微生物-實驗二-細(xì)菌的生理分布消毒滅菌.ppt

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1、細(xì)菌的生理、分布、消毒與滅菌一、細(xì)菌的人工培養(yǎng)二、細(xì)菌的分布空氣中細(xì)菌的檢測咽拭培養(yǎng)三、消毒與滅菌細(xì)菌的人工培養(yǎng)一、常用培養(yǎng)基的制備原則1、培養(yǎng)基的制備原則:①適當(dāng)?shù)臓I養(yǎng)成分。②合適的酸堿度。③配制后經(jīng)滅菌后方可使用。2、培養(yǎng)基配制的基本程序按一定配方稱了各種物質(zhì)→溶解→測定及調(diào)整PH→濾過→分裝→滅菌、備用。常用培養(yǎng)基的種類1按用途可分為(1)基礎(chǔ)培養(yǎng)基:(2)營養(yǎng)培養(yǎng)基:(3)鑒別培養(yǎng)基:(4)選擇培養(yǎng)基:(5)厭氧培養(yǎng)基:常用培養(yǎng)基的種類2按物理性狀可分為:1)液體培養(yǎng)基2)固體培養(yǎng)基,在液體培養(yǎng)基中加入2~3%瓊脂,固體培養(yǎng)基

2、傾倒平皿上即成“平板”傾入試管內(nèi)即可制成“斜面培養(yǎng)基3)半固體培養(yǎng)基:當(dāng)液體培養(yǎng)基內(nèi)加入0.2~0.5%瓊脂時即成之。二、細(xì)菌人工培養(yǎng)的接種方法:(一)細(xì)菌分離培養(yǎng)接種法——平板劃線分離培養(yǎng)法目的:使混雜在一起的細(xì)菌分散生長。平板區(qū)劃線法培養(yǎng)后菌落的散布情況一個細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上,經(jīng)過一定時間的生長繁殖之后,所形成的肉眼可見的細(xì)菌集團(tuán),稱為菌落。很多菌落連在一起,融成一片,稱為菌苔。描述菌落:①大?。阂灾睆剑╩m)表示之,1mm左右為小菌落,2——3mm為中等大菌落,3mm以上為大菌落。②形成:圓形、卵圓形及不規(guī)則形。③邊緣:整齊或不

3、整齊、鋸齒狀、毛發(fā)狀等。④表面:光滑、濕潤、皺紋、干燥等。⑤隆起度:扁平、凸起、中心凹陷等。⑥透明度:透明、半透明、不透明。⑦顏色:無色、白色、黃色等。⑧溶血性:在血平板上產(chǎn)生溶血毒素的細(xì)菌,可以使培養(yǎng)基中的紅細(xì)胞破壞溶解,可分為完全溶血、草綠色溶血及不溶血(二)細(xì)菌純培養(yǎng)接種法目的:測試其生物學(xué)性狀、保種等。方法:斜面培養(yǎng)基接種液體培養(yǎng)基接種穿刺接種法斜面培養(yǎng)基接種法斜面上生長狀態(tài)觀察:可見有均勻一致的菌苔,如有不同的菌落出現(xiàn),則表明污染了雜菌。液體培養(yǎng)基接種法液體培養(yǎng)基中生長狀態(tài)觀察:示培養(yǎng)前的液體培養(yǎng)基多為清徹透明的。接種細(xì)菌后

4、,由于細(xì)菌種類不同,可有以下三種生長形式。①混濁:液體變?yōu)榛鞚?。②菌膜:液體澄清,表面有一薄膜。③沉淀:管底有沉淀物。半固體培養(yǎng)基接種方法半固體中生長狀態(tài)觀察:無鞭毛(無運動)的細(xì)菌,經(jīng)培養(yǎng)后僅沿穿刺線生長,培養(yǎng)基清亮。有運動的細(xì)菌,沿穿刺線向外擴(kuò)散,穿刺線摸糊不清,培養(yǎng)基混濁??諝庵屑?xì)菌的檢測一、實驗?zāi)康呐c原理二、實驗材料三、實驗方法咽拭培養(yǎng)實驗一、實驗?zāi)康呐c原理二、實驗材料血平板、棉簽三、實驗方法紫外線的殺菌作用一、實驗?zāi)康呐c原理了解紫外線對不同種細(xì)菌的殺菌作用及紫外線的穿透力。紫外線的殺菌波長范圍為240—280nm,265~2

5、66nm的作用最強。其主要是使DNA上相鄰的嘧啶通過共價鍵結(jié)合形成二聚體,影響DNA的正常鹼基配對。紫外線的穿透力很弱,其殺菌只限于表面的照射。二、實驗材料1、菌種:2、培養(yǎng)基:瓊脂平板3、紙片、鑷子及紫外線燈等三、實驗方法1、涂平板。2、打開皿蓋,蓋紙片。3、紫外線照射30分鐘。4、取掉紙片,蓋好皿蓋,37℃孵育24小時,觀察生長情況。皮膚消毒前后的細(xì)菌學(xué)檢查一、實驗?zāi)康呐c原理觀察消毒劑的消毒效果二、實驗材料1、2%碘酒,75%酒精2、瓊脂平板三、實驗方法細(xì)菌對抗生素的敏感性測定一、實驗?zāi)康呐c原理了解藥物敏感性試驗方法及實踐中的重要

6、意義二、實驗材料1、菌種:金黃色葡萄球菌6—8小時肉湯培養(yǎng)物。2、培養(yǎng)基:普遍瓊脂平板。3、抗生素:含各種抗生素干燥濾紙片、小鑷子、米尺等。三、實驗方法細(xì)菌對抗生素的敏感試驗(紙片法)四、實驗結(jié)果抑菌圈細(xì)菌對藥物敏感時,在該藥紙片周圍無細(xì)菌生長(該區(qū)稱抑菌環(huán))。細(xì)菌對藥物不敏感,藥紙片周圍有菌生長一般認(rèn)為抑菌環(huán)直徑6—10mm為低度敏感;10—15mm為中度敏感,15mm以上為高度敏感。

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