusvariegatusSemper)、子安輻肛參(Actinopygalecanora)裸五角瓜參(Acolochirusinornatus)、蚓參(HolothuriaarenicolaSemper)、IL海參(Holothuriaimpaliens)、白底輻月「參(Actinopygamauritiana)和玉足海參(Holothurialeucospilota)的三禍皂昔類活性成分。方法:以
3、稻瘟每活性篩選模型作為活性監(jiān)測手段,應(yīng)用正相、反相硅膠色譜、葡?聚糖凝膠過濾以及高效液相色譜等多種現(xiàn)代色譜分離技術(shù),對采自我國海域的上述14種海參中所含的皂昔類成分進(jìn)行了系統(tǒng)活性追蹤分離;應(yīng)用現(xiàn)代波譜技術(shù)('HNMR,,3CNMR,DEPT,'H^HCOSY,DQCOSY,TOCSY,HMQC,HMBC,NOESY,ESI-MS,MS/MS,HRESI-MS等)和化學(xué)手段進(jìn)行結(jié)構(gòu)測定以及部分藥理實(shí)驗(yàn)。結(jié)果:分離鑒定了117個(gè)三祈皂昔類化合物。結(jié)論:發(fā)現(xiàn)69個(gè)新化合物,這些三祜皂昔具有多種較強(qiáng)的生物活性。[關(guān)鍵詞]海參皂昔;牛物活性,細(xì)胞毒,抗真菌海參屬棘皮動(dòng)物門海參
4、綱動(dòng)物,棲居海底,分布廣泛,全世界品種總數(shù)達(dá)900余種,我國沿海海域約140利J海參美味可口,營養(yǎng)豐富,具有較高的藥用價(jià)值,在我國一向被視為佐膳珍品。明代以后,海參收入《木草綱1=1拾遺》列為補(bǔ)益藥。據(jù)資料記載,海參具有補(bǔ)益精腎、養(yǎng)血潤燥等功用。長期以來,海參奇特的藥理作用引起了國內(nèi)外學(xué)者的廣泛重視。經(jīng)過近半個(gè)世紀(jì)廣泛而深入的研究,發(fā)現(xiàn)海參體壁、體腔、內(nèi)腺管及內(nèi)臟均含冇多種生物活性物質(zhì),如海參皂廿、粘多糖及脂類籌成分。海參皂廿是海參體內(nèi)主要的次生代謝產(chǎn)物,迄今為止,國內(nèi)外發(fā)現(xiàn)并確定結(jié)構(gòu)的海參皂苗有100多種。現(xiàn)代藥理研究結(jié)果顯示,海參皂昔具有廣泛的藥理活性,具有抗有
5、絲分裂、抗病毒、抗真菌、抗輻射、抗腫瘤等藥理活性,己成為研制開發(fā)新藥的一個(gè)來源。近十年來,我們研究中心對多種海參進(jìn)行了系統(tǒng)的化學(xué)成分研究,從中提取分離得到大屋的羊毛笛醇型海參三菇皂苻,其中有不少是新化合物。經(jīng)過多年的研究,課題組己經(jīng)拿握了成熟的海參皂昔單體化合物的分離純化路線和活性研究方法,在國內(nèi)外重要刊物上發(fā)表論文三十余篇。目前國內(nèi)冇關(guān)單體海參皂昔的研究報(bào)道主要來自于本研究中心。1材料和方法1.1儀器和試劑北京市科儀電光儀器廠XT5顯微熔點(diǎn)測定儀(溫度未校止);BrukerVector22型紅外光譜儀;VarianInova-600核磁共振儀;Quatrro質(zhì)譜儀
6、Micromass公司;SephadexLH-20為Pharmacia公司產(chǎn)品;煙臺芝宋黃務(wù)硅膠開發(fā)試驗(yàn)廠層析用硅膠和HSGF254硅膠預(yù)制板;HPLC:Aglient1100Series,RID檢測器Aglient公司;反相柱為Zobrax300SB-C1&9.4x250mmZorbax公司;洗脫劑為色譜純甲醇;其余試劑均為分析純。1.2實(shí)驗(yàn)材料二色桌片參采自于福建省詔女海域,紫偽翼手參、花刺參、蚓參和玉足海參釆自海南三亞海域,黑乳海參、疣海參和糙海參采口福建東山,方柱五角瓜參、子安輻肚參和棕環(huán)海參采口廣東湛江,裸五角瓜參采口舟山海域,迫海參和口底輻肛參采口海南島
7、。以上14種海參的種屬鑒定由廈門國家海洋三所易瑞灶教授和中國科學(xué)院海洋研究所廖玉麟研究員完成,標(biāo)本現(xiàn)存放于上海第二軍醫(yī)大學(xué)海洋藥物研究中心。1.3提取和分離將海參材料洗凈,切碎,用60%~85%的乙醇冷浸提取,回收乙醇得流浸膏。將浸膏均勻分散于水中,依次用石油瞇、二氯甲烷、止丁醇萃取,取止丁醇部位,回收溶劑得到海參總皂甘。采用多種層析、分離純化技術(shù),如人孔吸附樹脂柱層析,正相硅膠柱層析,SephadexLH-20?聚糖凝膠柱層析,RP-C18反相硅膠柱層析,所得化合物,再進(jìn)行高效液相柱層析純化,層析柱為ZobraxSBC-18型ODS反相柱,洗脫劑為不同濃度甲醉