微生物-實(shí)驗(yàn)二-細(xì)菌的生理分布消毒滅菌.ppt

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1、細(xì)菌的生理、分布、消毒與滅菌一、細(xì)菌的人工培養(yǎng)二、細(xì)菌的分布空氣中細(xì)菌的檢測(cè)咽拭培養(yǎng)三、消毒與滅菌細(xì)菌的人工培養(yǎng)一、常用培養(yǎng)基的制備原則1、培養(yǎng)基的制備原則：①適當(dāng)?shù)臓I(yíng)養(yǎng)成分。②合適的酸堿度。③配制后經(jīng)滅菌后方可使用。2、培養(yǎng)基配制的基本程序按一定配方稱了各種物質(zhì)→溶解→測(cè)定及調(diào)整PH→濾過(guò)→分裝→滅菌、備用。常用培養(yǎng)基的種類1按用途可分為（1）基礎(chǔ)培養(yǎng)基：（2）營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基：（3）鑒別培養(yǎng)基：（4）選擇培養(yǎng)基：（5）厭氧培養(yǎng)基：常用培養(yǎng)基的種類2按物理性狀可分為：1）液體培養(yǎng)基2）固體培養(yǎng)基，在液體培養(yǎng)基中加入2~3%瓊脂，固體培養(yǎng)基

2、傾倒平皿上即成“平板”傾入試管內(nèi)即可制成“斜面培養(yǎng)基3）半固體培養(yǎng)基：當(dāng)液體培養(yǎng)基內(nèi)加入0.2~0.5%瓊脂時(shí)即成之。二、細(xì)菌人工培養(yǎng)的接種方法：（一）細(xì)菌分離培養(yǎng)接種法——平板劃線分離培養(yǎng)法目的：使混雜在一起的細(xì)菌分散生長(zhǎng)。平板區(qū)劃線法培養(yǎng)后菌落的散布情況一個(gè)細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上，經(jīng)過(guò)一定時(shí)間的生長(zhǎng)繁殖之后，所形成的肉眼可見(jiàn)的細(xì)菌集團(tuán)，稱為菌落。很多菌落連在一起，融成一片，稱為菌苔。描述菌落：①大?。阂灾睆剑╩m）表示之，1mm左右為小菌落，2——3mm為中等大菌落，3mm以上為大菌落。②形成：圓形、卵圓形及不規(guī)則形。③邊緣：整齊或不

3、整齊、鋸齒狀、毛發(fā)狀等。④表面：光滑、濕潤(rùn)、皺紋、干燥等。⑤隆起度：扁平、凸起、中心凹陷等。⑥透明度：透明、半透明、不透明。⑦顏色：無(wú)色、白色、黃色等。⑧溶血性：在血平板上產(chǎn)生溶血毒素的細(xì)菌，可以使培養(yǎng)基中的紅細(xì)胞破壞溶解，可分為完全溶血、草綠色溶血及不溶血（二）細(xì)菌純培養(yǎng)接種法目的：測(cè)試其生物學(xué)性狀、保種等。方法：斜面培養(yǎng)基接種液體培養(yǎng)基接種穿刺接種法斜面培養(yǎng)基接種法斜面上生長(zhǎng)狀態(tài)觀察：可見(jiàn)有均勻一致的菌苔，如有不同的菌落出現(xiàn)，則表明污染了雜菌。液體培養(yǎng)基接種法液體培養(yǎng)基中生長(zhǎng)狀態(tài)觀察：示培養(yǎng)前的液體培養(yǎng)基多為清徹透明的。接種細(xì)菌后

4、，由于細(xì)菌種類不同，可有以下三種生長(zhǎng)形式。①混濁：液體變?yōu)榛鞚?。②菌膜：液體澄清，表面有一薄膜。③沉淀：管底有沉淀物。半固體培養(yǎng)基接種方法半固體中生長(zhǎng)狀態(tài)觀察：無(wú)鞭毛（無(wú)運(yùn)動(dòng)）的細(xì)菌，經(jīng)培養(yǎng)后僅沿穿刺線生長(zhǎng)，培養(yǎng)基清亮。有運(yùn)動(dòng)的細(xì)菌，沿穿刺線向外擴(kuò)散，穿刺線摸糊不清，培養(yǎng)基混濁?？諝庵屑?xì)菌的檢測(cè)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c原理二、實(shí)驗(yàn)材料三、實(shí)驗(yàn)方法咽拭培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c原理二、實(shí)驗(yàn)材料血平板、棉簽三、實(shí)驗(yàn)方法紫外線的殺菌作用一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c原理了解紫外線對(duì)不同種細(xì)菌的殺菌作用及紫外線的穿透力。紫外線的殺菌波長(zhǎng)范圍為240—280nm，265~2

5、66nm的作用最強(qiáng)。其主要是使DNA上相鄰的嘧啶通過(guò)共價(jià)鍵結(jié)合形成二聚體，影響DNA的正常鹼基配對(duì)。紫外線的穿透力很弱，其殺菌只限于表面的照射。二、實(shí)驗(yàn)材料1、菌種：2、培養(yǎng)基：瓊脂平板3、紙片、鑷子及紫外線燈等三、實(shí)驗(yàn)方法1、涂平板。2、打開(kāi)皿蓋，蓋紙片。3、紫外線照射30分鐘。4、取掉紙片，蓋好皿蓋，37℃孵育24小時(shí)，觀察生長(zhǎng)情況。皮膚消毒前后的細(xì)菌學(xué)檢查一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c原理觀察消毒劑的消毒效果二、實(shí)驗(yàn)材料1、2%碘酒，75%酒精2、瓊脂平板三、實(shí)驗(yàn)方法細(xì)菌對(duì)抗生素的敏感性測(cè)定一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c原理了解藥物敏感性試驗(yàn)方法及實(shí)踐中的重要

6、意義二、實(shí)驗(yàn)材料1、菌種：金黃色葡萄球菌6—8小時(shí)肉湯培養(yǎng)物。2、培養(yǎng)基：普遍瓊脂平板。3、抗生素：含各種抗生素干燥濾紙片、小鑷子、米尺等。三、實(shí)驗(yàn)方法細(xì)菌對(duì)抗生素的敏感試驗(yàn)（紙片法）四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果抑菌圈細(xì)菌對(duì)藥物敏感時(shí)，在該藥紙片周圍無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)（該區(qū)稱抑菌環(huán)）。細(xì)菌對(duì)藥物不敏感，藥紙片周圍有菌生長(zhǎng)一般認(rèn)為抑菌環(huán)直徑6—10mm為低度敏感；10—15mm為中度敏感，15mm以上為高度敏感。