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《膠體金免疫層析法快速檢測(cè)黃曲霉毒素B1的研究.pdf》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫(kù)。
1、2322007,Vol.28,No.02食品科學(xué)分析檢測(cè)膠體金免疫層析法快速檢測(cè)黃曲霉毒素B1的研究鄧省亮賴衛(wèi)華許楊*(南昌大學(xué)食品科學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室江西南昌330047)摘要本文應(yīng)用膠體金免疫層析技術(shù)建立了一種快速檢測(cè)食品中黃曲霉毒素B1的方法采用檸檬酸三鈉還原法制備膠體金顆粒標(biāo)記抗黃曲霉毒素B1單克隆抗體并噴于玻璃纖維上黃曲霉毒素B1偶聯(lián)抗原和二抗鼠抗驢分別結(jié)合于硝酸纖維膜上依次將樣本墊膠金墊硝酸纖維膜和吸水紙組裝切割成膠體金試紙條并裝入檢測(cè)卡中測(cè)試結(jié)果表明黃曲霉毒素B1快速檢測(cè)試紙條的靈敏度為5ng/ml檢測(cè)時(shí)間為10min批內(nèi)
2、和批間重復(fù)性為100%假陽(yáng)性率和假陰性率均為0使用簡(jiǎn)單方便非常適合現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)黃曲霉毒素B1關(guān)鍵詞黃曲霉毒素B1膠體金免疫層析試紙條快速檢測(cè)StudyonGoldImmunochromatographyAssayforRapidDetectionofAflatoxinB1DENGSheng-liangLAIWei-huaXUYang*(KeyLaboratoryofFoodScience,MinistryofEducation,NanchangUniversity,Nanchang330047,China)AbstractToestab
3、lisharapidassayfordetectionofaflatoxinB1,goldimmunochromatographyassay(GICA)wasstudied.ColloidalgoldmarkedcoupledwithmonoclonalantibodyagainstaflatoxinB1wasjetsprayedontotheglassfiber.AflatoxinB1-BSAandanti-donkeyanti-mouseimmunoglobulinswerejet-positionedontoanitrocellu
4、losemembrane.Samplepad,goldjedpad,nitrocellulosemembraneandabsorbentpaperwereassembledandcutintodetectingcard,respectively.TheresultsshowedthatthesentitivestandardofrapidassayforaflatoxinB1visualdetectionlimitis5ng/mlanddetectiontimewithin10min.Repeatabilityofstripis100%
5、.Theassaygivesnofalsepositiveandfalsenegativeresults.SoitisverysimpleandconvenienttorapidlydetectaflatoxinB1onthespot.KeywordsaflatoxinB1goldimmunochromatographyassaystriprapiddetection中圖分類號(hào)TS37文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A文章編號(hào)1002-6630(2007)02-0232-05黃曲霉毒素B1(aflatoxinB1稱AFB1)是真菌的次級(jí)酶聯(lián)免疫吸附法(ELI
6、SA)TLC法雖然具有設(shè)備簡(jiǎn)單的優(yōu)代謝產(chǎn)物主要是由黃曲霉(Aspergillusflavus)寄生點(diǎn)但其靈敏度低高效液相色譜法具有靈敏度高曲霉(Aspergillusparasiticus)和特曲霉(Aspergillusnomius)分離能力強(qiáng)特異性好和測(cè)定結(jié)果可靠等特點(diǎn)但如產(chǎn)生[1]它易天然存在于花生棉籽玉米小麥和果食品成分復(fù)雜在進(jìn)行液相色譜分離前需對(duì)樣品稻米等農(nóng)作物中具有強(qiáng)烈的毒性和致癌性它是目作徹底有效的凈化處理不適合于大批量樣品的檢測(cè)前化學(xué)致癌物中最強(qiáng)的一種致癌誘變劑其毒性比氰化并且設(shè)備儀器昂貴不易普及酶聯(lián)免疫吸附法是目鉀強(qiáng)1
7、0倍其致癌性比二甲基亞硝胺強(qiáng)75倍1993年前常使用的一種檢測(cè)方法它具有快速靈敏可定黃曲霉毒素被世界衛(wèi)生組織(WHO)的癌癥研究機(jī)構(gòu)劃定量對(duì)樣品純度要求不高特別適用于大批量樣品的為類致癌物其作用的靶器官主要為肝臟[2]我國(guó)曾檢測(cè)但由于需要酶標(biāo)儀和操作熟練的人員以及檢測(cè)時(shí)對(duì)肝癌高發(fā)區(qū)的江蘇廣西等省連續(xù)多年進(jìn)行流行病學(xué)間相對(duì)較長(zhǎng)所以不適合現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)調(diào)查和監(jiān)測(cè)并在1982年頒布了糧油和發(fā)酵食品中的膠體金免疫層析方法(goldimmunochromatography[3]目前黃曲霉毒素BAFB1允許量標(biāo)準(zhǔn)1的檢測(cè)方法assy,GICA)是20
8、世紀(jì)80年代發(fā)展起來的一種將膠體金主要包括薄層色譜法(TLC)高效液相色譜法(HPLC)免疫技術(shù)和色譜層析技術(shù)相結(jié)合的固相膜免疫分析方法收稿日期2005-12-22*通訊作者基金項(xiàng)目十五國(guó)家重大科技專項(xiàng)(2
