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《膠體金免疫層析法快速檢測黃曲霉毒素B1的研究.pdf》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、2322007,Vol.28,No.02食品科學分析檢測膠體金免疫層析法快速檢測黃曲霉毒素B1的研究鄧省亮賴衛(wèi)華許楊*(南昌大學食品科學教育部重點實驗室江西南昌330047)摘要本文應用膠體金免疫層析技術建立了一種快速檢測食品中黃曲霉毒素B1的方法采用檸檬酸三鈉還原法制備膠體金顆粒標記抗黃曲霉毒素B1單克隆抗體并噴于玻璃纖維上黃曲霉毒素B1偶聯(lián)抗原和二抗鼠抗驢分別結合于硝酸纖維膜上依次將樣本墊膠金墊硝酸纖維膜和吸水紙組裝切割成膠體金試紙條并裝入檢測卡中測試結果表明黃曲霉毒素B1快速檢測試紙條的靈敏度為5ng/ml檢測時間為10min批內
2、和批間重復性為100%假陽性率和假陰性率均為0使用簡單方便非常適合現場快速檢測黃曲霉毒素B1關鍵詞黃曲霉毒素B1膠體金免疫層析試紙條快速檢測StudyonGoldImmunochromatographyAssayforRapidDetectionofAflatoxinB1DENGSheng-liangLAIWei-huaXUYang*(KeyLaboratoryofFoodScience,MinistryofEducation,NanchangUniversity,Nanchang330047,China)AbstractToestab
3、lisharapidassayfordetectionofaflatoxinB1,goldimmunochromatographyassay(GICA)wasstudied.ColloidalgoldmarkedcoupledwithmonoclonalantibodyagainstaflatoxinB1wasjetsprayedontotheglassfiber.AflatoxinB1-BSAandanti-donkeyanti-mouseimmunoglobulinswerejet-positionedontoanitrocellu
4、losemembrane.Samplepad,goldjedpad,nitrocellulosemembraneandabsorbentpaperwereassembledandcutintodetectingcard,respectively.TheresultsshowedthatthesentitivestandardofrapidassayforaflatoxinB1visualdetectionlimitis5ng/mlanddetectiontimewithin10min.Repeatabilityofstripis100%
5、.Theassaygivesnofalsepositiveandfalsenegativeresults.SoitisverysimpleandconvenienttorapidlydetectaflatoxinB1onthespot.KeywordsaflatoxinB1goldimmunochromatographyassaystriprapiddetection中圖分類號TS37文獻標識碼A文章編號1002-6630(2007)02-0232-05黃曲霉毒素B1(aflatoxinB1稱AFB1)是真菌的次級酶聯(lián)免疫吸附法(ELI
6、SA)TLC法雖然具有設備簡單的優(yōu)代謝產物主要是由黃曲霉(Aspergillusflavus)寄生點但其靈敏度低高效液相色譜法具有靈敏度高曲霉(Aspergillusparasiticus)和特曲霉(Aspergillusnomius)分離能力強特異性好和測定結果可靠等特點但如產生[1]它易天然存在于花生棉籽玉米小麥和果食品成分復雜在進行液相色譜分離前需對樣品稻米等農作物中具有強烈的毒性和致癌性它是目作徹底有效的凈化處理不適合于大批量樣品的檢測前化學致癌物中最強的一種致癌誘變劑其毒性比氰化并且設備儀器昂貴不易普及酶聯(lián)免疫吸附法是目鉀強1
7、0倍其致癌性比二甲基亞硝胺強75倍1993年前常使用的一種檢測方法它具有快速靈敏可定黃曲霉毒素被世界衛(wèi)生組織(WHO)的癌癥研究機構劃定量對樣品純度要求不高特別適用于大批量樣品的為類致癌物其作用的靶器官主要為肝臟[2]我國曾檢測但由于需要酶標儀和操作熟練的人員以及檢測時對肝癌高發(fā)區(qū)的江蘇廣西等省連續(xù)多年進行流行病學間相對較長所以不適合現場快速檢測調查和監(jiān)測并在1982年頒布了糧油和發(fā)酵食品中的膠體金免疫層析方法(goldimmunochromatography[3]目前黃曲霉毒素BAFB1允許量標準1的檢測方法assy,GICA)是20
8、世紀80年代發(fā)展起來的一種將膠體金主要包括薄層色譜法(TLC)高效液相色譜法(HPLC)免疫技術和色譜層析技術相結合的固相膜免疫分析方法收稿日期2005-12-22*通訊作者基金項目十五國家重大科技專項(2
