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1、植物組織中丙二醛含量 的測定一原理植物器官在逆境條件下或衰老時,往往發(fā)生膜脂過氧化作用,丙二醛(MDA)是其中產(chǎn)物之一,通常將其作為脂質過氧化指標,用于表示細胞膜脂過氧化程度和植物對逆境條件反應的強弱。丙二醛(MDA)硫代巴比妥酸(TBA)高溫酸性三甲基復合物(3,5,5-三甲基惡唑2,4-二酮)(紅棕色)上述反應在532nm處有最大吸收波長但此反應受可溶性糖的極大干擾：糖與TBA的反應產(chǎn)物在532nm處也有吸收(糖與TBA反應產(chǎn)物的最大吸收波長在450nm處)＋所以，測定MDA含量時需排除可溶性糖的干擾根據(jù)Lambert-Beer定律,
2、對最大吸收光譜不同的兩個組分的混合液,代入數(shù)值，計算得出混合液中兩種組分的濃度公式：可溶性糖：C1/(mmol/L)=11.71OD450MDA：C2/(μmol/L)=6.45OD532－0.56OD450二材料、儀器設備及試劑(一)材料植物葉片(經(jīng)逆境條件處理)(二)儀器設備研缽,試管,移液管,恒溫水浴鍋,離心機,分光光度計(三)試劑10%三氯乙酸(TCA)0.6%硫代巴比妥酸(TBA)三實驗步驟(1)MDA的提取取0.5g葉片剪碎,加10%TCA2ml和少量石英砂,研磨；進一步加入3mlTCA充分研磨,勻漿液以4000r/min下離
3、心10min,上清液即為提取液。(2)顯色反應及測定吸取上清液2ml,加2ml0.6%TBA,混勻,在沸水浴中煮沸15min,迅速冷卻,在4000r/min下離心5min。取上清液測定532nm和450nm下的OD值。對照以2mlTCA代替提取液。(3)計算按公式計算MDA的含量(μmol/g):MDA含量(μmol/g)=MDA的濃度(μmol/L)×提取液總體積(0.005L)×稀釋倍數(shù)（2）÷質量(0.5g)=C2×0.02四注意事項取上清液時要小心，不要將沉淀取出使用離心機時,一定要注意平衡.返回
